effecten van CCCP-geïnduceerde mitochondriale ontkoppeling en cyclosporine A op het celvolume, celbeschadiging en preconditioneringsbescherming van geïsoleerde konijnencardiomyocyten

zwelling van cellen kan bijdragen tot acute celbeschadiging na ischemie/reperfusie. De potentiële rol van mitochondriale ontkoppeling en de resulterende mitochondriale zwelling, als gevolg van opening van de mitochondriale permeabiliteit transitie porie (MPTP), werden onderzocht in een in vitro ischemisch gepelleteerd geïsoleerd konijn cardiomyocyt model met behulp van de protonofoor, carbonyl cyanide m-chloorfenylhydrazone (CCCP) te ontkoppelen mitochondriën. Cyclosporine A (CsA) werd gebruikt om de MPTP-opening te remmen. Het celvolume werd bepaald door middel van een cel-flotatie, dichtheid-gradiënttest, met behulp van bromododecaan. De levensvatbaarheid van de cellen, na een osmotische stress, werd bepaald door de permeabiliteit van trypan blue. Ischemische preconditionering (IPC) vergemakkelijkt volumeregulatie na een osmotische stress. Ischemisch-cel zwelling werd verminderd door IPC. IPC beschermde ischemisch gepelleteerde cellen, maar CsA had geen significante effecten op letsel of IPC-bescherming. CCCP ischemie versnelde tarieven van ischemische contractuur en verwonding, en schafte IPC bescherming. IPC bescherming werd hersteld door CsA. In CCCP-ischemisch-ontkoppelde cellen, onderworpen aan een verminderde (170 mOsm) osmotische spanning, boden CsA en IPC onafhankelijke en additieve bescherming. Chelerythrine en 5-hydroxydecanoaat (5-HD) blokkeerden IPC, maar verminderden de CSA-bescherming niet. De elektronenmicroscopie bevestigde dat CCCP ischemie mitochondriale matrixzwelling veroorzaakte die door CsA werd verminderd. Cardioprotectie door IPC en CsA ging gepaard met proportionele verlagingen van celzwelling. Morfometrische analyse van de elektronenfotomicrografen toonde aan dat de mitochondriale volumefracties significant werden verminderd in de CsA / CCCP (29.8 +/- 2.3%, P < 0,004) en IPC/CsA/CCCP (31.5 +/- 1.7%, P < 0.0008) groepen in vergelijking met de CCCP-ischemische groep (40.5 +/- 1.7%) de IPC / CCCP-groep (39.5 +/- 4.2%) verschilde niet significant van de CCCP-ischemische groep. NIM 811, een CSA-analoge MPTP-Blokker zonder calcineurineremmende activiteit, bood bescherming vergelijkbaar met CsA. De resultaten suggereren dat Csa bescherming kan, gedeeltelijk, worden gemedieerd door vermindering van mitochondriale zwelling.

Geef een antwoord

Het e-mailadres wordt niet gepubliceerd.