Abstrakt

det finns ett stort intresse för analytisk biokemi vid separation och identifiering av biologiskt viktiga polymerer, såsom DNA-protein och komplexa kolhydratmolekyler (1,2). För relativt korta enkelsträngade DNA-enheter (dvs oligonukleotider) och kolhydratmolekyler finns det ett behov av att separera med en enda basskillnad (för DNA-sekvensering) (3) eller till och med för identisk kedjelängd med en annan sekvens (identifiering av primers, prober och antisense-DNA-molekyler) (3,4). För de dubbelsträngade DNA-molekylerna finns det ett intresse att analysera och identifiera DNA-molekyler i form av restriktionsfragment eller PCR-produkter. Genom att använda olika typer av siktmedier kan vi göra dessa typer av separationer. Vid kapillärgelelektrofores kan tvärbundna eller icke-tvärbundna siktmatriser användas (5, 6, 7). De tvärbundna gelerna, dvs kemiska geler, har en väldefinierad porstorlek. Noncrosslinked, eller så kallade fysiska geler, har en dynamisk porstruktur. Denna stora skillnad ger de icke-tvärbundna linjära polymernätverken med mycket högre flexibilitet jämfört med de tvärbundna gelerna. Man kan arbeta vid höga temperaturer (upp till 50-70 kcal C) samtidigt som man applicerar extremt höga fältstyrkor (upp till 103 V/cm intervall) utan att skada de linjära polymernätverksformuleringarna (8. Det är viktigt att notera att de tvärbundna gelerna inte kan användas under sådana extrema förhållanden (9). Den andra största fördelen med det linjära polymernätverkssystemet är att det lätt kan bytas ut i kapillärkolonnen genom att helt enkelt skölja gelmatrisen genom kapillären genom tryck eller vakuum. Därför, om kolonnen blir förorenad, ersätts gelen enkelt och förlänger systemets livslängd. Genom att använda det utbytbara konceptet finns det en möjlighet att använda tryckinjektion jämfört med de tvärbundna gelerna där elektrokinetisk injektionsläge är den enda möjligheten (10). Det är viktigt att notera att förutom bekvämlighet tillåter tryckinjektion kvantitativ analys.