Kapillær gelelektroforese

abstrakt

der er stor interesse for analytisk biokemi i adskillelse og identifikation af biologisk vigtige polymerer, såsom DNA-protein og komplekse kulhydratmolekyler (1,2). For relativt korte enkeltstrengede DNA-enheder (dvs. oligonukleotider) og kulhydratmolekyler er der behov for at adskille med en enkelt baseforskel (til DNA-sekventering) (3) eller endda for identisk kædelængde med en anden sekvens (identifikation af primere, prober og antisense DNA-molekyler) (3,4). For de dobbeltstrengede DNA-molekyler er der en interesse i at analysere og identificere DNA-molekyler i form af restriktionsfragmenter eller PCR-produkter. Brug af forskellige typer sigtemedier giver os mulighed for at udføre denne slags adskillelser. I kapillær gelelektroforese kan tværbundne eller ikke-tværbundne sigtningsmatricer anvendes (5, 6, 7). De tværbundne geler, dvs. kemiske geler, har en veldefineret porestørrelse. Ikke-tværbundne eller såkaldte fysiske geler har en dynamisk porestruktur. Denne store forskel giver de ikke-tværbundne lineære polymernetværk meget højere fleksibilitet sammenlignet med de tværbundne geler. Man kan arbejde ved høje temperaturer (op til 50-70 liter C), mens man anvender ekstremt høje feltstyrker (op til 103 V/cm rækkevidde) uden nogen skade på de lineære polymernetværksformuleringer (8. Det er vigtigt at bemærke, at de tværbundne geler ikke kan anvendes under sådanne ekstreme forhold (9). Den anden største fordel ved det lineære polymernetværkssystem er, at det let kan udskiftes i kapillærkolonnen ved blot at skylle gelmatricen gennem kapillæren ved tryk eller vakuum. Derfor, hvis søjlen bliver forurenet, er gelen let udskiftes forlænge levetiden af systemet. Ved anvendelse af det udskiftelige koncept er der mulighed for anvendelse af trykinjektion sammenlignet med de tværbundne geler, hvor elektrokinetisk injektionstilstand er den eneste mulighed (10). Det er vigtigt at bemærke, at ud over bekvemmeligheden tillader trykindsprøjtning kvantitativ analyse.

Skriv et svar

Din e-mailadresse vil ikke blive publiceret.