Electroforese em Gel capilar

Abstract

existe um grande interesse na bioquímica analítica na separação e identificação de polímeros biologicamente importantes, tais como proteínas de ADN e moléculas complexas de hidratos de carbono (1,2). Para unidades de DNA de cadeia simples relativamente curtas (oligonucleótidos) e moléculas de carboidratos, há uma necessidade de se separar por uma única diferença de base (Para sequenciamento de DNA) (3) ou mesmo para um comprimento de cadeia idêntico com uma sequência diferente (identificação de iniciadores, sondas e moléculas de DNA antissense) (3,4). Para as moléculas de DNA de cadeia dupla, há um interesse em analisar e identificar moléculas de DNA na forma de fragmentos de restrição ou produtos de PCR. Usando vários tipos de meios de peneiração permite-nos fazer este tipo de separações. Em eletroforese em gel capilar, podem ser utilizadas matrizes de crivagem com ligação cruzada ou não com ligação transversal (5, 6, 7). Os géis cruzados, ou seja, os géis químicos, têm um tamanho de poros bem definido. Géis não ligados, ou chamados de géis físicos, têm uma estrutura dinâmica poros. Esta grande diferença proporciona às redes de polímeros lineares não interligadas uma flexibilidade muito maior em comparação com os géis interligados. Pode-se operar a altas temperaturas (até 50-70°C), aplicando concentrações de campo extremamente elevadas (até 103 V/cm) sem qualquer dano às formulações da rede linear de polímeros (8. É importante notar que os géis entrelaçados não são utilizáveis em tais condições extremas (9). A outra vantagem principal do sistema de rede de polímeros lineares é que ele pode ser facilmente substituído na coluna capilar simplesmente enxaguando a matriz de gel através do capilar por pressão ou vácuo. Portanto, se a coluna ficar contaminada, o gel é facilmente substituído estendendo a vida útil do sistema. Utilizando o conceito substituível, existe a possibilidade de utilizar a injecção de pressão em comparação com os géis de ligação cruzada em que o modo de injecção electrocinética é a única possibilidade (10). É importante notar que, além de conveniência, a injeção de pressão permite uma análise quantitativa.

Deixe uma resposta

O seu endereço de email não será publicado.