Kapillaarigeelielektroforeesi

Abstrakti

analyyttisessä biokemiassa on paljon kiinnostusta biologisesti tärkeiden polymeerien, kuten DNA-proteiinin ja monimutkaisten hiilihydraattimolekyylien (1,2) erottamiseen ja tunnistamiseen. Suhteellisen lyhyissä yksijuosteisissa DNA-yksiköissä (eli oligonukleotideissa) ja hiilihydraattimolekyyleissä on eroteltava toisistaan yhdellä emäserolla (DNA: n sekvensointia varten) (3) tai jopa samanpituisissa ketjuissa, joiden sekvenssi on erilainen (alukkeiden, koettimien ja antisense-DNA-molekyylien tunnistaminen) (3,4). Kaksijuosteisten DNA-molekyylien osalta on kiinnostusta analysoida ja tunnistaa DNA-molekyylejä restriktiofragmenttien tai PCR-tuotteiden muodossa. Erilaisten seulontavälineiden avulla voimme tehdä tällaisia erotteluja. Kapillaarielektroforeesissa voidaan käyttää ristisilloitettuja tai ei-krusslinkitettyjä seulomatriiseja (5, 6, 7). Ristisilloitetuilla geeleillä eli kemiallisilla geeleillä on tarkoin määritelty huokoskoko. Noncrosslinked eli niin kutsutut fysikaaliset geelit ovat rakenteeltaan dynaamisia huokosia. Tämä merkittävä ero tarjoaa noncrosslinked lineaarinen polymeeri verkot paljon enemmän joustavuutta verrattuna crosslinked geelit. Voidaan toimia korkeissa lämpötiloissa (jopa 50-70°C) ja käyttää erittäin suuria kenttävoimakkuuksia (jopa 103 V/cm: n alue) vahingoittamatta lineaarisia polymeeriverkkoformulaatioita (8. On tärkeää huomata, että ristikytketyt geelit eivät ole käyttökelpoisia tällaisissa äärimmäisissä olosuhteissa (9). Lineaarisen polymeeriverkkojärjestelmän toinen tärkein etu on se, että se voidaan helposti korvata kapillaarikolonnissa yksinkertaisesti huuhtelemalla geelimatriisi kapillaarin läpi paineen tai tyhjiön avulla. Siksi, jos kolonni saastuu, geeli korvataan helposti pidentämällä järjestelmän käyttöikää. Vaihdettavan konseptin avulla on mahdollista käyttää paineruiskutusta verrattuna ristisilloitettuihin geeleihin, joissa sähkökineettinen ruiskutustila on ainoa mahdollisuus (10). On tärkeää huomata, että mukavuuden lisäksi paineruiskutus mahdollistaa kvantitatiivisen analyysin.

Vastaa

Sähköpostiosoitettasi ei julkaista.