Kapilláris gélelektroforézis

absztrakt

az analitikai biokémia nagy érdeklődést mutat a biológiailag fontos polimerek, például a DNS-fehérje és a komplex szénhidrátmolekulák elválasztása és azonosítása iránt (1,2). Viszonylag rövid egyszálú DNS-egységek (azaz oligonukleotidok) és szénhidrátmolekulák esetében egyetlen báziskülönbséggel (DNS-szekvenáláshoz) (3) vagy akár azonos lánchosszúságú, eltérő szekvenciával (primerek, szondák és antiszensz DNS-molekulák azonosítása) (3,4) kell elválasztani. A kettős szálú DNS-molekulák esetében érdekes a DNS-molekulák elemzése és azonosítása restrikciós fragmensek vagy PCR-termékek formájában. Különböző típusú szitáló adathordozók használata lehetővé teszi számunkra az ilyen típusú elválasztásokat. Kapilláris gélelektroforézisben térhálósított vagy nem keresztezett szitáló mátrixok alkalmazhatók (5, 6, 7). A térhálósított gélek, azaz a kémiai gélek jól meghatározott pórusmérettel rendelkeznek. A nem keresztezett vagy úgynevezett fizikai gélek dinamikus pórusszerkezettel rendelkeznek. Ez a fő különbség a nem keresztezett lineáris polimer hálózatokat sokkal nagyobb rugalmassággal biztosítja a térhálósított gélekhez képest. Egy működhet magas hőmérsékleten (akár 50-70 Ft) alkalmazása közben rendkívül nagy térerősség (akár 103 V/cm tartományban) anélkül, hogy kárt a lineáris polimer hálózat készítmények (8. Fontos megjegyezni, hogy a térhálósított gélek ilyen szélsőséges körülmények között nem használhatók (9). A lineáris polimer hálózati rendszer másik fő előnye, hogy könnyen helyettesíthető a kapilláris oszlopban úgy, hogy a gélmátrixot nyomás vagy vákuum segítségével egyszerűen átöblítjük a kapillárison. Ezért, ha az oszlop szennyeződik, a gél könnyen cserélhető, meghosszabbítva a rendszer élettartamát. A cserélhető koncepció alkalmazásával lehetőség van nyomásinjekció alkalmazására a térhálósított gélekhez képest, ahol az elektrokinetikus befecskendezési mód az egyetlen lehetőség (10). Fontos megjegyezni, hogy a kényelem mellett a nyomás befecskendezése lehetővé teszi a mennyiségi elemzést.

Vélemény, hozzászólás?

Az e-mail-címet nem tesszük közzé.