Electroforeza în Gel capilar

rezumat

există un mare interes în biochimia analitică în separarea și identificarea polimerilor biologic importanți, cum ar fi proteina ADN și moleculele complexe de carbohidrați (1,2). Pentru unități de ADN monocatenare relativ scurte (adică oligonucleotide) și molecule de carbohidrați, este necesar să se separe printr-o singură diferență de bază (pentru secvențierea ADN) (3) sau chiar pentru lungimea lanțului identic cu o secvență diferită (identificarea primerilor, sondelor și moleculelor de ADN antisens) (3,4). Pentru moleculele de ADN dublu catenar, există interesul de a analiza și identifica moleculele de ADN sub formă de fragmente de restricție sau produse PCR. Utilizarea diferitelor tipuri de medii de cernere ne permite să facem aceste tipuri de separări. În electroforeza cu gel capilar, pot fi utilizate matrice de cernere reticulate sau noncrosslinked (5, 6, 7). Gelurile reticulate, adică gelurile chimice, au o dimensiune a porilor bine definită. Noncrosslinked, sau așa-numitele geluri fizice, au o structură dinamică a porilor. Această diferență majoră oferă rețelelor polimerice liniare noncrosslinked o flexibilitate mult mai mare în comparație cu gelurile reticulate. Se poate opera la temperaturi ridicate (până la 50-70 centimetrii C) în timp ce se aplică rezistențe de câmp extrem de ridicate (până la 103 v/cm) fără a deteriora formulările rețelei liniare de polimeri (8. Este important de reținut că gelurile reticulate nu pot fi utilizate în astfel de condiții extreme (9). Celălalt avantaj principal al sistemului de rețea liniară de polimeri este că poate fi ușor înlocuit în coloana capilară prin simpla clătire a matricei de gel prin capilar prin presiune sau vid. Prin urmare, dacă coloana devine contaminată, gelul este ușor înlocuit prelungind durata de viață a sistemului. Folosind conceptul înlocuibil, există posibilitatea utilizării injecției sub presiune în comparație cu gelurile reticulate, unde modul de injecție electrokinetică este singura posibilitate (10). Este important de menționat că, pe lângă confort, injecția de presiune permite analiza cantitativă.

Lasă un răspuns

Adresa ta de email nu va fi publicată.