Kapillær Gel Elektroforese

Abstrakt

det er stor interesse for analytisk biokjemi i separasjon og identifisering av biologisk viktige polymerer, slik SOM DNA-protein og komplekse karbohydratmolekyler (1,2). For relativt korte enkeltstrengede DNA-enheter (dvs. oligonukleotider) og karbohydratmolekyler, er det behov for å skille med en enkelt baseforskjell (FOR DNA-sekvensering) (3) eller til og med for identisk kjedelengde med en annen sekvens (identifikasjon av primere, prober og antisense DNA-molekyler) (3,4). For DE dobbeltstrengede DNA-molekylene er det en interesse å analysere OG identifisere DNA-molekyler i form av restriksjonsfragmenter eller PCR-produkter. Ved hjelp av ulike typer sikting media tillater oss å gjøre slike separasjoner. I kapillær gelelektroforese kan tverrbundne eller ikke-krossbundne siktematriser benyttes (5, 6, 7). De tverrbundne gelene, dvs. kjemiske geler, har en veldefinert porestørrelse. Noncrosslinked, eller såkalte fysiske geler, har en dynamisk porestruktur. Denne store forskjellen gir de ikke-kryssede lineære polymernettverkene mye høyere fleksibilitet sammenlignet med de tverrbundne gelene. Man kan operere ved høye temperaturer (opptil 50-70°C) mens man bruker ekstremt høye feltstyrker (opptil 103 V/cm rekkevidde) uten skade på de lineære polymernettformuleringene (8. Det er viktig å merke seg at de tverrbundne gelene ikke kan brukes under slike ekstreme forhold (9). Den andre hovedfordelen ved det lineære polymernettverkssystemet er at det enkelt kan byttes ut i kapillærkolonnen ved å skylle gelmatrisen gjennom kapillæren ved trykk eller vakuum. Derfor, hvis kolonnen blir forurenset, blir gelen lett erstattet og forlenger levetiden til systemet. Ved bruk av det utskiftbare konseptet er det en mulighet for bruk av trykkinjeksjon sammenlignet med de tverrbundne gelene der elektrokinetisk injeksjonsmodus er den eneste muligheten (10). Det er viktig å merke seg at i tillegg til bekvemmelighet tillater trykkinjeksjon kvantitativ analyse.

Legg igjen en kommentar

Din e-postadresse vil ikke bli publisert.