Electroforesis capilar en Gel

Resumen

Existe un gran interés en la bioquímica analítica en la separación e identificación de polímeros biológicamente importantes, como proteínas de ADN y moléculas complejas de carbohidratos (1,2). Para unidades de ADN monocatenario relativamente cortas (es decir, oligonucleótidos) y moléculas de carbohidratos, es necesario separarse por una sola diferencia de base (para secuenciación de ADN) (3) o incluso para una longitud de cadena idéntica con una secuencia diferente (identificación de cebadores, sondas y moléculas de ADN antisentido) (3,4). Para las moléculas de ADN de doble cadena, existe un interés en analizar e identificar moléculas de ADN en forma de fragmentos de restricción o productos de PCR. El uso de varios tipos de medios de tamizado nos permite realizar este tipo de separaciones. En la electroforesis capilar en gel, se pueden emplear matrices de tamizado reticuladas o no reticuladas (5, 6, 7). Los geles reticulados, es decir, los geles químicos, tienen un tamaño de poro bien definido. Los geles físicos no entrelazados, o los llamados geles físicos, tienen una estructura de poros dinámica. Esta gran diferencia proporciona a las redes de polímeros lineales no entrelazados una flexibilidad mucho mayor en comparación con los geles reticulados. Se puede operar a altas temperaturas (hasta 50-70°C) mientras se aplican resistencias de campo extremadamente altas (hasta un rango de 103 V/cm) sin dañar las formulaciones de la red de polímeros lineales (8. Es importante tener en cuenta que los geles reticulados no se pueden utilizar en condiciones tan extremas (9). La otra ventaja principal del sistema de red de polímeros lineales es que se puede reemplazar fácilmente en la columna capilar simplemente enjuagando la matriz de gel a través del capilar por presión o vacío. Por lo tanto, si la columna se contamina, el gel se reemplaza fácilmente extendiendo la vida útil del sistema. Empleando el concepto reemplazable, existe la posibilidad de usar inyección a presión en comparación con los geles reticulados, donde el modo de inyección electrocinética es la única posibilidad (10). Es importante tener en cuenta que, además de la comodidad, la inyección de presión permite el análisis cuantitativo.

Deja una respuesta

Tu dirección de correo electrónico no será publicada.