Einleitung

Rheumatoide Arthritis (RA) ist eine chronisch entzündliche Erkrankung, die Schmerzen und Funktionsstörungen verursacht und zur Zerstörung von Gelenken führt. Aktivierung und Rekrutierung von Immunzellen, insbesondere Lymphozyten und Monozyten in den Gelenken, sind majorcharacters von RA (1,2). Die Mechanismen, die der RA zugrunde liegen, sind komplex, einschließlich genetischer und umweltbedingter Faktoren sowie Anomalien sowohl der angeborenen Immunität als auch der adaptiven Immunität(3). Obwohl die Ätiopathologie der RA nicht vollständig verstanden ist, ist bekannt, dass Monozyten / Makrophagen, Neutrophile, T-Zellen und B-Zellen an den Mechanismen beteiligt sind, die den Beginn der RA antreiben (4).Diese Zellen spielen eine Schlüsselrolle beim Fortschreiten der RA durch die Produktion proinflammatorischer Zytokine, was zur Entwicklung einer entzündlichen Umgebung und der Rekrutierung von Immunzellen in den Gelenken führt.

Beim Menschen sind Monozyten eine heterogene Zellpopulation, die aus drei verschiedenen Untergruppen besteht, die auf ihrer Expression von CD14 und CD16 basieren (5). TheCD14 ++ CD16- classical Teilmenge ist die am meistenprominent aller zirkulierenden Monozyten. Die zweite Monozyten-Untergruppeexprimiert sowohl CD14- als auch CD16-Spiegel (CD14 ++ CD16 +). Es wird als intermediäre Monozyten bezeichnet. Die dritte Untergruppe umfasst nichtklassische Monozyten, die niedrige CD14-Spiegel und hohe CD16-Spiegel (CD14 + CD16 ++) exprimieren. Das CD14 ++ CD16- Monozyt ist die Hauptteilmenge, während die CD14 ++ CD16 + und CD14 + CD16 ++ Teilmengen in niedrigeren Zahlen als CD14 ++ CD16− Monozyten vorkommen (6). Die beiden CD14 ++ – Untergruppen werden daher bei verschiedenen entzündlichen Erkrankungen als expandierenderkannt und spielen eine bedeutende Rolle bei Krankheitsprozessen (7,8). Jüngste Berichte haben gezeigt, dass der Anteil der Monozytenuntergruppen bei RA-Patienten abweichend war (9,10).

CD64 (FcgRI), ein Fc-Rezeptor für IgG, wird konstitutiv auf Makrophagen und Monozyten exprimiert. CD64 ist der hochaffine Rezeptor für monomeres IgG oder Ig in Immunkomplexen, der immunologische und entzündliche Reaktionen auf immunkompetente Zellen, einschließlich Monozyten und gelenkstationierte Makrophagen, auslösen kann (11-13). Beweise aus Humanstudien und Tiermodellen haben gezeigt, dass CD64 eine wichtige Rolle bei der Pathogenese von Krebs spielt (14,15). Frühere Monozyten-cd64-Expressionsstudien bei RA haben jedoch widersprüchliche Befunde berichtet, die im Vergleich zu gesunden Freiwilligen (HV) erhöhte, verringerte oder ähnliche Expressionen zeigten (16-18). Die Rolle von CD64 auf Monozyten in derpathogenese der RA bleibt zu klären. Und ob CD64 die Funktion von Monozytenuntergruppen bei RA regulieren kann, muss noch geklärt werden.

In der vorliegenden Studie haben wir die Expression VONCD64 auf Monozytenuntergruppen bei Patienten mit RA und HV nachgewiesen. Die Korrelation zwischen der Expression von CD64 auf Monozytenuntergruppen und der Aktivität von RA wurde ebenfalls untersucht. Darüber hinaus wurde die Zytokinsekretion von CD64 + -Monozytenuntergruppen bei Patienten mit RA gemessen.

Patienten und Methoden

Probanden

Insgesamt 46 Patienten erfüllten die überarbeiteten Kriterien des American College of Rheumatology für RA (19) wurden aus dem FirstAffiliated Hospital der Nanchang University rekrutiert. Unter ihnen waren 5 Patienten neu auftretende RA (<6 Monate Krankheitsdauer) (20). Alle Patienten erhielten krankheitsmodifizierende Antirheumatika (DMARDs), Einschließlichglukokortikoid- und Immunsuppressortherapie. Die Krankheitsaktivität von rawurde unter Verwendung des Disease Activity Score 28 (DAS28) berechnet (21). Die Patientenmerkmalevon dieser Gruppe sind in der Tabelle gezeigt I.In darüber hinaus umfasste die vorliegende Studie 22 HV (weiblich 81,8%, Durchschnittsalter 51,2 ± 11,6 Jahre), die nicht mit den Patienten verwandt waren und keine entzündlichen oder Autoimmunerkrankungen hatten. Die Studie wurde von der Ethikkommission des ersten angeschlossenen Krankenhauses der Nanchanguniversität (019) genehmigt und in Übereinstimmung mit derHelsinki-Erklärung durchgeführt. Schriftliche Einverständniserklärung wurde von eingeholtalle Teilnehmer, bevor sie an der vorliegenden Studie teilnahmen.

Durchflusszytometrie-Analyse

Periphere mononukleäre Blutzellen (PBMCs) wurden aus dem frischen peripheren Blut von RA-Patienten und HV-onFicoll-Paque-Gradienten (Sigma-Aldrich; Merck KGaA, Darmstadt, Deutschland) isoliert. Die Membranmoleküle von Monozyten wurden analysiertsofort mit Durchflusszytometrie. Die folgenden Antikörper wurden verwendet: ECD-konjugiertes Anti-CD14, PC5-konjugiertes Anti-CD16 (BDBiosciences, San Diego CA, USA), PE-konjugiertes Anti-CD163, Anti-CD206 und Anti-CD86, FITC-konjugiertes Anti-CD80, Anti-CD40, Anti-CD64, anti-HLA-DR (MIH clones; eBioscience; Thermo FisherScientific, Inc., Waltham, MA, USA). Monozyten-Untergruppen identifiziert asdetailed oben auf der Grundlage ihrer Expression von CD14 und CD16 (5). Kurz gesagt, 5 × 105 PBMCs wurden gleichzeitig mit 10 µl ECD-konjugiertem Anti-CD14, 10 µl PC5-konjugiertem Anti-CD16 und PE-konjugiertem Anti-CD64 auf Eis im Dunkeln für 30 min inkubiert. Zellen, die mit PE-konjugiertem mouseIgG inkubiert wurden, wurden als Isotypkontrollen verwendet. Die Expression von CD64 wurde an jeder Monozyten-Teilmenge unter Verwendung eines CYTOMICS FC 500-Durchflusszytometers (Beckman Coulter, Inc., Brea, CA, USA) und Daten, die mit den zugehörigen Softwareprogrammen (CXP) analysiert wurden.

Serum-CRP-, IgG-, C3- und C4-Messung

Die Konzentrationen von Serum-C-reaktivem Protein(CRP), Immunglobulin G (IgG), Komplement 3 (C3) und Komplement 4(C4) wurden durch nephelometrische Methoden gemäß den vom Hersteller beschriebenen Anweisungen bestimmt (IMMUNE800; BeckmanCoulter, Inc.).

Erythrozytensedimentationsrate (ESR)Blutroutine Messung

ESR und Blutroutine wurden gemäß bestimmtdie vom Hersteller beschriebenen Anweisungen.

Autoantikörpermessung

Das Niveau des Rheumafaktors (RF) wurde unter Verwendung von Ephelometriemethoden gemäß den Anweisungen des Herstellers (IMMUNE800; Beckman Coulter, Inc.). Anti-Citrullinatedprotein-Antikörper (ACPA) aus Serum-IgG wurden mit kommerziellen ELISA-Kits (Kexin, Shanghai, China) gemessen.

Zytokinmessung

Humanes IL-10, IL-6 und IL-8 (Signalway Antibody LLC, College Park, MD, USA) wurden unter Verwendung kommerziell erhältlicher enzymgebundener Immunosorbens-Assays gemäß den Anweisungen des Herstellers gemessen.

Statistische Analyse

Statistische Analyse und grafische Darstellung wurden mit GraphPad Prism v.5.0 (GraphPad Software, Inc., LaJolla, KALIFORNIEN, USA). Darüber hinaus wurde der T-Test des Schülers verwendet, bei dem der Normalwerttest bestanden wurde; Andernfalls wurde der nichtparametrische Mann-Whitneytest zur Analyse der Daten verwendet. Ebenso wurde die Pearson-Methode oder die nichtparametrische Spearman-Methode für die Korrelationsanalyse verwendet. P<0,05 wurde als statistisch signifikanter Unterschied angesehen.

Ergebnis

Erhöhte Expression von CD64 in den Monozyten von RA-Patienten

Die Monozyten in PBMCs wurden auf die Expression von Membranmolekülen einschließlich CD40, CD64, CD163, CD206, HLA-DR, CD80 und CD86 durch Durchflusszytometrie analysiert. Repräsentative Dotplots von Population Gating und CD64 exprimierenden Zellen von RApatients und HV wurden in Abb.1A. Die Ergebnisse zeigten, dass die Expression von CD64 auf Monozyten bei RA-Patienten im Vergleich zu HV signifikant erhöht war (P = 0,0103; Abb. 1B). Kein signifikanter Unterschiedwurde in der Expression von CD40, CD163, CD206, HLA-DR, CD80,CD86 auf Monozyten zwischen RA-Patienten und HV beobachtet (Abb. 1).

Anteile jedes Monozytensubsets

Repräsentative Punktdiagramme jedes Monozytensubsets aus der durchflusszytometrischen Analyse von CD14++CD16−(P1), CD14++ CD16+ (P2) und CD14+CD16++ (P3) Blutmonozyten von HV- und RA-Patienten sind in Abb. 2A. Die drei monocytesubsets in Gesamtmonozyten von peripheren Blutzellen von Patienten mit RA und gesunden Freiwilligen sind in Abb. 2B. Der Anteil der CD14 ++ CD16 + −Monozyten bei Patienten mit RA war signifikant höher als bei HV (P <0,0001), während der Anteil der CD14 ++ CD16- und CD14 + CD16 + – Monozyten bei Patienten mit RA signifikant niedriger war als bei HV (P = 0,0237; P =0,0044). Darüber hinaus ist, wie in Fig. 2C war der Anteil von CD14++CD16+ Monozyten in PBMCs bei Patienten mit RA signifikant erhöht als bei HV(P=0.0011), wenn sich die CD14++ CD16− und CD14 + CD16++ -Monozyten zwischen den beiden Gruppen nicht unterschieden.

CD64−Expression auf Monozyten-Untergruppen bei RA-Patienten und HV

Um das Expressionsprofil von CD64 auf Monozyten-Untergruppen bei RA-Patienten und HV zu bestimmen, verwendeten wir die Durchflusszytometrie, um die Expression von CD64 auf Monozyten-Untergruppen einschließlich CD14 ++ CD16-Monozyten, CD14 ++ CD16 + -Monozyten und CD14 + CD16 ++ -Monozyten (Abb. 3). Die Daten zeigten, dass sich die Häufigkeit von CD64-exprimierenden CD14 ++ CD16−Monozyten, CD64-exprimierenden CD14 ++ CD16 + -Monozyten und CD64-exprimierenden CD14 + CD16 ++ – Monozyten zwischen den beiden Gruppen nicht unterschied (Abb. 3B) war die mittlere Fluoreszenzintensität(MFI) von CD64 auf CD14++CD16− Monozyten, CD14++CD16 + -Monozyten und CD14 + CD16++ -Monozyten bei Patienten mit RA im Vergleich zu HV signifikant erhöht (P<0,0001; Abb. 3C). Ferner zeigten die Ergebnisse, dass die Häufigkeit von CD64-exprimierenden CD14 ++ CD16-Monozyten und CD64-exprimierenden CD14 ++ CD16 + Monozyten im Vergleich zu CD64-exprimierenden CD14 + CD16 ++ Monozyten in beiden HV signifikant erhöht war (P <0.0001; Abb. 3D) und RApatients (P<0.0001; Abb. 3F).Und die Häufigkeit von CD64-expressingCD14 ++ CD16- Monozyten war signifikanterhöht im Vergleich zu CD64-expressingCD14 ++ CD16 + Monozyten bei RA-Patienten (P<0.0001; Abb. 3F), aber in HV wurden keine Unterschiede gefunden (P=0,1389; Fig. DREIDIMENSIONAL). Wie in Fig. 3E und G war die Expression von CD64CD14 ++ CD16− Monozyten undCD14 ++ CD16 + Monozyten signifikant erhöht im Vergleich zu CD14 + CD16 ++ Monozyten bei RA-Patienten (P<0,0001) und HV (P<0,0001). Darüber hinaus untersuchte Wein die Korrelation zwischen der Expression von CD64 auf Monozyten-Teilmengen und den Anteilen jeder Monozyten-Teilmenge. Daten zeigten, dass der Anteil an CD14 ++ CD16−Monozyten negativ mit der Expression von CD64 onCD14 ++ CD16−Monozyten korrelierte (r = 0,4541, P = 0,0002; Abb. 3H), während der Anteil VONCD14++ CD16 + Monozyten positiv korreliertmit der Expression von CD64 auf CD14++ CD16 + Monozyten bei RA-Patienten (r = 0,4352, P= 0,0032; Abb. 3I). Es wurde jedoch keine offensichtliche Korrelation zwischen der Expression von CD64CD14 + CD16 ++ – Monozyten und den Anteilen voncd14 + CD16 ++ – Monozyten beobachtet (r = 0,1910, P = 0,2140; Abb. 3J). Es wurde keine offensichtliche Korrelation zwischen der Expression von CD64 auf Monozytenuntergruppen und den Anteilen jeder Monozytenuntergruppe in HV beobachtet (Daten nicht angezeigt).

Expression von CD64 auf Monozyten-Untergruppen korreliert mit Entzündungsmarkern

Patienten mit RA haben häufig erhöhte Konzentrationen von Entzündungsmarkern. Um die Beziehung zwischen der Expression von CD64 auf Monozytenuntergruppen und Entzündungsmarkern zu bestimmen, wurden Entzündungsmarker wie ESR, CRP, weiße Blutkörperchen (WBC), Neutrophilenzahl, Neutrophilenanteil, IgG, C3 und C4 bestimmt und auf ihre Beziehung zur Expression von CD64 auf CD14 ++ CD16− Monozyten, CD14 ++ CD16 + -Monozyten und CD14 + CD16 ++ – Monozyten bei Patienten mit RA analysiert.Die Expression von CD64 auf CD14 ++ CD16-Monozyten korrelierte positiv mit ESR und CRP bei RA-Patienten(r= 0,4853, P= 0,0013, Abb. 4A; r=0,4484, P=0,0061, Fig. 4B), Dieexpression von CD64 auf CD14 ++ CD16 + Monozytenpositiv korreliert mit ESR und CRP bei RA-Patienten (r0,5128, P = 0,0006, Abb. 4C; r=0,4721, P=0,0036, Fig. 4D), die Expression von CD64 auf CD14 + CD16++ Monozyten positiv korreliert mit ESR (r = 0,3336, P = 0,0330, Abb. 4E), während die Expression von CD64-onCD14+CD16++ -Monozyten nicht mit CRP korrelierte (r= 0,1356, P=0,4297, Abb. 4F).Es wurde jedoch kein offensichtlicher Zusammenhang zwischen der Expression von CD64 auf CD14 ++ CD16− Monozyten, CD14 + CD16 ++ – Monozyten, CD14 ++ CD16 + – Monozyten und WBC, Neutrophilenzahl, dem Prozentsatz an Neutrophilen, IgG, C3, C4 (Daten keine Show).

Expression von CD64 auf Monozyten-Teilmengen korreliert mit Markern der Autoimmunantwort

Die Hallmark-Antikörper von RA, wie RF und ACPA, wurden bestimmt und auf ihre Korrelation mit Derexpression von CD64 auf Monozyten-Teilmengen analysiert. Wie in Fig. 5, die Expression von CD64 onCD14 ++ CD16- Monozyten undCD14 ++ CD16 + Monozyten waren bei Patienten mit positivem ACPA bzw. RF signifikant erhöht (P = 0,0460, Abb. 5A; P=0,0035, Fig. 5B; P=0,0416, Fig. 5C; P=0,0042, Fig. 5D). Es wurde jedoch keine offensichtliche Beziehung zwischen der Expression von CD64-onCD14+ CD16 ++ – Monozyten und ACPA, RF (P = 0,6718, Abb. 5E; P=0,8128, Fig. 5F).

Expression von CD64 auf Monozyten-Untergruppen korreliert mit der Krankheitsaktivität von RA

Die oben genannten Daten zeigten, dass die Expression von CD64 auf Monozyten-Untergruppen mit Markern von korrelierte Entzündung und Autoimmunantwort. Daher wurde die Korrelation zwischen der Expression von CD64 auf Monozytenuntergruppen und der Krankheitsaktivität untersucht. Die Daten zeigten, dass sowohl die Expression von CD64CD14 ++ CD16- Monozyten als auchcd14 ++ CD16 + Monozyten waren positivkorreliert mit dem DAS28-Score (r = 0,3506, P = 0,0212; r = 0,3208, P = 0,0360) (Abb. 6A und B), während die Expression von CD64 auf CD14 + CD16 ++ Monozytenkorrelierte nicht mit dem DAS28-Score (r = 0,2587, P = 0,0938; Abb. 6C).

Anschließend verglichen wir die CD64-Expression auf Monozyten-Teilmengen zwischen Patienten mit neu auftretendem und wiederbesuchenra. Die Daten zeigten, dass die Expression von CD64 auf Monozyten-Untergruppen bei Patienten mit neu auftretender RA tendenziell erhöht ist, aber ein signifikanter Unterschied wurde nicht erreicht (P >0,0500; Abb. 6D).

Assoziation zwischen der Expression VONCD64 auf Monozytenuntergruppen und der Serumzytokinkonzentration

Unter den drei inflammatorischen Zytokinen im Serum waren die Spiegel von IL-6 und IL-8 bei Patienten mit RA signifikant höher alsin HV (P = 0,0011, Abb. 7A; P=0,0387, Fig. 7B), kein signifikanter Unterschiedwurde in den Spiegeln von IL-10 zwischen Patienten mit RA und HV beobachtet(P = 0,8994; Abb. 7C). Um festzustellen, ob erhöhte CD64-Spiegel auf Monozytenuntergruppen eine Rolle bei der Sekretion von Serumzytokinen (IL-6 und IL−8) spielen, wurden RA−Patienten entsprechend ihren CD64-Spiegeln (durchschnittlicher MFi) auf Monozytenuntergruppen in zwei Gruppen eingeteilt: RA hoch (CD64 onCD14 ++CD16- >39.32, CD64 onCD14++CD16+ >43.19, CD64 onCD14+CD16++ >25.87) und RAlow(CD64 auf CD14++CD16- <39.32,CD64 auf CD14++CD16+ <43.19, CD64 onCD14+CD16++ <25.87). RA-Patienten mit hohen CD64-Spiegeln auf CD14 ++ CD16 + -Monozytenim Vergleich zu RAPATIENTEN mit niedrigen CD64-Spiegeln auf CD14 ++ CD16 + -Monozyten zeigten signifikant höhere IL-6-Spiegel (P = 0,0131; Abb. 7D). Es wurde kein signifikanter Unterschied in den IL-6−Spiegeln zwischen RA−Patienten mit hohen CD64-Spiegeln auf CD14 ++ CD16- orCD14 + CD16 ++ – Monozyten und niedrigen cd64-Spiegeln auf CD14 ++ CD16- orCD14 + CD16 ++ – Monozyten beobachtet (P >0,05; Abb. 7D). Und es wurde kein signifikanter Unterschied in den IL-8-Spiegeln zwischen RA-Patienten mit hohen CD64-Spiegeln in jeder Monozyten-Untergruppe und niedrigen CD64-Spiegeln in jeder Monozyten-Untergruppe beobachtet (P >0.05; Abb.7E). Diese Ergebnisse zeigen, dass erhöhte Spiegel von CD64 onCD14 ++ CD16 + Monozyten bei RA-Patienten mit einer erhöhten Sekretion von IL-6 assoziiert sind.

Diskussion

Monozyten sind eine heterogene Zellpopulationbesteht aus klassischen Monozyten(CD14++CD16−), intermediären Monozyten(CD14++CD16+) und nichtklassischen Monozyten(CD14+CD16++). Die drei Teilmengen von Monozytenführen unterschiedliche Funktionen aus. Die klassische Untergruppe wird schnell an die Entzündungsstellen rekrutiert und scheint asphagozytäre Aasfresser und Entzündungsregulatoren zu wirken (22,23). Dasintermediate Monozyten spielen eine proinflammatorische Rolle, da sie im Blut von Patienten mit akuter Entzündung erhöht werden (24,25). Nichtklassische Monozyten werden oft als patrouillierende Monozyten bezeichnet (26). Frühere Forschungen haben berichtet, dass Monozyten eine wichtige Rolle beim Fortschreiten der Krankheit spielen. Der Beginn und der Schweregrad der RA könnten auch darauf zurückzuführen sein, dass die Saisonalität der Monozytenuntergruppen abweichend war.

Obwohl über einen Anstieg inCD14++CD16+ Monozyten und einen Rückgang inCD14++CD16− Monozyten bei Patienten mit RAhave berichtet wurde, blieb der Anstieg inCD14+CD16++ Monozyten umstritten(27,28). In Übereinstimmung mit dem Bericht vonpatricia Lacerte (28) zeigt diese Studie, dass zirkulierende CD14 ++ − CD16 + – und CD14 + – CD16 ++ -Monozyten erhöht sind, während zirkulierende CD14 ++ – CD16- Monozyten sindabgenommen bei Patienten mit RA. Die Gründe für diese Ergebnisse sind wahrscheinlich auf Unterschiede in der Krankheitsdauer und den laufenden Behandlungen zurückzuführen.

Eine Beurteilung der Expression der charakteristischen phänotypischen Marker CD40, CD64, CD163, CD206, HLA-DR, CD80 und CD86 half, die Monozytenantwort bei Patienten mit RA weiter zu charakterisieren. In Übereinstimmung mit den Ergebnissen von otherresearches (16,29), fanden wir, dass der Ausdruck von CD64on Monozyten in RA-Patienten verglichen mithv, keine Änderungen anderer Kennzeichen zwischen Patienten mit RA und HV bedeutsam erhöht wurde.Die erhöhte Expression von CD64 auf Monozyten bei Patienten mitaktiver RA kann auf das Fortschreiten der Krankheit hindeuten (16) und kann auch die Aktivierung der Monozyten widerspiegeln. Obwohl ein Anstieg von CD64 auf Monozytenuntergruppen bei Patienten mit RA berichtet wurde (30), wurde die Möglichkeit einer Korrelation zwischen der Expression von CD64 auf jeder Monozytenuntergruppe und der Krankheitsaktivität bei Patienten mit RA noch nicht untersucht. Unsere Ergebnisse stützen frühere Beobachtungen (30) und zeigen, dass die Expression von CD64 onCD14 ++ CD16− Monozyten und CD14 ++ CD16 + −Monozyten signifikant erhöht war im Vergleich zu CD14 + CD16 ++ – Monozyten bei älteren Patienten und die Expression von CD64 onCD14 ++ CD16- Monozyten und CD14 ++ CD16 + -Monozyten waren positiv mit dem DAS28-Score korreliert.

Es ist wenig über die Möglichkeit eines Zusammenhangs zwischen der Expression von CD64 auf jeder Monozytenuntergruppe und dem Anteil jeder Monozytenuntergruppe bei Patienten mit RA bekannt. Wir fanden heraus, dass der Anteil der CD14 ++ CD16 + −Monozyten positiv mit der Expression von CD64 onCD14 ++ CD16 + −Monozyten bei RA-Patienten korrelierte, wohingegen der Anteil der CD14 ++ CD16- Monozytennegativ mit der Expression von CD64 onCD14 ++ CD16- Monozyten korrelierte. Die Gründe für die Ergebnisse sind wahrscheinlich auf die Tatsache zurückzuführen, dass der Anteil der zwischenzeitlichen Monozyten positiv mit der Krankheitsaktivität der RA korrelierte, während der Anteil der klassischen Monozytennegativ korrelierte (27) und unsere Ergebnisse zeigten, dass die Expression von CD64 onCD14 ++ CD16− Monozyten undCD14 ++ CD16 + Monozyten positiv mit dem DAS28-Score korrelierte.

Es ist bekannt, dass RA a ist Autoimmunkrankheitgekennzeichnet durch die Produktion von Autoantikörpern einschließlich RF, ACPA und Autoimmunantwort ist eine Art chronische Entzündunggegen Selbstantigene. In dieser Studie wurden die Entzündungsmarker DAS28, die Hallmark-Antikörper von RA einschließlich RF und ACPA, zuerst bestimmt und auf ihre Beziehung zur Expression von CD64 auf Monozytenuntergruppen analysiert. Unsere Ergebnisse zeigten, dass die Expression von CD64 auf CD14 ++ CD16- undCD14 ++ CD16 + Monozyten positiv mit ESR, CRP und DAS28 zusammenhing, während die Expression von CD64 auf CD14 + CD16 ++ Monozyten nicht MITCRP und DAS28 korrelierte. Darüber hinaus fanden wir die Expression von CD64 aufcd14 ++ CD16− Monozyten undCD14 ++ CD16 + Monozyten waren bei Patienten mit positiver RF bzw. ACPA signifikant erhöht, während keine offensichtliche Beziehung zwischen der Expression VONCD64 auf CD14 ++ CD16 + Monozyten und RF, ACPA gefunden wurde.Dies kann sein, dass (1) CD14 ++ CD16− Monozyten undCD14 ++ CD16 + Monozyten scheinen als zu wirkenregulatoren der Entzündung, WOASCD14 + CD16 ++ Monozyten oft als bezeichnetpatrouillierende Monozyten (22-26); (2) CD64 ist ein hochaffiner aktivierender Rezeptor, der IgG undCRP binden und entzündliche Prozesse stimulieren kann (16,31,32).

In Übereinstimmung mit der vorherigen Studie (27) zeigten wir hier, dass die IL-6- und ILL-8-Spiegel zu Studienbeginn bei Patienten mit RA signifikant höher waren als bei HV. Darüber hinaus beobachteten wir, dass RA-Patienten mit hohen CD64-Spiegeln auf CD14 ++ CD16 + -Monozyten signifikant höhere IL-6-Spiegel aufwiesen als RA-Patienten mit niedrigen CD64-Spiegeln auf CD14 ++ CD16 + -Monozyten. Diese Ergebnisse deuten darauf hin, dass die Spiegel von CD64 onCD14 ++ CD16 + Monozyten ist in der Tat mit Dersekretion verbunden hohe Konzentrationen von proinflammatorischen Zytokinen.

Es gibt jedoch einige Einschränkungen in der Gegenwartstudie. Erstens ist die relativ kleine Stichprobengröße, insbesondere die Stichprobe der neu auftretenden RA; Diese Daten können in groß angelegten Studien bestätigt werden. Zweitens haben wir nicht gezeigt, dass jede Monozyten-Untergruppe direkt mit entzündlichen Zytokinen in RA Invitro assoziiert ist. Drittens wurden in dieser Studie keine Funktionsstudien und Experimente zum Mechanismus von CD64 durchgeführt. Die molekularen Mechanismen, die den CD64-Funktionen bei RA zugrunde liegen, bedürfen noch weiterer Untersuchungen.

Zusammenfassend zeigen die in dieser Studie vorgestellten Ergebnisse, dass Blutmonozytenuntergruppen, die von Patienten MITRA isoliert wurden, hohe CD64−Spiegel aufweisen und die CD64-Spiegel onCD14 ++ CD16- undCD14 ++ CD16 + -Monozyten korrelieren mit der Krankheitsaktivität von RA. Darüber hinaus sind die Spiegel von CD64-onCD14 ++ – CD16 + – Monozyten mit dem hohen Sekretionsniveau von proinflammatorischen Zytokinen verbunden.

Danksagung

Die Autoren möchten die Hilfe von Dr. Rui Wu von der Abteilung für Rheumatologie, dem ersten angeschlossenen Krankenhaus der Nanchang University, Nanchang, Jiangxi, China, anerkennen.

Finanzierung

Die vorliegende Studie wurde von der NationalNatural Science Foundation of China (grant no. 81360459), JiangxiProvincial Natural Science Foundation of China (Grant no.20151BAB215031 und 20171BAB205113), der Science and TechnologyProject of Health and Family Planning Commission der JiangxiProvince of China (Grant No. 20165094) , das Wissenschafts- und Technologieplan-Projekt der Bildungsabteilung der Provinz Jiangxi (grantno. GJ170008) und der Foundation for Distinguished Young Scientistsof der chinesischen Provinz Jiangxi (grant no. 20171BCB23087).

Verfügbarkeit von Daten und Materialien

Die in der aktuellen Studie verwendeten und/oder analysierten Datensätze sind auf Anfrage beim entsprechenden Autor erhältlich.

Beiträge der Autoren

QL beteiligte sich an der Gestaltung der Studie, führte statistische Analysen durch und entwarf das Manuskript. PCX beteiligte sich am Design der Studie und half bei der Überarbeitung des Manuskripts. Xldurchführte Durchflusszytometrieanalyse und entwarf das Manuskript. ZD führte statistische Analysen durch und entwarf das Manuskript. cqführte die Datenerfassung von Markern der Autoimmunantwort durch,führte statistische Analysen durch und entwarf das Manuskript. rgsdurchgeführt Datenerfassung von Entzündungsmarkern, durchgeführtstatistische Analysen und entwarf das Manuskript. JQX führte eine Datenerfassung der Krankheitsaktivität und des Schweregrads durch, führte statistische Analysen durch und entwarf das Manuskript. YG führte die Experimente zur Expression von Zytokinen durch und entwarf das Manuskript. ZKH und JML konzipierten die Studie, beteiligten sich an deren Gestaltung und Koordination und halfen bei der Ausarbeitung des Manuskripts. Allauthors gelesen und genehmigt das endgültige Manuskript.

Ethische Genehmigung und Zustimmung zur Teilnahme

Die Studie wurde von der Ethikkommission des Ersten angeschlossenen Krankenhauses der Universität Nanchang (019) genehmigt und in Übereinstimmung mit der Helsinki-Erklärung durchgeführt. Vor Beginn der Studie wurde von allen Teilnehmern eine schriftliche Einwilligung eingeholt.

Zustimmung des Patienten zur Veröffentlichung

Nicht anwendbar.

Konkurrierende Interessen

Die Autoren erklären, dass sie keine konkurrierenden Interessen haben.

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