wprowadzenie

reumatoidalne zapalenie stawów (RZS) jest przewlekłym zapaleniem, które powoduje ból i dysfunkcję i prowadzi do uszkodzenia stawów. Aktywacja i Rekrutacja komórek odpornościowych, zwłaszcza limfocytów i monocytów do stawów, są głównymi objawami RZS (1,2). Mechanizmy leżące u podstaw RZS są złożone, w tym czynniki genetyczne i środowiskowe, a także nieprawidłowości zarówno odporności wrodzonej, jak i odporności adaptacyjnej (3). Chociaż etiopatologia ofRA nie jest w pełni poznana, wiadomo, że monocyty / makrofagi, neutrofile, komórki T i komórki B biorą udział w mechanizmach, które napędzają początek RZS (4).Komórki te odgrywają kluczową rolę w postępie RZS poprzez wytwarzanie prozapalnych cytokin, co prowadzi do rozwoju środowiska zapalnego i rekrutacji komórek odpornościowych w punktach.

u ludzi monocyty są heterogenicznymi komórkami składającymi się z trzech odrębnych podgrup opartych na ekspresji CD14 i CD16 (5). CD14++ CD16-podgrupa klasyczna jest najbardziej rozpowszechnioną ze wszystkich krążących monocytów. Druga podgrupa monocytów wykazuje poziomy CD14 i CD16 (CD14++CD16+). Określa się go jako monocyty pośrednie. Trzeci podzbiór obejmuje nieklasyczne monocyty, które wyrażają niskie poziomy CD14 i wysokie poziomy CD16 (CD14+CD16++). Głównym podzbiorem jest CD14++ CD16− monocyte, natomiast podzbiory CD14++ CD16+i CD14+ CD16++ występują w mniejszej liczbie niż CD14++ CD16-monocyte (6). Dwa podzbiory CD14++ są rozpoznawane jako rozwijające się w różnych chorobach zapalnych i mają odgrywać znaczącą rolę w procesach chorobowych (7,8). W ostatnich raportach wykazano, że odsetek podgrup monocytów byłniezwartościowy u pacjentów z RZS (9,10).

CD64 (FcgRI), receptor Fc dla IgG, ulega ekspresji na makrofagach i monocytach. CD64 jest receptorem o wysokim powinowactwie dla monomerycznych IgG lub Ig w kompleksach immunologicznych, które mogą inicjować reakcje immunologiczne i zapalne na kompetentnych komórkach immunologicznych, w tym monocytach i mikrofagach stawowych (11-13). Dowody zarówno z badań na ludziach, jak i z modeli zwierzęcych wykazały, że CD64 odgrywa ważną rolę w patogenezie (14,15). Jednakże wcześniejsze badania ekspresji Cd64 w RZS wykazały sprzeczne wyniki, wykazujące zwiększoną, zmniejszoną lub podobną ekspresję w porównaniu z ochotnikami do leczenia zdrowiem (HV) (16-18). Rola CD64 na monocytach w patogenezie RZS pozostaje do wyjaśnienia. I, czy CD64 może regulować funkcję podzbiorów monocytów w RZS pozostaje do beclarified.

w niniejszym badaniu wykryto ekspresję cd64 w podgrupach monocytów u pacjentów z RZS i HV. Badano także zależność ekspresji CD64 w podgrupach monocytów od aktywności RZS. Ponadto, cytokinesecretion cd64 + monocyte podzbiorów u pacjentów z RAwas zmierzone.

pacjenci i metody

pacjenci

w sumie 46 pacjentów spełniło kryteria reumatologii Amerykańskiej Akademii reumatologii (19), rekrutowano z pierwszego szpitala stowarzyszonego Uniwersytetu Nanchang. Wśród nich, 5 pacjentów było nowo wystąpieniem RZS (<6-miesięczny czas trwania choroby) (20). Wszystkim pacjentom podawano leki przeciwreumatyczne modyfikujące przebieg choroby (DMARDs), w tym leczenie glukokortykoidem i immunosupresorem. Aktywność chorobowa RAwas obliczona na podstawie wskaźnika aktywności choroby 28 (DAS28) (21). Charakterystykę pacjentów tej grupy przedstawiono w tabeli I.In ponadto, niniejsze badanie obejmowało 22 HV (kobiety 81,8%, średni wiek 51,2±11,6 lat), które nie były związane z pacjentami i nie miały chorób zapalnych lub autoimmunologicznych. Badanie zostało zatwierdzone przez Komisję Etyki pierwszego stowarzyszonego szpitala NanchangUniversity (019) i zostało przeprowadzone zgodnie z deklaracją Helsinki. Pisemna, świadoma zgoda została uzyskana od wszystkich uczestników przed wejściem do niniejszego badania.

Analiza cytometrii przepływowej

ze świeżej krwi obwodowej pacjentów z RZS i gradientem HV onFicoll-Paque (Sigma-Aldrich; Merck KGaA, Darmstadt,Niemcy). Cząsteczki membranowe monocytów analizowano pośrednio za pomocą cytometrii przepływowej. Zastosowano następujące przeciwciała: sprzężone z ECD anty-CD14, sprzężone z PC5 anty-CD16 (BDBiosciences, San Diego CA, USA), sprzężone z PE anty-CD163, anty-CD206 i anty-CD86, sprzężone z FITC anty-CD80, anty-CD40,anty-CD64, anty-HLA-DR (klony MIH; eBioscience; Thermo FisherScientific, Inc., Waltham, MA, USA). Podgrupy monocytów zidentyfikowane jako wyszczególnione powyżej na podstawie ich ekspresji CD14 i CD16 (5). Krótko mówiąc, 5×105 PBMC inkubowano jednocześnie 10 µl anty-CD14 sprzężonego z ECD, 10ΜL anty-CD16 sprzężonego z PC5 i anty-CD64 sprzężonego z PE na lodzie w ciemności przez 30 minut. Komórki inkubowane ze sprzężoną z PE mouseIgG wykorzystano jako kontrolę izotypu. Ekspresję CD64 analizowano w każdej podgrupie monocytów za pomocą cytomiki FC 500 cytometru przepływowego (Beckman Coulter, Inc., Brea, CA, USA) oraz dane analizowane za pomocą programów towarzyszących (CXP).

pomiar CRP, IgG, C3 I C4 w surowicy

stężenia białka C-reaktywnego w surowicy(CRP), immunoglobuliny G (IgG), dopełniacza 3 (C3) i dopełniacza 4(C4) oznaczono metodami nefelometrii zgodnie z instrukcjami opisanymi przez producenta (IMMUNE800; BeckmanCoulter, Inc.).

szybkość sedymentacji erytrocytów (ESR)rutynowe pomiary krwi

ESR i rutynowe pomiary krwi określono zgodnie z instrukcjami opisanymi przez producenta.

pomiar autoprzeciwciał

poziom czynnika reumatoidalnego (RF) oznaczono metodą nefelometrii zgodnie z instrukcjami opisanymi przez producenta (IMMUNE800; Beckman Coulter, Inc.). Anty-cytrulinowane przeciwciała proteinowe (ACPA) z surowicy IgG mierzono za pomocą komercyjnych zestawów ELISA (Kexin, Szanghaj, Chiny).

pomiar cytokin

Ludzkie IL-10, IL-6 i IL-8 (Signalway Antibody LLC,College Park, MD, USA) mierzono za pomocą dostępnych w handlu testów immunosorbentów związanych z enzymem, zgodnie z instrukcjami producenta.

analiza statystyczna

analiza statystyczna i prezentacja graficzna zostały przeprowadzone za pomocą GraphPad Prism V.5.0 (GraphPad Software, Inc., LaJolla, CA, USA). Ponadto zastosowano test t-Studenta, w którym zdano test normalności; w przeciwnym razie do analizy danych użyto nieparametrycznego testu Mann-Whitneytest. Podobnie do analizy korelacji wykorzystano metodę Pearsona orthe nonparametric Spearmana. P < 0.05

wynik

zwiększona ekspresja CD64 w monocytach chorych na RZS

monocyty w PBMC analizowano pod kątem ekspresji cząsteczek błonowych, w tym CD40, CD64,CD163, CD206, HLA-DR, CD80 i CD86 za pomocą cytometrii przepływowej. Na Fig.1A. Wyniki wykazały, że ekspresja CD64 na monocytach była znacząco podwyższona u pacjentów z RZS w porównaniu do HV (P=0,0103;Fig. 1B). Nie zaobserwowano istotnych różnic w ekspresji CD40, CD163, CD206, HLA-DR, CD80, CD86 na monocytach pomiędzy pacjentami z RZS a HV (Fig . 1).

proporcje poszczególnych monocytówubset

reprezentatywne wykresy punktowe każdej podgrupy monocytów z analizy cytometrii przepływowej monocytów krwi CD14++CD16−(P1), CD14++ CD16+ (P2) i CD14+CD16++ (P3) u pacjentów z HV i RZS przedstawiono na Fig. 2A. Na Fig. 2B.proporcja monocytów CD16+ CD14++u pacjentów z RZS była istotnie wyższa niż w HV (P<0,0001), podczas gdy proporcja monocytów CD14++CD16− i CD14+CD16++ u pacjentów z RZS była znacząco niższa niż w HV (P=0,0237; P=0,0044). Ponadto, jak pokazano na Fig. 2C, proporcja monocytów CD14++CD16+ w PBMCs była znacząco większa u pacjentów z RZS niż w HV (P = 0.0011), gdy monocyty CD14++CD16− i CD14+CD16++ nie różniły się między dwiema grupami.

ekspresja CD64 na podgrupach monocytów INRA i HV

aby określić profil ekspresji podgrupów ONMONOCYTÓW CD64 u pacjentów z RZS i HV, wykorzystaliśmy cytometrię przepływową do oceny ekspresji CD64 na podgrupach monocytów,w tym CD14++CD16− monocyty, CD14++cd16+ monocyty i CD14+CD16++ monocyty (Fig. 3). Dane wykazały, że chociaż częstotliwość monocytów CD14++cd16-wyrażających CD64, monocytów CD14++cd16+wyrażających cd64 i monocytów CD14+cd16++nie różniła się między tymi dwiema grupami (Fig. 3b), średnia intensywność fluorescencji(mfi) CD64 na monocytach CD14++CD16−, monocytach CD14++CD16+ i monocytach CD14+CD16++ była znacząco zmniejszona u pacjentów z RZS w porównaniu z HV (p<0,0001; Fig. 3C). Ponadto, wyniki wykazały, że częstotliwość monocytów CD14++cd16-ekspresyjnych i monocytów CD14++cd16+cd64−ekspresyjnych była znacząco podwyższona w porównaniu do monocytów cd64-ekspresyjnych CD14 + CD16++ w obu HV (p<0,0001; Fig. 3D) i Rapatientów (P<0.0001; rys. 3F).Częstość występowania cd64− expressingcd14++CD16-monocytes była znacząco zmniejszona w porównaniu do cd64-expressingCD14++CD16 + u pacjentów z RZS (P<0,0001; Fig. 3F), ale nie stwierdzono różnic w HV (P = 0,1389; Fig. 3D). Jak pokazano na Rys. 3e i G, ekspresja monocytów cd64 onCD14++CD16− i monocytów cd16+ CD14++była znacząco zmieniona w porównaniu z monocytami CD14+CD16++ u pacjentów z RZS (P<0,0001) i HV (p<0,0001). Ponadto Wein zbadał korelację między ekspresją podzbiorów ONMONOCYTÓW CD64 a proporcjami poszczególnych podzbiorów monocytów. Dane wykazały, że odsetek CD14++CD16−monocytes ujemnie skorelowany z ekspresją CD64 onCD14++CD16-monocytes (R=0,4541, P=0,0002;Fig. 3H), natomiast odsetek monocytów CD16+ CD14++dodatnio skorelowany z ekspresją CD64 na monocytach CD14++CD16 + u chorych na RZS (r=0,4352, P=0,0032; Fig. 3i). Nie stwierdzono jednak wyraźnej korelacji między ekspresją monocytów cd64 onCD14 + CD16++ a proporcjami monocytów CD14+CD16++ (R=0,1910, P=0,2140;Fig. 3J). Nie zaobserwowano wyraźnej korelacji pomiędzy ekspresją CD64 w podgrupach monocytów a dysproporcjami każdego podgrupu monocytów w HV (brak danych).

ekspresja CD64 w podgrupach monocytów korrelany z markerami zapalnymi

pacjenci z RZS często mają podwyższony poziom markerów zapalnych. W celu określenia zależności między ekspresją CD64 w podgrupach monocytów a markerami zapalnymi,markery zapalne, takie jak ESR, CRP,białe krwinki (WBC), liczba neutrofili, procent neutrofili, IgG, C3 I C4,zostały określone i przeanalizowane pod kątem ich związku z ekspresją CD64 na monocytach CD14++CD16−, monocytach CD14++CD16+ i monocytach CD14+CD16++ u pacjentów z RZS.Ekspresja CD64 na CD14++CD16−monocytach pozytywnie skorelowana z ESR i CRP u pacjentów z RZS (r=0,4853, P=0,0013, Fig. 4A; r = 0,4484, P=0,0061, rys. 4B), ekspresja CD64 na CD14++CD16+ monocytopenicznie skorelowana z ESR i CRP u pacjentów z RZS (r0,5128, P=0, 0006, Fig. 4C; r=0,4721, P = 0,0036, rys. 4D), ekspresja CD64 na monocytach CD14+CD16++ dodatnio związana z ESR (r=0,3336, P=0,0330, Fig. 4E), natomiast ekspresja monocytów CD64 onCD14 + CD16++ nie korelowała z CRP (r=0,1356, P=0,4297, Fig. 4F).Nie stwierdzono jednak oczywistej zależności między ekspresją CD64 na CD14++CD16− monocytach, CD14 + cd16++ monocytach, CD14++CD16+ monocytach i WBC, liczbą neutrofilów, odsetkiem neutrofilów, IgG, C3, C4 (brak danych).

ekspresja CD64 w podgrupach monocytów korrelaty z markerami odpowiedzi autoimmunologicznej

oznaczono i analizowano charakterystyczne dla reumatoidalnego zapalenia stawów przeciwciała, takie jak RF i ACPA,pod kątem ich korelacji z ekspresją CD64 w podgrupach monocytów. Jak pokazano na Fig. 5, ekspresja monocytów cd64 onCD14++CD16-i monocytów cd16+ CD14++była znacznie zwiększona u pacjentów z dodatnim ACPA i RF odpowiednio (P = 0,0460, Fig. 5A; P=0,0035,rys. 5B; P=0,0416, rys. 5C; P=0,0042, rys. 5D). Nie stwierdzono jednak oczywistego związku między ekspresją monocytów CD64 onCD14 + CD16++ a ACPA, RF (P = 0,6718, Fig. 5E; P=0,8128, rys. 5F).

ekspresja CD64 w podgrupach monocytów korrelaty z aktywnością chorobową RZS

powyższe dane wskazywały, że ekspresja CD64 w podgrupach monocytów była skorelowana z markerami zapalenia i odpowiedzi autoimmunologicznej. Zbadano zatem korelację między ekspresją CD64 w podgrupach monocytów a aktywnością chorobową. Dane wykazały, że zarówno ekspresja cd64 onCD14++CD16− monocyty, jak i CD14++CD16+ monocyty były dodatnio powiązane z wynikiem DAS28 (R=0,3506,P=0,0212; R=0,3208, P = 0,0360) (Fig. 6A i B), podczas gdy ekspresja CD64 na monocytach CD14+CD16++ nie korelowała z wynikiem DAS28 (r=0,2587, P=0,0938; Fig. 6C).

następnie porównaliśmy ekspresję CD64 w podgrupach monocytów między pacjentami z nowym początkiem i ponowną wizytą. Dane wykazały, że ekspresja CD64 na podgrupach monocytów może być podwyższona u pacjentów z nowo pojawiającym się RZS, ale nie osiągnięto znaczącej różnicy (p>0,0500; Fig. 6D).

związek pomiędzy ekspresją cd64 w podgrupach monocytów i stężeniem cytokin w surowicy

wśród trzech cytokin zapalnych w surowicy, poziom IL-6 i IL-8 był istotnie wyższy u pacjentów z RZS niż W HV (P=0, 0011, Fig. 7A; P=0,0387,rys. 7B), nie zaobserwowano istotnych różnic w poziomach IL-10 pomiędzy pacjentami z RZS i HV (P=0,8994; Fig. 7C). Aby określić, czy podwyższony poziom CD64 w podgrupach monocytów odgrywa rolę w wydzielaniu cytokin w surowicy (IL-6 i IL-8), pacjenci z RZS zostali podzieleni na dwie grupy zgodnie z ich poziomem CD64 (średnia ofMFI) w podgrupach monocytów: RA high(CD64 onCD14++CD16− >39,32, CD64 onCD14++CD16+ >39,32,CD64 oncd14++ CD16+>43.19, cd64 oncd14+ cd16++>25.87) i ralow(CD64 na CD14++CD16− <39.32, cd64 na CD14++ cd16+<43.19, cd64014 + cd16 ++ < 25.87). Pacjenci z RZS z wysokim poziomem CD64 na monocytach CD14++CD16+ wykazywali znamiennie wyższe poziomy IL-6 w porównaniu z pacjentami Rapatycznymi z niskim poziomem monocytów CD64 onCD14++CD16+ (P=0,0131; Fig. 7D). Nie stwierdzono istotnej różnicy w poziomach IL-6 pomiędzy pacjentami z RZS z wysokim poziomem CD64 na monocytach CD14++CD16− orCD14+CD16++ a niskim poziomem monocytów CD64on CD14++CD16-orCD14 + CD16++ (p>0,05; Fig. 7D). Nie zaobserwowano istotnej różnicy w poziomach IL-8 pomiędzy pacjentami z RZS z wysokim poziomem CD64 w każdej podgrupie monocytów a niskim poziomem CD64 w każdej podgrupie monocytów (p>0, 05; Fig.7E). Wyniki te wskazują, że podwyższony poziom monocytów CD64 onCD14++CD16+ u pacjentów z RZS związany jest ze zwiększonym wydzielaniem IL-6.

dyskusja

monocyty są heterogeniczną populacjąkomórkową złożoną z monocytów klasycznych(CD14++CD16−), monocytów pośrednich(CD14++CD16+) i monocytów nieklasycznych(CD14+CD16++). Trzy podzbiory monocytesperformują różne funkcje. Podgrupa klasyczna jest szybko przenoszona do miejsc zapalenia i wydaje się działać jako asfagocytarne komórki padaczkowe i regulatory stanu zapalnego (22,23). Monocyty pośrednie pełnią rolę prozapalną, zwiększając ilość krwi pobranej od pacjentów z ostrym stanem zapalnym (24,25). Monocyty klasycznych są często określane jako patrolujące monocyty (26). Wcześniejsze badania wykazały, że monocyty odgrywają ważną rolę w rozwoju choroby. Początek i nasilenie RZS może również wynikać z nieprawidłowego występowania podgrup monocytów.

pomimo, że u pacjentów z RAhave odnotowano wzrost liczby monocytów inCD14+ CD16+oraz spadek liczby cd16− monocytów inCD14++, wzrost liczby monocytów inCD14 + CD16++pozostawał kontrowersyjny (27,28). Zgodnie z raportem inpatricia Lacerte (28), badanie to wykazało, że krążące monocyty CD14++CD16+ i CD14+CD16++ są zwiększone, podczas gdy krążące monocyty CD14++CD16 są zmniejszone u pacjentów z RZS. Przyczyny tych wyników są prawdopodobnie spowodowane różnicami w czasie trwania choroby i leczeniu.

ocena ekspresji markerów fenotypowych CD40, CD64, CD163, CD206, HLA-DR,CD80 i CD86 pomogła scharakteryzować odpowiedź na monocyty u pacjentów z RZS. Zgodnie z wynikami innych badań (16,29) stwierdzono, że ekspresja monocytów CD64on była znacząco podwyższona u pacjentów z RZS w porównaniu do HV, brak zmian innych markerów między pacjentami z RZS i HV.Zwiększona ekspresja CD64 na monocytach u chorych z aktywnym RZS może sugerować postęp choroby (16), a także może odzwierciedlać aktywację monocytów. Chociaż odnotowano wzrost liczby CD64 w podgrupach monocytów u pacjentów z RZS (30), możliwość korelacji pomiędzy ekspresją CD64 w każdej podgrupie monocytów a aktywnością choroby u pacjentów z RZS nie została jeszcze zbadana. Nasze wyniki potwierdzają wcześniejsze obserwacje (30) i pokazują, że ekspresja CD64 onCD14++CD16− monocyty i CD14++cd16+ monocyty były znacząco poprawione w porównaniu z monocytami CD14+CD16++ INRA, a ekspresja cd64 oncd14++CD16− monocyty i CD14++CD16+ monocyty były dodatnio powiązane z wynikiem DAS28.

niewiele wiadomo na temat możliwości korelacji pomiędzy ekspresją CD64 na każdej podgrupie monocytów i proporcją każdej podgrupie monocytów u pacjentów z RZS. Okazało się, że odsetek monocytów CD14++CD16+dodatnio korelował z ekspresją monocytów CD64 onCD14++CD16+ u pacjentów z RZS, przy czym odsetek CD14++CD16− monocytesnegatywnie korelował z ekspresją cd64 onCD14++CD16− monocytes. Przyczyny tych wyników prawdopodobnie wynikają z faktu, że odsetek monocytów pośrednich dodatnio korelował z aktywnością choroby RZS, podczas gdy odsetek monocytów klasycznychnegatywnie skorelowanych (27) i nasze wyniki wykazały, że ekspresja cd64 onCD14++CD16− monocyty i CD14++CD16+ monocyty były dodatnio powiązane z wynikiem DAS28.

powszechnie wiadomo,że RZS jest chorobą autoimmunologicznąw wyniku wytwarzania autoprzeciwciał, w tym RF, ACPA, a odpowiedź autoimmunologiczna jest rodzajem przewlekłego zapalenia. W badaniu tym najpierw oznaczono markery zapalne, DAS28,charakterystyczne dla RZS przeciwciała, w tym RF i ACPA, i analizowano ich związek z ekspresją CD64 w podgrupach monocytów. Nasze wyniki wykazały, że ekspresja CD64 na monocytach CD14++CD16− i CD14++CD16+ była pozytywnie powiązana z ESR, CRP i DAS28, podczas gdy ekspresja cd64 onCD14+CD16++ nie korelowała z CRP i DAS28. Ponadto stwierdzono, że ekspresja cd64 onCD14++CD16-monocyty i CD14++cd16+ monocyty były znacznie zwiększone u pacjentów z dodatnim RF i ACPA odpowiednio, podczas gdy nie stwierdzono oczywistego związku między ekspresją cd64 na monocytach CD14++CD16 + i RF, ACPA.Może to być takie, że (1) CD14++CD16− monocyty i monocyty CD16+ CD14++wydają się działać jako regulatory stanu zapalnego, gdzie monocyty CD14+CD16++ często określane są jako monocyty aspatrollujące (22-26); (2) CD64 jest receptorem aktywującym o wysokim powinowactwie, który może wiązać IgG i CRP i stymulować procesy zapalne (16,31,32).

zgodnie z poprzednim badaniem (27), wykazaliśmy tutaj, że poziomy IL-6 i Il-8 na początku były znacząco wyższe u pacjentów z RZS niż w przypadku HV. Ponadto zaobserwowano, że pacjenci z RZS z wysokim poziomem CD64 na monocytach CD14++CD16+ wykazywali znacząco wyższe poziomy IL-6 w porównaniu z pacjentami z RZS z niskim poziomem CD64 na monocytach CD14++CD16+. Wyniki te sugerowały, że poziomy monocytów CD64 onCD14++CD16+ są rzeczywiście związane z wysokimi stężeniami cytokin prozapalnych.

jednak istnieją pewne ograniczenia w obecnym badaniu. Pierwszym z nich jest stosunkowo mała wielkość próby, zwłaszczeniesample nowo-początku RZS; dane te mogą być potwierdzone w dużych skalachtudies. Po drugie, nie wykazaliśmy, że każda podgrupa monocytów jest bezpośrednio związana z cytokinami zapalnymi w RZS invitro. Po trzecie, w tym badaniu nie przeprowadzono badań funkcji i eksperymentów dotyczących mechanizmu CD64. Mechanizmy molekularne leżące u podstaw funkcji CD64 w RZS nadal wymagają dalszych badań.

we wnioskach, wyniki przedstawione w tym badaniu wykazały, że podgrupy monocytów krwi wyizolowane od pacjentów z RA mają wysoki poziom CD64, a poziomy monocytów CD64 onCD14++CD16− i CD14++CD16+ korelują z aktywnością choroby RZS. Ponadto poziomy monocytów CD64 onCD14++CD16 + są związane z wysokim poziomem wydzielania cytokin prozapalnych.

podziękowania

autorzy chcieliby podziękować za pomoc dr Rui Wu z Wydziału Reumatologii, pierwszego Szpitala Uniwersyteckiego w Nanchang, Nanchang, Jiangxi, Chiny.

finansowanie

niniejsze badanie zostało wsparte przez NationalNatural Science Foundation Of China (grant nr 81360459), JiangxiProvincial Natural Science Foundation Of China (grant nr 20151bab215031 i 20171bab205113), Science and TechnologyProject of Health and Family Planning Commission of JiangxiProvince Of China (grant nr 20165094), projekt Naukowo-Technologiczny Departamentu Edukacji prowincji Jiangxi (grantno. GJ170008) oraz Fundacji dla wybitnych młodych naukowców z chińskiej prowincji Jiangxi (grant nr 20171bcb23087).

dostępność danych i materiałów

zbiory danych wykorzystywane i / lub analizowane podczas bieżącego badania są dostępne od odpowiedniego autora na żądanie.

wkład autorów

QL brał udział w projektowaniu opracowania, przeprowadzaniu analiz statystycznych oraz opracowywaniu manuskryptu. PCX brał udział w opracowaniu opracowania i pomógł zrewidować manuskrypt. XL wykonała analizę cytometrii przepływowej i sporządziła rękopis. ZDperformed analizy statystyczne i sporządził rękopis. Cqprzedstawił akwizycję danych markerów odpowiedzi autoimmunologicznej, przeprowadził analizy statystyczne i sporządził manuskrypt. RG przeprowadził akwizycję danych markerów stanu zapalnego, przeprowadził analizy statystyczne i sporządził manuskrypt. JQX wykonał dane o aktywności i ciężkości choroby, wykonał statystyki i sporządził manuskrypt. YG przeprowadził badania nad ekspresją cytokin i opracował skrypt. ZKH i JML opracowały opracowanie, uczestniczyły w jego projektowaniu i koordynacji oraz pomagały w opracowaniu manuskryptu. Allautorzy przeczytali i zatwierdzili ostateczny rękopis.

akceptacja Etyki i zgoda naartykuł

badanie zostało zatwierdzone przez Komisję Etyki pierwszego szpitala stowarzyszonego Uniwersytetu Nanchang (019) i zostało przeprowadzone zgodnie z deklaracją Helsińską. Przed przystąpieniem do badania wszyscy uczestnicy uzyskali pisemną zgodę.

zgoda pacjenta na publikację

Nie dotyczy.

konkurencyjne zainteresowania

autorzy oświadczają, że nie mają konkurencyjnych zainteresowań.

	Li X, Yuan FL, Lu WG, Zhao YQ, Li CW, LiJP i Xu RS: rola interleukiny-17 w leczeniu reumatoidalnego zapalenia stawów. Biochem Biophys Res Commun.397:131–135. 2010. Zobacz artykuł: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Yuan FL, Li X, Lu WG, Li CW, Xu RS andDong J: IL-33: obiecujący cel terapeutyczny dla reumatoidalnego zapalenia stawów? Ekspert Opiniuje Cele. 15:529–534. 2011. Zobacz Artykuł : Google Scholar: PubMed/NCBI
	McInnes IB i Schett G: patogeneza reumatoidalnego zapalenia stawów. N Engl J Med. 365:2205–2219. 2011.Zobacz artykuł: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Cascão R, Rosário HS, Souto-Carneiro MMand Fonseca JE: neutrofile in reumatoidal arthritis: More thansimple final effectors. Autoimmun Rev. 9:531-535. 2010. Zobacz Artykuł: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Nat Rev Immunol. 11:762–774.2011. Zobacz artykuł: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Wong KL, Yeap WH, Tai JJ, ONG SM, Dang Tmand Wong SC: trzy podgrupy ludzkich monocytów: implikacje dla zdrowia i choroby. Immunol Res.53:41-57. 2012. Zobacz Artykuł: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Ziegler-Heitbrock L: komórki krwi CD14+ CD16+: ich rola w zakażeniach i stanach zapalnych. J Leukoc Biol.81:584–592. 2007. Zobacz artykuł: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Skrzeczyńska-Moncznik J, Bzowska m, LosekeS, Grage-Griebenow E, Zembala m i Pryjma J: Peripheral bloodCD14high CD16+ monocyty są głównymi producentami IL-10. Scand JImmunol. 67:152–159. 2008. Zobacz Artykuł: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Rossol m, Kraus s, Pierer m, Baerwald Cand Wagner U: podzbiór monocytów CD14 (jasny) CD16+ jest rozszerzany w reumatoidalnym zapaleniu stawów i sprzyja ekspansji komórek Th17. Zapalenie Stawów Rheum. 64:671–677. 2012. Zobacz artykuł: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Tsukamoto M, Seta N, Yoshimoto K, SuzukiK, Yamaoka K i Takeuchi T: CD14brightCD16 + monocytes są indukowane przez interleukinę – 10 i pozytywnie korelują z aktywnością choroby w reumatoidalnym zapaleniu stawów. Zapalenie Stawów Res Ther. 19:282017.Zobacz artykuł: Google Scholar: PubMed/NCBI
	nimmerjahn F i Ravetch JV: receptory Fcy są regulatorami odpowiedzi immunologicznych. Nat Rev Immunol. 8:34–47. 2008.Zobacz artykuł: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Amigorena S I Bonnerot C: Receptory Fc sygnalizacja i handel: połączenie do przetwarzania antygenu.Immunol Rev. 172: 279-284. 1999. Zobacz artykuł: Google Scholar: PubMed / NCBI
	García-García E and Rosales C: Signaltransduction during Fc receptor-mediated fagocytosis. J LeukocBiol. 72:1092–1108. 2002.PubMed/NCBI
	Magnusson SE, Engström m, Jacob U, UlfgrenAK i Kleinau S: Wysoka ekspresja mazi stawowejfcgammariib w reumatoidalnym zapaleniu stawów. Zapalenie Stawów Res Ther. 9: R512007.Zobacz artykuł : Google Scholar : PubMed/NCBI
	van Vuuren AJ, van Roon JA, Walraven V,Stuij I, Harmsen MC, McLaughlin PM, van de Winkel JG i Thepen T:immunotoksyna ukierunkowana na cd64 hamuje zapalenie stawów w nowym modelu szczura Cd64transgenicznego. J Immunol. 176:5833–5838. 2006. Zobacz Artykuł: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Matt P, Lindqvist U i Kleinau s:podwyższona membrana i rozpuszczalny CD64: nowy marker odzwierciedlający zmienioną funkcję fcyr i chorobę we wczesnym reumatoidalnym zapaleniu stawów, które mogą być regulowane przez leczenie przeciwreumatyczne. PLoS 1.10: e01374742015. Zobacz artykuł: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Laurent L, Clavel C, Lemaire O, AnquetilF, Cornillet M, Zabraniecki L, Nogueira L, Fournié B, Serre G andSebbag M: Profil receptora FCY monocytów i makrofagów odreumatoidalnego zapalenia stawów pacjentów i ich odpowiedź na immunokompleksy utworzone z autoprzeciwciał do cytrulinowanych białek. AnnRheum Dis. 70:1052–1059. 2011. Zobacz artykuł: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Hepburn AL, Mason JC and Davies KA:Expression of FCY and complement receptors on peripheral bloodmonocytes in toczeń rumieniowaty układowy and reumatoidalne zapalenie stawów.Reumatologia (Oxford). 43:547–554. 2004. Zobacz Artykuł: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Arnett FC, Edworthy SM, Bloch DA, McShaneDJ, Fries JF, Cooper NS, Healey LA, Kaplan SR, Liang MH, Luthra HS,et al: the american rheumatism assocaition 1987 revised criteriafor the classification of reumatoidal arthritis. Zapalenie Stawów Rheum.31:315–324. 1988. Zobacz artykuł: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Wang J, Shan Y, Jiang Z, Feng J, Li C, MaL i Jiang y: Wysokie częstotliwości aktywowanych limfocytów B i limfocytów tfollicular helper są skorelowane z aktywnością chorobową u pacjentów z nowo powstającym reumatoidalnym zapaleniem stawów. Clin Exp Immunol.174:212–220. 2013.PubMed/NCBI
	Prevoo ML, van ’ t Hof MA, Kuper HH, vanLeeuwen MA, van de Putte LB i van Riel PL: zmodyfikowane wyniki chorobowe, które obejmują liczbę dwudziestu ośmiu stawów. Rozwój i Walidacja w prospektywnym badaniu wzdłużnym pacjentów z zapaleniem stawów reumatoidalnym. Zapalenie Stawów Rheum. 38:44–48. 1995. Zobacz Artykuł : Google Scholar : PubMed/NCBI
	CircCardiovasc Genet. 5:7–9. 2012. Zobacz artykuł: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Mobley JL, Leininger m, Madore S, BaginskiTJ i Renkiewicz R: genetyczne dowody funkcjonalnej monocytochotomii. Zapalenie. 30:189–197. 2007. Zobacz Artykuł: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Auffray C, Sieweke MH i Geissmann F:monocyty krwi: rozwój, heterogeniczność i związek z komórkami DNA. Annu Rev Immunol. 27:669–692. 2009. Zobacz artykuł : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Belge KU, Dayyani F, Horelt a, Siedlar m,Frankenberger m, Frankenberger B, Espevik T i Ziegler-HeitbrockL: proinflammatory CD14 + CD16 + DR++ monocyty są główne źródło TNF. J Immunol. 168:3536–3542. 2002. Zobacz artykuł : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Cros J, Cagnard N, Woollard K, Patey N,Zhang Sy, Senechal B, Puel a, Biswas SK, Moshous D, Picard C, etal: ludzkie kwasy nukleinowe cd14dim i wirusy przez receptory Tlr7 i TLR8. Immunitet. 33:375–386. 2010.Zobacz artykuł: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Tsukamoto M, Seta N, Yoshimoto K, SuzukiK, Yamaoka K i Takeuchi T: CD14brightCD16 + monocytes są indukowane przez interleukinę – 10 i pozytywnie korelują z aktywnością choroby w reumatoidalnym zapaleniu stawów. Zapalenie Stawów Res Ther. 19:282017.Zobacz artykuł : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Lacerte P, Brunet a, Egarnes B, Duchêne B,Brown JP i Gosselin J: nadekspresja podgrup TLR2 i TLR9 namonocytach aktywnych pacjentów z reumatoidalnym zapaleniem stawów agoniści. ArthritisRes Ther. 18:102016. Zobacz Artykuł: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Wijngaarden s, van Roon JA, Bijlsma JW,van de Winkel JG i Lafeber FP: poziom ekspresji receptora Fcgamma u pacjentów z reumatoidalnym zapaleniem stawów z wysokim wskaźnikiem sedymentacji erytrocytów, którzy nie stosują anty-leki reumatyczne. Reumatologia (Oxford). 42:681–688. 2003. Zobacz artykuł: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Rossol M, Kraus S, Pierer m, Baerwald Cand Wagner U: Podgrupa monocytów CD14brightCD16 ulega ekspresji wreumatoidalnym zapaleniu stawów i sprzyja ekspansji komórki th17. Zapalenie Stawów Rheum. 64:671–677. 2012. Zobacz artykuł: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Bruhns P, Iannascoli B, England P,Mancardi DA, Fernandez N, Jorieux s i Daëron m: specyficzność iaffinity ludzkich receptorów Fcgamma i ich polimorficznych wariantów dla podklasy IgG. Krew. 113:3716–3725. 2009. Zobacz Artykuł: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Lu J, Marjon KD, Marnell LL, Wang R, MoldC, Du Clos TW i Sun P: rozpoznawanie i aktywacja funkcjonalna ludzkiego receptora IgA (FcaRI) przez białko C-reaktywne. Proc NatlAcad sci USA. 108:4974–4979. 2011. Zobacz artykuł: Google Scholar : PubMed/NCBI