introductie

reumatoïde artritis (RA) is een chronische ontstekingsziekte die pijn en disfunctie veroorzaakt en leidt tot het afbreken van gewrichten. Activering en rekrutering van immuuncellen, vooral lymfocyten en monocyten in de gewrichten, zijn majorcharacters van RA (1,2). De mechanismen die ten grondslag liggen aan RA zijn complex, met inbegrip van genetische en omgevingsfactoren, evenals denormaliteiten van zowel de aangeboren immuniteit als de adaptieve immuniteit(3). Hoewel de etiopathologie VANRA niet volledig wordt begrepen, is het bekend dat monocyten/macrofagen,neutrofielen, T-cellen en B-cellen betrokken zijn bij de mechanismendie het begin van RA (4) aandrijven.Deze cellen spelen een belangrijke rol in de vooruitgang van RA door de productie van pro-inflammatoire cytokines, die tot de ontwikkeling van een ontstekingsmilieu en immune celwerving in de verbindingen leiden.

bij mensen zijn monocyten een heterogene celpopulatie die bestaat uit drie verschillende subgroepen gebaseerd op hunrexpressie van CD14 en CD16 (5). De CD14++ CD16 – klassieke deelverzameling is de meestvoorkomende van alle circulerende monocyten. De tweede monocyte-subset drukt niveaus uit van zowel CD14 als CD16 (CD14++CD16+). Het wordt bedoeld als intermediaire monocyten. De derde deelverzameling omvat niet-klassieke monocyten die lage niveaus van CD14 en hoge niveaus van CD16 (CD14+CD16++) uitdrukken. De CD14++ CD16− monocyte is de belangrijkste subset, terwijl de CD14++ CD16+en CD14+ CD16++ subsets voorkomen in lagere nummers dan CD14++ CD16-monocyte (6). De twee CD14++ subsets worden dan ook erkend om zich uit te breiden in verschillende ontstekingsziekten en worden voorgesteld om een belangrijke rol te spelen in ziekteprocessen (7,8). Recente rapporten hebben aangetoond dat het aandeel monocyte subgroepen bij RA-patiënten groter was (9,10).

CD64 (FcgRI), een Fc-receptor voor IgG, wordt constitutief uitgedrukt op macrofagen en monocyten. CD64 is de receptor met hoge affiniteit voor monomerische IgG of Ig in immuuncomplexen die immunologische en ontstekingsreacties op immune competente cellen kan initiëren, waaronder monocyten en gewrichtsgestationeerde macrofagen (11-13). Bewijzen uit zowel menselijke studies als dierlijke modellen hebben aangetoond dat CD64 een belangrijke rol spelen in de pathogenese van de mens (14,15). Eerdere monocyte Cd64-Expressiestudies bij RA hebben echter tegenstrijdige bevindingen gerapporteerd, die verhoogde, verlaagde of vergelijkbare expressies lieten zien in vergelijking met gezondheidsvrijwilligers (HV) (16-18). De rol van CD64 op monocyten in de pathogenese van RA moet nog worden opgehelderd. En, of CD64 de functie van monocyte subsets in RA kan regelen blijft te worden verklaard.

in dit onderzoek hebben we de expressie van cd64 op monocyte subgroepen gedetecteerd bij patiënten met RA en HV. De correlatie tussen de expressie van CD64 op monocyte subsets en de activiteit van RA werd ook onderzocht. Bovendien werd de cytokinessecretie van CD64+ monocyte subgroepen bij patiënten met RA gemeten.

patiënten en methoden

patiënten

in totaal 46 patiënten die voldeden aan de revisedAmerican College of Rheumatology criteria voor RA (19) werden gerekruteerd uit het Eerstgeaffilieerde Ziekenhuis van Nanchang University. Onder hen waren er 5 patiënten die pas begonnen waren met RA (<6 maanden ziekteduur) (20). Alle patiënten kregen een behandeling met ziekte-modificerende anti-reumatische middelen (DMARD ‘ s) toegediend, waaronder behandeling met glucocorticoïden en immunosuppressoren. De ziekteactiviteit van Ra werd berekend aan de hand van de ziekteactiviteitsscore 28 (DAS28)(21). De patiëntkenmerken van deze groep worden weergegeven in Tabel I.In daarnaast omvatte deze studie 22 HV (Vrouwelijk 81,8%, gemiddeld 51,2±11,6 jaar) die geen verband hielden met de patiënten en geen inflammatoire of auto-immuunziekten hadden. De studie werd goedgekeurd door de Ethische Commissie van het eerste aangesloten Ziekenhuis van NanchangUniversity (019) en werd uitgevoerd in overeenstemming met de verklaring van Helsinki. Van alle deelnemers werd schriftelijke geïnformeerde toestemming verkregen voordat zij aan deze studie deelnamen.

Flow-cytometrieanalyse

perifeer bloed mononucleaire cellen (PBMC ‘ s) werden geïsoleerd uit het verse perifere bloed van RA-patiënten en HV onFicoll-Paque-gradiënt (Sigma-Aldrich; Merck KGaA, Darmstadt,Duitsland). De membraanmolecules van monocytes werden geanalyseerd onmiddellijk gebruikend cytometry stroom. De volgende antilichamen werden gebruikt: ECD-geconjugeerd anti-CD14, PC5-geconjugeerd anti-CD16 (BDBiosciences, San Diego CA, USA), PE-geconjugeerd anti-CD163, anti-CD206, en anti-CD86, FITC-geconjugeerd anti-CD80,anti-CD40, anti-CD64, anti-HLA-DR (MIH klonen; eBioscience; Thermo FisherScientific, Inc., Waltham, MA, USA). Monocyte subsets geïdentificeerd zoals hierboven beschreven op basis van hun expressie van CD14 en CD16 (5). In het kort werd 5×105 PBMC ‘ s gelijktijdig toegediend met 10 µl ECD-geconjugeerde anti-CD14, 10µl PC5-geconjugeerde anti-CD16 en PE-geconjugeerde anti-CD64 op ijs in het donker gedurende 30 minuten. Cellen geïncubeerd met PE-geconjugeerde mouseIgG werden gebruikt als isotype controles. De uitdrukking van CD64 was analyzedon elke monocyte subset gebruikend een cytomics FC 500 stroomcytometer (Beckman Coulter, Inc., Brea, CA, USA) en gegevens geanalyseerd met deassociated softwareprogramma ‘ s (CXP).

Serum CRP, IgG, C3 en C4meting

de concentraties van serum C-reactief eiwit(CRP), immunoglobuline G (IgG), Complement 3 (C3) en Complement 4(C4) werden bepaald met nefelometriemethoden volgens de instructies van de fabrikant (IMMUNE800; BeckmanCoulter, Inc.).

bezinkingssnelheid erytrocyten (ESR) bloedroutinemeting

ESR en bloedroutine werden bepaald volgens de instructies van de fabrikant.

Autoantibody measurement

niveau van reumatoïde factor (RF) werd bepaald met nefelometriemethoden volgens de instructies van de fabrikant (IMMUNE800; Beckman Coulter, Inc.). Anti-citrullinatedproteïne antilichamen (ACPA) van serum IgG werden gemeten gebruikend commerciële ELISA kits (Kexin, Shanghai, China).

Cytokinemeting

humaan IL-10, IL-6 en IL-8 (Signalway antilichaam LLC,College Park, MD, USA) werden gemeten met commercieel verkrijgbare enzyme-linked immunosorbent assays volgens de aanwijzingen van de fabrikant.

statistische analyse

statistische analyse en grafische presentatie werden uitgevoerd met GraphPad Prism v. 5. 0 (GraphPad Software, Inc., LaJolla, CA, USA). Bovendien werd de T-test van de Student gebruikt waar de normaliteitstest voorbijging; anders werd de niet-parametrische Mann-Whitneytest gebruikt om de gegevens te analyseren. Evenzo werd de Pearson-methode of de niet-parametrische Spearman-methode gebruikt voor correlatieanalyse. P<0,05 werd geacht een statistisch significant verschil aan te geven.

resultaat

verhoogde expressie van CD64 in de monocyten van RA-patiënten

de monocyten in PBMC ‘ s werden geanalyseerd op deexpressie van membraanmoleculen waaronder CD40, CD64, CD163,CD206, HLA-DR, CD80 en CD86 door middel van flowcytometrie. Representatieve dotplots van populatie gating en CD64 expressie cellen van Rapatiënten en HV werden getoond in Fig.1 bis. De resultaten toonden aan dat de expressie van CD64 op monocyten significant verhoogd was bij RA-patiënten in vergelijking met HV (P=0,0103;Fig. 1 ter). Er werd geen significant verschil waargenomen in de expressie van CD40, CD163, CD206, HLA-DR, CD80,CD86 op monocyten tussen RA-patiënten en HV (Fig. 1).

verhoudingen van elke monocytesubset

representatieve dotdiagrammen van elke monocytsubset uit flowcytometrieanalyse van CD14++CD16−(P1), CD14++ CD16+ (P2) en CD14+CD16++ (P3) bloedmonocyten van HV-en RA-patiënten worden in Fig. 2 bis. De drie monocytesubsets in totale monocyten van perifere bloedcellen van patiënten met RA en gezonde vrijwilligers worden getoond in Fig. 2B.het aandeel CD14++CD16+ monocyten bij patiënten met RA was significant hoger dan dat in HV (P<0,0001), terwijl het aandeel CD14++CD16− en CD14+CD16++ monocyten bij patiënten met RA aanzienlijk lager was dan dat in HV (P=0,0237; P=0,0044). Bovendien, zoals blijkt uit Fig. 2C was de proportie CD14++CD16+ monocyten in PBMC ‘ s aanzienlijk verhoogd bij patiënten met RA dan bij HV(P=0.0011), wanneer die van CD14++CD16-en CD14 + CD16++ monocyten niet verschilden tussen de twee groepen.

CD64-expressie op monocyte-subsets inRA-patiënten en HV

om het expressieprofiel van CD64− onmonocyte-subsets bij RA-patiënten en HV te bepalen, hebben we stroomcytometrie gebruikt om de expressie van CD64 op monocyte-subsets te beoordelen,waaronder CD14++CD16-monocyten, CD14++CD16+ monocyten en CD14+CD16++ monocyten (Fig. 3). Gegevens toonden aan dat, hoewel de frequentie van CD64-uitdrukkende CD14++CD16-monocyten, CD64-uitdrukkende CD14++CD16+monocyten, en CD64-uitdrukkende CD14 + CD16++monocyten niet verschilde tussen de twee groepen (Fig. 3B) waren de gemiddelde fluorescentieintensiteit(MFI) van CD64 op CD14++CD16− monocyten,CD14++CD16+ monocyten en CD14+CD16++ monocyten significant geëvacueerd bij patiënten met RA vergeleken met HV (P<0,0001; Fig. 3C). Verder toonden de resultaten aan dat de frequentie van CD64-expresserende CD14++CD16-monocyten en CD64-expresserende CD14++CD16+monocyten significant verhoogd was in vergelijking met CD64-expresserende CD14+CD16++ monocyten in beide HV(P<0,0001; Fig. 3D) en Rapatiënten (P<0,0001; Fig. 3F).En, de frequentie van CD64-expressingCD14++CD16− monocyten was significant veranderd in vergelijking met CD64-expressingCD14++CD16 + monocyten bij RA-patiënten (P<0,0001; Fig. 3F) , maar er werden geen verschillen gevonden in HV (P = 0.1389; Fig. 3D). Zoals in Fig. 3E en G waren de expressie van CD64 onCD14++CD16-monocyten en CD14++CD16 + monocyten significant geëvacueerd in vergelijking met CD14+CD16++ monocyten bij zowel RA-patiënten (P<0,0001) en HV (P<0,0001). Bovendien onderzocht weinde correlatie tussen de expressie van CD64 onmonocyte subsets en de verhoudingen van elke monocyte subset. Datashowed that the proportion of CD14++CD16-monocytes negative correlated with the expression of CD64 onCD14++CD16− monocytes (r = 0,4541, P=0,0002; Fig. 3H), terwijl het aandeel CD14++CD16 + monocyten positief correleerde met de expressie van CD64 op CD14++CD16 + monocyten bij RA-patiënten (r = 0,4352, P=0,0032; Fig. 3I). Maar er werd geen duidelijke correlatie waargenomen tussen de expressie van CD64 onCD14 + CD16++ monocyten en de verhoudingen van CD14 + CD16++ monocyten (r = 0,1910, P=0,2140; Fig. 3J). Er werd geen duidelijke correlatie waargenomen tussen de expressie van CD64 op monocyte-deelverzamelingen en de proporties van elke monocyte-deelverzameling in HV (data no show).

expressie van CD64 op monocytensubgroepen met ontstekingsmarkers

patiënten met RA hebben vaak verhoogde spiegels van ontstekingsmarkers. Om de relatie tussen de expressie van CD64 op monocyte subsets en inflammatoire markers te bepalen,werden inflammatoire markers, zoals ESR, CRP, witte bloedcellen (WBC),neutrofielentelling, het percentage neutrofielen, IgG, C3 en C4, bepaald en geanalyseerd voor hun relatie met de expressievan CD64 op CD14++CD16− monocyten,CD14++CD16+ monocyten en CD14+CD16++ monocyten bij patiënten met RA.De expressie van CD64 op CD14++CD16-monocyten correleerde positief met ESR en CRP bij RA-patiënten (r = 0,4853, P=0,0013, Fig. 4A; r = 0,4484, P=0,0061, Fig. 4B), de expressie van CD64 op CD14++CD16+ monocytepositief gecorreleerd met ESR en CRP bij RA patiënten (r0.5128, P=0,0006, Fig. 4C; r = 0,4721, P=0,0036, Fig. 4D), de expressievan CD64 op CD14 + CD16++ monocyten positief gecorreleerd met ESR (r = 0,3336, P=0,0330, Fig. 4E), terwijl de uitdrukking van CD64 onCD14 + CD16++ monocyten niet correleerde metcrp (r = 0,1356, P=0,4297, Fig. 4F).Er werd echter geen duidelijk verband gevonden tussen de expressievan CD64 op CD14++CD16− monocyten,CD14+CD16++ monocyten,CD14++CD16+ monocyten en WBC, neutrophilcount, het percentage neutrophil, IgG, C3, C4 (data no show).

expressie van CD64 op monocytensubgroepen correleert met markers van auto-immuunrespons

de kenmerkende antilichamen van RA, zoals RF en ACPA,werden bepaald en geanalyseerd op hun correlatie met de expressie van CD64 op monocytensubgroepen. Zoals in Fig. 5, werden de expressie van CD64 onCD14++CD16-monocyten en CD14++CD16+ monocyten significant verhoogd bij patiënten met respectievelijk positieve ACPA en RF (P = 0,0460, Fig. 5A; P = 0,0035, Fig. 5B; P = 0,0416, Fig. 5C; P = 0,0042, Fig. 5D). Er werd echter geen duidelijk verband gevonden tussen de expressie van CD64 onCD14 + CD16++ monocyten en ACPA, RF (P = 0.6718,Fig. 5E; P = 0,8128, Fig. 5F).

expressie van CD64 op monocytensubgroepen correleert met ziekteactiviteit van RA

bovengenoemde gegevens gaven aan dat de expressie van cd64 op monocytensubgroepen gecorreleerd was met markers van ontsteking en auto-immuunrespons. Zo werd de correlatie tussen de expressie van CD64 op monocyte subsets en ziekteactiviteit onderzocht. Gegevens toonden aan dat zowel de expressie van CD64 onCD14++CD16-monocyten als CD14++CD16 + monocyten positief correleerde met DAS28 score (r = 0,3506, P=0,0212; r = 0,3208, P = 0,0360) (Fig. 6A en B), terwijl de expressie van CD64 op CD14+CD16++ monocytes niet correleerde met DAS28 score (r=0,2587, P=0,0938; Fig. 6C).

vervolgens vergeleken we de cd64 expressie onmonocyte subgroepen tussen patiënten met new-onset en re-visitingRA. Gegevens toonden aan dat de expressie van CD64 op monocyten-subgroepen verhoogd is bij patiënten met pas begonnen RA, maar een significant verschil werd niet bereikt (P>0,0500; Fig. 6D).

associatie tussen de expressie van cd64 op monocyte subgroepen en serumcytokineconcentratie

bij de drie serum ontstekingscytokines waren de spiegels van IL-6 en IL-8 significant hoger bij patiënten met RA dan bij HV (P=0,0011, Fig. 7A; P = 0,0387,Fig. 7B) werd geen significant verschil waargenomen in de niveaus van IL-10 tussen patiënten met RA en HV(P=0,8994; Fig. 7C). Om determinewhether verhoogde niveaus van CD64 op monocyten subsets spelen een rol in de uitscheiding van serum cytokinen (IL-6 en IL-8), RA-patiënten weredivided in twee groepen, volgens hun CD64 niveaus (gemiddelde ofMFI) op monocyten subsets: RA hoog(CD64 onCD14++CD16− >39.32, CD64 onCD14++CD16+ >43.19, CD64 onCD14+CD16++ >25.87) en RAlow(CD64 op CD14++CD16− <39.32,CD64 op CD14++CD16+ <43.19, CD64 onCD14+CD16++ <25.87). RA-patiënten met hoge CD64-gehalten op CD14++CD16+ – monocyten vertoonden significant hogere IL-6-gehalten in vergelijking met Rappatiënten met lage cd64-gehalten op CD14++CD16+ – monocyten (P=0,0131; Fig. 7D). Er werd geen significant verschil waargenomen in de IL-6-spiegels tussen RA-patiënten met hoge CD64-spiegels op CD14++CD16-orCD14 + CD16++ monocyten en lage CD64on CD14++CD16-orCD14+CD16++ monocyten (P>0,05; Fig. 7D). En er werd geen significant verschil waargenomen in de IL-8-spiegels tussen RA-patiënten met hoge CD64-spiegels in elke monocyte-subset en lage CD64-spiegels in elke monocyte-subset (P>0,05; Fig.7E). Deze resultaten wijzen erop dat verhoogde concentraties CD64 onCD14++CD16+ monocyten bij RA-patiënten worden geassocieerd met verhoogde secretie van IL-6.

discussie

monocyten zijn een heterogene celpopulatie bestaande uit klassieke monocyten(CD14++CD16−), intermediaire monocyten(CD14++CD16+) en niet-klassieke monocyten(CD14+CD16++). De drie subsets van monocytesperformeren verschillende functies. De klassieke deelverzameling wordt snelaan de plaatsen van ontsteking gerekruteerd en schijnt asphagocytic aaseters cellen en regelaars van ontsteking te handelen (22,23). De intermediaatmonocyten spelen een pro-inflammatoire rol en worden verhoogd in het bloed van patiënten met acute ontsteking (24,25). Thenonclassical monocytes worden vaak bedoeld als patrollingmonocytes (26). Eerder onderzoek heeft gemeld dat monocyten een belangrijke rol spelen in de progressie vanra. Het begin en de ernst van RA zou ook te wijten kunnen zijn aan de seizoensgebondenheid van monocytensubverzamelingen was afwijkend.

hoewel een toename van inCD14++CD16 + monocyten en een afname van inCD14++CD16− monocyten bij patiënten met RAhave werd gemeld, bleef de toename van inCD14+CD16++ monocyten controversieel(27,28). In overeenstemming met het rapport vanpatricia Lacerte (28) toont deze studie aan dat circulerende CD14++CD16+ en CD14+CD16++ monocyten verhoogd zijn, terwijl circulerende CD14++CD16− monocyten verminderd zijn bij patiënten met RA. De redenen voor deze uitkomsten zijnwaarschijnlijk te wijten aan verschillen in de duur van de ziekte en de aanhoudende behandelingen.

een beoordeling van de expressie van de kenmerkende fenotypische markers CD40, CD64, CD163, CD206, HLA-DR,CD80 en CD86 hielp bij het verder karakteriseren van de monocytenresponseïnepatiënten met RA. In overeenstemming met de resultaten van andere onderzoeken (16,29), vonden we dat de expressie van CD64on-monocyten significant verhoogd was bij RA-patiënten in vergelijking met hv, geen veranderingen van andere markers tussen patiënten met RA en HV.De verhoogde expressie van CD64 op monocyten bij patiënten met actieve RA kan wijzen op de progressie van de ziekte (16), en kan ook de activering van de monocyten weerspiegelen. Hoewel een toename in CD64 op monocyten subgroepen bij patiënten met RA is gemeld (30), is de mogelijkheid van correlatie tussen de expressie van CD64 op elke monocyten subgroep en ziekteactiviteit bij patiënten met RA nog niet onderzocht. Onze resultaten ondersteunen eerdere waarnemingen (30) en tonen aan dat de expressie van CD64 onCD14++CD16− monocyten en CD14++CD16+ monocyten significant was geëvolueerd in vergelijking met CD14+CD16++ monocyten INRA− patiënten, en de expressie van CD64 onCD14++CD16-monocyten en CD14++CD16+ monocyten positief correleerde met DAS28-score.

Er is weinig bekend over de mogelijkheid van een correlatie tussen de expressie van CD64 op elke monocyte-subset en het aandeel van elke monocyte-subset bij patiënten met RA. We constateerden dat het aandeel CD14++CD16+− monocyten positief correleerde met de expressie van CD64 onCD14++CD16+− monocyten bij RA-patiënten, terwijl het aandeel CD14++CD16-monocyten aanvankelijk correleerde met de expressie van CD64 onCD14++CD16-monocyten. De redenen voor de resultaten zijn waarschijnlijk te wijten aan de feiten dat het aandeel van intermediaire monocyten positief correleerde met de ziektecactiviteitvan RA, terwijl het aandeel van klassieke monocyten aanvankelijk correleerde (27) en onze resultaten aantoonden dat de expressie van CD64 op CD14++CD16− monocyten en CD14++CD16+ monocyten positief correleerde met de DAS28-score.

Het is algemeen bekend dat RA een auto-immuunziekte is die wordt gekenmerkt door de productie van auto-antilichamen,waaronder RF, ACPA en auto-immuunrespons is een soort chronische ontstekingtegen zelfantigenen. In deze studie werden de inflammatoire markers, DAS28,de hallmark antilichamen van RA inclusief RF en ACPA eerst bepaald en geanalyseerd voor hun relatie met de expressie van CD64 op monocyte subsets. Onze resultaten toonden aan dat de expressie van CD64 op CD14++CD16− en CD14++CD16+ monocyten positief gerelateerd was aan ESR, CRP en DAS28, terwijl de expressie van CD64 op CD14+CD16++ monocyten niet correleerde met CRP en DAS28. Bovendien vonden we de expressie van CD64 op CD14++CD16− monocyten en CD14++CD16+ monocyten significant verhoogd bij patiënten met respectievelijk positieve RF en ACPA,terwijl er geen duidelijke relatie werd gevonden tussen de expressie van cd64 op CD14++CD16+ monocyten en RF, ACPA.Dit kan zijn dat (1) CD14++CD16− monocyten en CD14++CD16+ monocyten lijkt op te treden alsregulatoren van ontsteking, waarbij scd14+CD16++ monocyten vaak worden verwezen naar aspatrolling monocyten (22-26); (2) CD64 is een activerende receptor met hoge affiniteit die IgG encrp kan binden en ontstekingsprocessen kan stimuleren (16,31,32).

in overeenstemming met eerdere studie (27) toonden we hier aan dat de spiegels van IL-6 andIL-8 bij aanvang significant hoger waren bij patiënten met RA dan bij HV. Daarnaast merkten we op dat RA-patiënten met een hoog CD64-gehalte op CD14++CD16+ – monocyten aanzienlijk hogere IL-6-gehalten vertoonden in vergelijking met RA-patiënten met een laag CD64-gehalte op CD14++CD16+ – monocyten. Deze resultaten wijzen erop dat de CD64-concentraties op CD14++CD16+ – monocyten inderdaad verband houden met de hoge concentraties pro-inflammatoire cytokines.

Er zijn echter enkele beperkingen in de huidige studie. In de eerste plaats is de relatief kleine steekproefomvang, met name de steekproef van nieuwe RA; deze gegevens kunnen in grootschalige studies worden bevestigd. Ten tweede hebben we niet aangetoond dat elke monocytensubgroep direct geassocieerd is met ontstekingscytokines in RA invitro. Ten derde zijn er in deze studie geen functiestudie en experimenten gedaan over het mechanisme van CD64. De moleculaire mechanismen die aan CD64-functies in RA ten grondslag liggen, vereisen nog nader onderzoek.

In conclusies tonen de resultaten in deze studie aan dat monocyte− subgroepen in het bloed geïsoleerd van patiënten metra hoge CD64-concentraties hebben en dat de CD64-concentraties onCD14++CD16-en CD14++CD16+ – monocyten correleren met de ziekteactiviteit van RA. Bovendien zijn de niveaus van CD64 onCD14++CD16+ monocyten gekoppeld aan het hogesecretieniveau van pro-inflammatoire cytokines.

Dankbetuigingen

De auteurs willen graag de hulp van Dr Rui Wu van de afdeling Reumatologie, het eerste aangesloten Ziekenhuis van Nanchang University, Nanchang, Jiangxi, China, erkennen.deze studie werd ondersteund door de NationalNatural Science Foundation of China (subsidie nr. 81360459), JiangxiProvincial Natural Science Foundation of China (subsidie nr. 20151BAB215031 en 20171BAB205113), het Science and TechnologyProject of Health and Family Planning Commission of JiangxiProvince of China (subsidie nr. 20165094), het Science and TechnologyPlan Project van het Ministerie van Onderwijs van Jiangxi provincie (grantno. GJ170008) en de Foundation for Distinguished Young Scientists of the Jiangxi Province Of China (grant no. 20171BCB23087).

beschikbaarheid van gegevens en materialen

De tijdens de huidige studie gebruikte en/of geanalyseerde datasets zijn op een redelijk verzoek verkrijgbaar bij de corresponderende auteur.

bijdragen van auteurs

QL nam deel aan het ontwerp van het onderzoek, voerde statistische analyses uit en stelde het manuscript op. PCX nam deel aan het ontwerp van de studie en hielp het manuscript te herzien. XLperformed stroom cytometry analyse en opgesteld het manuscript. Zd voerde statistische analyses uit en stelde het manuscript op. Cq voerde data-acquisitie van markers van auto-immuunrespons uit, voerde statistische analyses uit en stelde het manuscript op. RGS voerde data-acquisitie van markers van ontsteking uit, voerde statistische analyses uit en stelde het manuscript op. JQX voerde dataverwerving van ziekteactiviteit en ernst uit, voerde statistische analyses uit en stelde het manuscript op. YG voerde deexperimenten uit over de expressie van cytokines en stelde hetmanuscript op. ZKH en JML ontwierpen het onderzoek, namen deel aan het ontwerp en de coördinatie ervan en hielpen bij het opstellen van het manuscript. Allauthors las en keurde het laatste manuscript goed.

ethische goedkeuring en toestemming om deel te nemen

De studie werd goedgekeurd door de Ethische Commissie van het eerste aangesloten Ziekenhuis van de Universiteit van Nanchang (019) en werd uitgevoerd in overeenstemming met de Verklaring van Helsinki. Schriftelijk geà nformeerde toestemming werd verkregen van alle deelnemers voordat zij de studie entreegden.

toestemming van de patiënt voor publicatie

niet van toepassing.

concurrerende belangen

De auteurs verklaren geen concurrerende belangen te hebben.

	Li X, Yuan FL, Lu WG, Zhao YQ, Li CW, LiJP en Xu RS: The role of interleukine-17 in mediating jointdestruction in reumatoïde artritis. Biochem Biophys Res Commun.397:131–135. 2010. Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
Yuan FL, Li X, Lu WG, Li CW, Xu RS andDong J: IL-33: A promising therapeutic target for rheumatoidarthritis? Expert Op De Doelen. 15:529–534. 2011. Bekijk Het Artikel : Google Scholar: PubMed/NCBI
	McInnes IB and Schett G: The pathogenesisof reumatoïde artritis. N Engl J Med. 365:2205–2219. 2011.Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Cascão R, Rosário HS, Souto-Carneiro MMand Fonseca JE: Neutrophils in reumatoïde artritis: More thansimple final effectors. Auto-Immune Openb. 9: 531-535. 2010. Bekijk Artikel: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Shi C en Pamer BV: monocytenwerving tijdens infectie en ontsteking. Nat Rev Immunol. 11:762–774.2011. Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Wong KL, Yeap WH, Tai JJ, Ong SM, Dang TMand Wong SC: The three human monocyte subsets: Implications forhealth and disease. Immunol Res. 53: 41-57. 2012. Bekijk Artikel: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Ziegler-Heitbrock L: de CD14+ CD16+ bloedmonocyten: hun rol bij infectie en ontsteking. J Leukoc Biol.81:584–592. 2007. Bekijk artikel : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Skrzeczyńska-Moncznik J, Bzowska M, LosekeS, Grage-Griebenow E, Zembala M en Pryjma J: Peripheral bloodCD14high CD16+ monocytes are main producers of IL-10. Scand JImmunol. 67:152–159. 2008. Bekijk Artikel: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Rossol M, Kraus S, Pierer M, Baerwald C en Wagner U: de CD14 (bright) CD16+ monocyte-subset wordt uitgebreid in reumatoïde artritis en bevordert de expansie van de Th17-celpopulatie. Artritis Rheum. 64:671–677. 2012. Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Tsukamoto M, Seta N, Yoshimoto K, SuzukiK, Yamaoka K en Takeuchi T: CD14brightCD16 + intermediaire monocytesworden geïnduceerd door interleukine-10 en correleren positief met ziekteactiviteit bij reumatoïde artritis. Artritis Res Ther. 19:282017.Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Nimmerjahn F and Ravetch JV: Fcy receptorsas regulators of immune responses. Nat Rev Immunol. 8:34–47. 2008.Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Amigorena S and Bonnerot C: Fc receptorsignaling and trafficking: een verbinding voor antigeen verwerking.Immunol Rev. 172: 279-284. 1999. Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
	García-García E and Rosales C: Signaltransduction during Fc receptor-mediated fagocytose. J LeukocBiol. 72:1092–1108. 2002.PubMed/NCBI
	Magnusson SE, Engström M, Jacob U, UlfgrenAK en Kleinau S: Hoge synoviale expressie van de inhibitoryFcgammaRIIb bij reumatoïde artritis. Artritis Res Ther. 9: R512007.Bekijk artikel : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Van Vuuren AJ, van Roon JA, Walraven V,Stuij I, Harmsen MC, McLaughlin PM, van de Winkel JG and Thepen t:CD64-directed immunotoxin remt artritis in a novel cd64 transgenic Rat Model. J Immunol. 176:5833–5838. 2006. Bekijk Artikel: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Matt P, Lindqvist U en Kleinau S:verhoogd membraan en oplosbaar CD64: een nieuwe marker die de gealterde fcyrfunctie en de ziekte bij vroege reumatoïde artritis reflecteert die kan worden gereguleerd door anti-reumatische behandeling. PLoS ÉÉN.10: e01374742015. Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Laurent L, Clavel C, Lemaire O, AnquetilF, Cornillet M, Zabraniecki L, Nogueira l, Fournié B, Serre G andSebbag M: Fcy receptor profiel van monocyten en macrofagen vanrheumatoïde artritis patiënten en hun respons op immunecomplexen gevormd met auto-antilichamen aan citrullinated eiwitten. AnnRheum Dis. 70:1052–1059. 2011. Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Hepburn AL, Mason JC en Davies KA:expressie van Fcy-en complementreceptoren op perifere bloedmonocyten in systemische lupus erythematosus en reumatoïde artritis.Reumatologie (Oxford). 43:547–554. 2004. Bekijk Artikel: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Arnett FC, Edworthy SM, Bloch DA, McShaneDJ, Fries JF, Cooper NS, Healey LA, Kaplan SR, Liang MH, Luthra HS,et al: the american rheumatism Assocation 1987 revised criteriafor the classification of reumatoïde artritis. Artritis Rheum.31:315–324. 1988. Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Wang J, Shan Y, Jiang Z, Feng J, Li C, MaL en Jiang Y: Hoge frequenties van geactiveerde B-cellen en Tfollowiculaire hulpcellen zijn gecorreleerd met ziekteactiviteit bij patiënten met pas begonnen reumatoïde artritis. Clin Exp Immunol.174:212–220. 2013.PubMed/NCBI
	Prevoo ML, van ‘ t Hof MA, Kuper HH, VanLeeuwen MA, van de Putte LB en Van Riel PL: Modified diseaseactivity scores that include 28-joint counts. Ontwikkeling en validatie in een prospectieve longitudinale studie van patiënten metrheumatoïde artritis. Artritis Rheum. 38:44–48. 1995. Bekijk Het Artikel : Google Scholar: PubMed/NCBI
	Mehta NN en Reilly MP: monocyt mayhem: moduleren subtypes verschillende atherosclerose fenotypen? CircCardiovasc Genet. 5:7–9. 2012. Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Mobley JL, Leininger M, Madore s, BaginskiTJ en Renkiewicz R: Genetic evidence of a functional monocytedichotomy. Ontsteking. 30:189–197. 2007. Bekijk Artikel: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Auffray C, Sieweke MH en Geissmann F:bloedmonocyten: ontwikkeling, heterogeniteit en relatie metendritische cellen. Annu Rev Immunol. 27:669–692. 2009. Bekijk artikel : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Belge KU, Dayyani F, Horelt A, Siedlar M,Frankenberger M, Frankenberger B, Espevik T and Ziegler-HeitbrockL: The proinflammatory CD14 + cd16 + Dr++ monocytes zijn een belangrijke bron van TNF. J Immunol. 168:3536–3542. 2002. Bekijk artikel : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Cros J, Cagnard N, Woollard K, Patey n,Zhang SY, Senechal B, Puel A, Biswas SK, Moshous D, Picard C, etal: Human CD14dim monocytes patrol and sense nucleic zuren Envirussen via TLR7 en tlr8 receptoren. Immuniteit. 33:375–386. 2010.Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Tsukamoto M, Seta N, Yoshimoto K, SuzukiK, Yamaoka K en Takeuchi T: CD14brightCD16 + intermediaire monocytesworden geïnduceerd door interleukine-10 en correleren positief met ziekteactiviteit bij reumatoïde artritis. Artritis Res Ther. 19:282017.Bekijk artikel : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Lacerte P, Brunet a, Egarnes B, Duchêne B,Brown JP and Gosselin J: overexpressie van TLR2 en TLR9 onmonocyte subsets of active reumatoïde artritis patientscontributes to enhance respons op TLR-agonisten. Artritisres Ther. 18:102016. Bekijk Artikel: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Wijngaarden S, van Roon JA, Bijlsma JW,van de Winkel JG en Lafeber FP: Fcgamma receptor expressie levelson monocyten zijn verhoogd bij reumatoïde artritis patiënten withhigh bezinking die geen gebruik maken van anti-rheumaticdrugs. Reumatologie (Oxford). 42:681–688. 2003. Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Rossol M, Kraus S, Pierer M, Baerwald Cand Wagner U: De CD14brightCD16 monocyte subset wordt uitgebreid inrheumatoïde artritis en bevordert uitbreiding van de Th17 celpopulatie. Artritis Rheum. 64:671–677. 2012. Bekijk artikel : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Bruhns P, Iannascoli B, England P,Mancardi DA, Fernandez N, Jorieux S and Daëron M: Specificity andaffinity of human Fcgamma receptors and their polymorhic variants for IgG onderklasse. Bloed. 113:3716–3725. 2009. Bekijk Artikel: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Lu J, Marjon KD, Marnell LL, Wang R, MoldC, Du Clos TW en Sun P: herkenning en functionele activering van de humane Iga-receptor (FcaRI) door C-reactief eiwit. Proc NatlAcad Sci USA. 108:4974–4979. 2011. Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed / NCBI