Introducción

La artritis reumatoide (AR) es una enfermedad inflamatoria crónica que causa dolor y disfunción y conduce a la destrucción de las articulaciones. La activación y el reclutamiento de células inmunitarias,especialmente linfocitos y monocitos en las articulaciones, son los principales caracteres de la AR (1,2). Los mecanismos subyacentes a la AR son complejos, incluidos factores genéticos y ambientales, así como anormalidades tanto de la inmunidad innata como de la inmunidad adaptativa(3). Aunque la etiopatología de la ARA no se conoce por completo, se sabe que los monocitos/macrófagos,los neutrófilos, las células T y las células B están implicados en los mecanismos que impulsan la aparición de la AR (4).Estas células desempeñan un papel clave en la progresión de la AR a través de la producción de citocinas proinflamatorias, lo que conduce al desarrollo de un entorno inflamatorio y al reclutamiento de células inmunitarias en las articulaciones.

En humanos, los monocitos son una población celular heterogénea compuesta de tres subconjuntos distintos basados en suexpressión de CD14 y CD16 (5). El subconjunto CD14++ CD16− clásico es el más destacado de todos los monocitos circulantes. El segundo subconjunto de monocitos expresa los niveles de CD14 y CD16 (CD14++CD16+). Se conoce como monocitos intermedios. El tercer subconjunto comprende monocitos no clásicos que expresan niveles bajos de CD14 y niveles altos de CD16 (CD14+CD16++). El subconjunto principal es el CD14++ CD16− monocito, mientras que los subconjuntos CD14++ CD16+y CD14+ CD16++ se encuentran en números más bajos que el CD14++ CD16− monocito (6). Se reconoce que los dos subconjuntos CD14++ se expanden en varias enfermedades inflamatorias y se sugiere que desempeñan un papel significativo en los procesos de la enfermedad (7,8). Informes recientes han mostrado que la proporción de subconjuntos de monocitos era abundante en pacientes con AR (9,10).

CD64 (FcgRI), un receptor Fc para IgG, se expresa constitutivamente en macrófagos y monocitos. CD64 es el receptor de alta afinidad para IgG monomérica o Ig en complejos inmunes que puede iniciar reacciones inmunológicas e inflamatorias en células inmunes competentes, incluidos monocitos y macrófagos estacionados en articulaciones (11-13). Las evidencias de ambos estudios en seres humanos y modelos animales han demostrado que la CD64 desempeña un papel importante en la patogénesis de la RA (14,15). Sin embargo,estudios previos de expresión de CD64 de monocitos en AR han reportado hallazgos contradictorios, mostrando expresiones aumentadas, disminuidas o similares en comparación con voluntarios sanitarios (HV) (16-18). El papel de CD64 en los monocitos en la patogénesis de la AR aún no se ha aclarado. Y, si CD64 puede regular la función de los subconjuntos de monocitos en AR queda por aclararse.

En el presente estudio, detectamos la expresión de CD64 en subconjuntos de monocitos en pacientes con AR y HV. También se investigó la correlación entre la expresión de CD64 en subconjuntos de monocitos y la actividad de la AR. Además, se midió la creación de citoquinas de subconjuntos de monocitos CD64+ en pacientes con RAwas.

Pacientes y métodos

Sujetos

Un total de 46 pacientes cumplieron los criterios revisados de la American College of Rheumatology para AR (19) fueron reclutados del primer Hospital afiliado de la Universidad de Nanchang. Entre ellos, 5 pacientes presentaban AR de nueva aparición (<6 meses de duración de la enfermedad) (20). A todos los pacientes se les administraron fármacos antirreumáticos modificadores de la enfermedad (FAMES), incluyendo terapia glucocorticoide e inmunosupresora. La actividad de la enfermedad de RAWA se calculó utilizando la puntuación de actividad de la enfermedad 28 (DAS28) (21). Las características de los pacientes de este grupo se muestran en la Tabla I.In además, el presente estudio incluyó a 22 pacientes con VH (mujeres 81,8%, promedio de 51,2±11,6 años) que no tenían relación con los pacientes y no presentaban enfermedades inflamatorias o autoinmunes. El estudio fue aprobado por el Comité de Ética del Primer Hospital Afiliado de la Universidad Nanchang (019) y se llevó a cabo de conformidad con la Declaración de Helsinki. Se obtuvo el consentimiento informado por escrito de todos los participantes antes de entrar en el presente estudio.

Análisis de citometría de flujo

Las células mononucleares de sangre periférica (PBMC) se aislaron de la sangre periférica fresca de pacientes con AR y del gradiente de HV onFicoll-Paque (Sigma-Aldrich; Merck KGaA, Darmstadt,Alemania). Las moléculas de membrana de los monocitos se analizaron inmediatamente mediante citometría de flujo. Se utilizaron los siguientes anticuerpos: ANTI-CD14 conjugado con ECD, anti-CD16 conjugado con PC5 (BDBiosciences, San Diego CA, EE.UU.), anti-CD163, anti-CD206 y anti-CD86 conjugados con PE, anti-CD80 conjugado con FITC, anti-CD40,anti-CD64, anti-HLA-DR (clones de MIH; eBioscience; Thermo FisherScientific, Inc., Waltham, MA, USA). Subconjuntos de monocitos identificados como descritos anteriormente en función de su expresión de CD14 y CD16 (5). Brevemente, se incubaron 5 × 105 PBMCs simultáneamente con 10 µl de anti-CD14 conjugado con ECD, 10 µl de anti-CD16 conjugado con PC5 y anti-CD64 conjugado con PE en hielo en la oscuridad durante 30 min. Se utilizaron células incubadas con mouseIgG conjugado con PE como controles de isotipo. La expresión de CD64 se analizó en cada subconjunto de monocitos utilizando un citómetro de flujo FC 500 de CYTOMICS (Beckman Coulter, Inc., Brea, CA, EE. UU.) y los datos analizados con los programas de software asociados (CXP).

Medición de PCR, IgG, C3 y C4 séricos

Las concentraciones de Proteína C reactiva(PCR) sérica, Inmunoglobulina G (IgG), Complemento 3 (C3) y Complemento 4(C4) se determinaron mediante métodos de nefelometría de acuerdo con las instrucciones descritas por el fabricante (IMMUNE800; BeckmanCoulter, Inc.).

La velocidad de sedimentación eritrocitaria (VSG)se midió de forma rutinaria en sangre

La VSG y la rutina sanguínea se determinaron de acuerdo con las instrucciones descritas por el fabricante.

La medición de autoanticuerpos

El nivel del factor reumatoide (RF) se determinó utilizando métodos de nefelometría de acuerdo con las instrucciones descritas por el fabricante (IMMUNE800; Beckman Coulter, Inc.). Los anticuerpos anti-proteína citrulinada (ACPA) de IgG sérica se midieron utilizando kits ELISA comerciales (Kexin, Shanghai, China).

Medición de citoquinas

La IL-10, la IL-6 y la IL-8 humanas (Signalway Antibody LLC,College Park, MD, EE.UU.) se midieron utilizando ensayos inmunoabsorbentes vinculados a enzimas disponibles comercialmente de acuerdo con las instrucciones de los fabricantes.

Análisis estadístico

El análisis estadístico y la presentación gráfica se realizaron con GraphPad Prism v.5. 0 (GraphPad Software, Inc., LaJolla, CA, USA). Además, se utilizó la prueba t de Student cuando se aprobó la prueba de normalidad; de lo contrario, se utilizó la prueba no paramétrica de Mann-Whitney para analizar los datos. Asimismo, para el análisis de correlación se utilizó el método de Pearson o el método no paramétrico de Spearman. Se consideró que P<0,05 indicaba una diferencia estadísticamente significativa.

Resultado

Aumento de la expresión de CD64 en los monocitos de pacientes con AR

Los monocitos en PBMC se analizaron para la expresión de moléculas de membrana, incluidas CD40, CD64,CD163, CD206, HLA-DR, CD80 y CD86 por citometría de flujo. Las gráficas de puntos representativas de la apertura de la población y las células que expresan CD64 de pacientes rapaces y HV se mostraron en la Fig.1 BIS. Los resultados mostraron que la expresión de CD64 en monocitos fue significativamente elevada en pacientes con AR en comparación con HV (P = 0,0103;Fig. 1B). No se observaron diferencias significativas en la expresión de CD40, CD163, CD206, HLA-DR, CD80,CD86 en monocitos entre pacientes con AR y HV (Fig. 1).

Proporciones de cada subconjunto de monocytos

Gráficos de puntos representativos de cada subconjunto de monocitos del análisis de citometría de flujo de monocitos de sangre CD14++CD16−(P1), CD14++ CD16+ (P2) y CD14+CD16++ (P3) de pacientes con VH y AR se muestran en la Fig. 2 BIS. Los tres conjuntos de monocitos en monocitos totales de células sanguíneas periféricas de pacientes con AR y voluntarios sanos se muestran en la Fig. 2B. La proporción de monocitos CD14++CD16 + en pacientes con AR fue significativamente mayor que en HV (P<0,0001), mientras que la proporción de monocitos CD14++CD16 y CD14+CD16++ en pacientes con AR fue significativamente menor que en HV (P=0,0237; P=0,0044). Además, como se muestra en la Fig. 2C, la proporción de monocitos CD14++CD16+ en PBMCS fue significativamente mayor en pacientes con AR que en HV (P=0.0011), cuando el de los monocitos CD14++CD16− y CD14+CD16++ no difería entre los dos grupos.

Expresión de CD64 en subconjuntos de monocitos pacientes con ARN y HV

Para determinar el perfil de expresión de los subconjuntos de CD64 onmonocitos en pacientes con AR y HV, se utilizó citometría de flujo para evaluar la expresión de CD64 en subconjuntos de monocitos,incluidos monocitos CD14++CD16, monocitos CD14++CD16+ y monocitos CD14+CD16++ (Fig. 3). Los datos mostraron que, aunque la frecuencia de los monocitos CD14++CD16 que expresan CD64, los monocitos CD14++CD16 + que expresan CD64 y los monocitos CD14+CD16++que expresan CD64, no diferían entre los dos grupos (Fig. 3B), la intensidad media de fluorescencia(IMF) de CD64 en monocitos CD14++CD16, monocitos CD14++CD16+ y monocitos CD14+CD16++ se elevaron significativamente en pacientes con AR en comparación con HV (P<0,0001; Fig. 3C). Además, los resultados mostraron que la frecuencia de los monocitos CD14++CD16 que expresan CD64 y de los monocitos CD14++CD16+que expresan CD64 se elevó significativamente en comparación con los monocitos CD14+CD16++ que expresan CD64 en ambos casos(P<0,0001; Fig. 3D) y Rapaces (P<0,0001; Fig. 3F).Y la frecuencia de los monocitos CD16 CD14++CD64− expressingCD14 + fue significativamente aumentada en comparación con los monocitos CD16+ CD64-expressingCD14++en pacientes con AR(P<0,0001; Fig. 3F), pero no se encontraron diferencias en el VH (P=0,1389; Fig. 3D). Como se muestra en la Fig. 3E y G, la expresión de los monocitos CD64 onCD14++CD16 y CD14++CD16+ se elevó significativamente en comparación con los monocitos CD14+CD16++ en ambos pacientes con AR (P<0,0001) y HV (P<0,0001). Además, investigamos la correlación entre la expresión de subconjuntos de onmonocitos CD64 y las proporciones de cada subconjunto de monocitos. Los datos muestran que la proporción de monocitos CD14++CD16 se correlaciona negativamente con la expresión de monocitos CD64 onCD14++CD16 (r=0,4541, P=0,0002;Fig. 3H), mientras que la proporción de monocitos CD14++CD16+ se correlacionó positivamente con la expresión de CD64 en monocitos CD14++CD16+en pacientes con AR (r=0,4352, P=0,0032; Fig. 3I). Pero no se observó una correlación obvia entre la expresión de los monocitos CD64 onCD14+CD16++ y las proporciones de los monocitos CD14+CD16++ (r=0,1910, P=0,2140;Fig. 3J). No se observó ninguna correlación obvia entre la expresión de CD64 en subconjuntos de monocitos y las proporciones de cada subconjunto de monocitos en el VH (datos no presentados).

Expresión de CD64 en subconjuntos de monocitos correlacionados con marcadores inflamatorios

Los pacientes con AR con frecuencia tienen niveles elevados de marcadores inflamatorios. Para determinar la relación entre la expresión de CD64 en subconjuntos de monocitos y los marcadores inflamatorios,se determinaron y analizaron marcadores inflamatorios, como ESR, PCR, leucocitos,recuento de neutrófilos, porcentaje de neutrófilos, IgG, C3 y C4, para determinar su relación con la expresión de CD64 en monocitos CD14++CD16,monocitos CD14++CD16+ y monocitos CD14+CD16++ en pacientes con AR.La expresión de CD64 en los monocitos CD14++CD16 se correlacionó positivamente con la VSG y la PCR en pacientes con AR(r=0,4853, P=0,0013, Fig. 4A; r = 0,4484, P = 0,0061, Fig. 4B), la expresión de CD64 en CD14++CD16+ monocytespositivamente correlacionada con VSG y PCR en pacientes con AR (r0, 5128, P=0,0006, Fig. 4C; r=0.4721,P=0,0036, Fig. 4D), la expresión de CD64 en monocitos CD14+CD16++ correlacionada positivamentecon la VSG (r=0,3336, P=0,0330, Fig. 4E), mientras que la expresión de los monocitos CD64 onCD14+CD16++ no se correlacionó con la PRC (r=0,1356, P=0,4297, Fig. 4F).Sin embargo,no se encontró una relación obvia entre la expresión de CD64 en monocitos CD14++CD16,monocitos CD14+CD16++, monocitos CD14++CD16+ y leucocitos, recuento de neutrófilos, porcentaje de neutrófilos, IgG, C3, C4 (datos no presentados).

Expresión de CD64 en subconjuntos de monocitos correlacionados con marcadores de respuesta autoinmune

Se determinaron y analizaron los anticuerpos distintivos de AR, como RF y ACPA,para determinar su correlación con la expresión de CD64 en subconjuntos de monocitos. Como se muestra en la Fig. 5, la expresión de los monocitos CD64 onCD14++CD16 y CD14++CD16 + aumentó significativamente en pacientes con ACPA y FR positivos respectivamente (P = 0,0460, Fig. 5A; P = 0,0035, Fig. 5B; P = 0,0416, Fig. 5C; P = 0,0042, Fig. 5D). Sin embargo, no se encontró una relación obvia entre la expresión de monocitos CD64 onCD14+CD16++ y ACPA,RF (P=0,6718, Fig. 5E; P = 0,8128, Fig. 5F).

La expresión de CD64 en subconjuntos de monocitos se correlaciona con la actividad de la enfermedad de la AR

Los datos antes mencionados indicaron que la expresión de CD64 en subconjuntos de monocitos se correlacionó con marcadores de inflamación y respuesta autoinmune. Así, se investigó la correlación entre la expresión de CD64 en subconjuntos de monocitos y la actividad de la enfermedad. Los datos mostraron que tanto la expresión de los monocitos CD64 onCD14++CD16-como de los monocitos CD14++CD16+ estaban correlacionados positivamentecon la puntuación DAS28 (r=0,3506, P=0,0212; r=0,3208,P=0,0360) (Fig. 6A y B), mientras que la expresión de CD64 en monococitos CD14+CD16++ no se correlacionó con la puntuación DAS28 (r=0,2587, P=0,0938; Fig. 6C).

Posteriormente, comparamos los subconjuntos de expresión de CD64 en monocitos entre los pacientes con nueva aparición y re-visitingRA. Los datos mostraron que la expresión de CD64 en subconjuntos de monocitos tiende a elevarse en pacientes con AR de nueva aparición, pero no se alcanzó una diferencia significativa (P>0,0500; Fig. 6D).

La asociación entre la expresión de CD64 en subconjuntos de monocitos y la concentración sérica de citoquinas

Entre las tres citoquinas inflamatorias séricas, los niveles de IL-6 e IL-8 fueron significativamente mayores en pacientes con AR que en HV (P=0,0011, Fig. 7A; P = 0,0387, Fig. 7B), no se observaron diferencias significativas en los niveles de IL-10 entre los pacientes con AR y HV(P=0,8994; Fig. 7C). Para determinar si los niveles aumentados de CD64 en subconjuntos de monocitos desempeñan un papel en la secreción de citocinas séricas (IL-6 e IL-8), los pacientes con AR se dividieron en dos grupos de acuerdo con sus niveles de CD64 (promedio de IMF) en subconjuntos de monocitos: AR alta(CD64 onCD14++CD16− >39.32, CD64 onCD14++CD16+ >43.19, CD64 onCD14+CD16++ >25.87) y RAlow(CD64 en CD14++CD16− <39.32,CD64 en CD14++CD16+ <43.19, CD64 onCD14+CD16++ <25.87). Los pacientes con AR con niveles elevados de CD64 en monococitos CD14++CD16+ exhibieron niveles significativamente más altos de IL-6 en comparación con los pacientes rapaces con niveles bajos de monocitos CD64 onCD14++CD16+ (P=0,0131; Fig. 7D). No se observaron diferencias significativas en los niveles de IL− 6 entre pacientes con AR con niveles elevados de CD64 en los monocitos CD14++CD16− orCD14+CD16++ y niveles bajos de CD64 en los monocitos CD14++CD16-orCD14+CD16++ (P>0,05; Fig. 7D). Y no se observaron diferencias significativas en los niveles de IL-8 entre pacientes con AR con niveles altos de CD64 en cada subconjunto de monocitos y niveles bajos de CD64 en cada subconjunto de monocitos (P>0,05; Fig.7E). Estos resultados indican que el aumento de los monocitos CD64 onCD14++CD16+ en pacientes con AR está asociado con un aumento de la secreción de IL-6.

Discusión

Los monocitos son una población celular heterogénea compuesta de monocitos clásicos(CD14++CD16−), monocitos intermedios(CD14++CD16+) y monocitos no clásicos(CD14+CD16++). Los tres subconjuntos de monocytesprestan funciones diferentes. El subconjunto clásico se recruta rápidamente a los sitios de inflamación y parece actuar como células carroñeras asfagocíticas y reguladores de la inflamación (22,23). Los monocitos intermedios desempeñan un papel proinflamatorio, aumentando en la sangre de pacientes con inflamación aguda (24,25). Los monocitos no clásicos a menudo se denominan monocitos patrullantes (26). Investigaciones previas han reportado que los monocitos juegan un papel importante en la progresión de la ARA. El inicio y la gravedad de la artritis reumatoide también podrían deberse a que la estacionalidad de los subconjuntos de monocitos era aberrante.

Aunque se ha notificado un aumento de los monocitos inCD14++CD16+ y una disminución de los monocitos inCD14++CD16 en pacientes con RAH, el aumento de los monocitos inCD14+CD16++ siguió siendo controvertido (27,28). De acuerdo con el informe de Patatría Lacerte (28), este estudio demuestra que los monocitos CD14++CD16+ y CD14+CD16++ circulantes aumentan, mientras que los monocitos CD14++CD16 circulantes disminuyen en pacientes con AR. Las razones de estos resultados probablemente se deban a diferencias en la duración de la enfermedad y en los tratamientos en curso.

Una evaluación de la expresión de los marcadores fenotípicos característicos CD40, CD64, CD163, CD206, HLA-DR,CD80 y CD86 ayudó a caracterizar aún más la respuesta monocitaria en pacientes con AR. De acuerdo con los resultados de otras investigaciones (16,29), encontramos que la expresión de monocitos CD64on estaba significativamente elevada en pacientes con AR en comparación con el VHC, sin cambios de otros marcadores entre pacientes con AR y VHC.El aumento de la expresión de CD64 en monocitos en pacientes con AR activa puede sugerir la progresión de la enfermedad (16), y también puede reflejar la activación de los monocitos. Aunque se ha notificado un aumento de CD64 en subconjuntos de monocitos pacientes hospitalizados con AR (30), aún no se ha investigado la posibilidad de correlación entre la expresión de CD64 en cada subconjunto de monocitos y la actividad de la enfermedad en pacientes con AR. Nuestros resultados respaldan observaciones previas (30) y muestran que la expresión de los monocitos CD64 onCD14++CD16 y CD14++CD16+ se elevó significativamente en comparación con la de los monocitos CD14+CD16++ en pacientes con ARA, y la expresión de los monocitos CD64 onCD14++CD16 y CD14++CD16+ se correlacionó positivamente con la puntuación DAS28.

Se sabe poco sobre la posibilidad de correlación entre la expresión de CD64 en cada subconjunto de monocitos y la proporción de cada subconjunto de monocitos en pacientes con AR. Descubrimos que la proporción de monocitos CD14++CD16+se correlacionaba positivamente con la expresión de monocitos CD64 onCD14++CD16+ en pacientes con AR, donde la proporción de monocitos CD14++CD16 se correlacionaba negativamente con la expresión de monocitos CD64 onCD14++CD16. Las razones de los resultados probablemente se deben a que la proporción de monocitos intermedios se correlacionó positivamente con la actividad de la enfermedad de la AR, mientras que la proporción de monococitos clásicos correlacionados negativamente (27) y nuestros resultados mostraron que la expresión de monocitos CD64 onCD14++CD16 y monocitos CD14++CD16+ estaban correlacionados positivamentecon la puntuación DAS28.

Es bien sabido que la AR es una enfermedad autoinmune caracterizada por la producción de autoanticuerpos que incluyen RF,ACPA y la respuesta autoinmune es un tipo de inflamación crónica contra antígenos propios. En este estudio, se determinaron y analizaron por primera vez los marcadores inflamatorios,DAS28, los anticuerpos distintivos de la AR, incluidos la RF y la ACPA, para determinar su relación con la expresión de CD64 en subconjuntos de monocitos. Nuestros resultados mostraron que la expresión de CD64 en los monocitos CD14++CD16− y CD14++CD16+ se relacionaba positivamente con la ESR, PCR y DAS28, mientras que la expresión de los monocitos CD64 onCD14+CD16++ no se correlacionaba con la PRP y DAS28. Además, encontramos que la expresión de los monocitos CD64 onCD14++CD16 y CD14++CD16 + aumentó significativamente en pacientes con FR positivo y ACPA respectivamente, mientras que no se encontró una relación obvia entre la expresión de CD64 en los monocitos CD14++CD16+ y FR, ACPA.Esto puede ser que (1)Los monocitos CD14++CD16 y los monocitos CD14++CD16+ parezcan actuar como reguladores de la inflamación, donde los monocitos ASCD14+CD16++ a menudo se refieren a monocitos enrollado (22-26); (2)el CD64 es un receptor activador de alta afinidad que puede unirse a la IgG y la PRP y estimular procesos inflamatorios (16,31,32).

En consonancia con el estudio anterior (27), mostramos aquí que los niveles basales de IL-6 y IL-8 eran significativamente más altos en pacientes con AR que en HV. Además, observamos que los pacientes con AR con niveles altos de CD64 en los monocitos CD14++CD16 + exhibían niveles significativamente más altos de IL-6 en comparación con los pacientes con AR con niveles bajos de CD64 en los monocitos CD14++CD16+. Estos resultados sugieren que los niveles de monocitos CD64 onCD14++CD16+ están de hecho vinculados a las altas concentraciones de citocinas proinflamatorias de la creación.

Sin embargo, hay algunas limitaciones en el presente estudio. El primero es el tamaño relativamente pequeño de la muestra, especialmente la muestra de AR de nueva aparición; estos datos pueden confirmarse en estudios a gran escala. En segundo lugar, no mostramos que cada subconjunto de monocitos esté directamente asociado con citoquinas inflamatorias en AR invitro. En tercer lugar, en este estudio no se han realizado estudios funcionales ni experimentos sobre el mecanismo de CD64. Los mecanismos moleculares subyacentes a las funciones de CD64 en AR aún requieren una investigación más profunda.

En las conclusiones, los resultados presentados en este estudio demuestran que los subconjuntos de monocitos sanguíneos aislados de pacientes con AR tienen niveles altos de CD64 y los niveles de monocitos CD64 onCD14++CD16− y CD14++CD16+ se correlacionan con la actividad de enfermedad de la AR. Además, los niveles de monocitos CD64 onCD14++CD16 + están vinculados al alto nivel de creación de citoquinas proinflamatorias.

Agradecimientos

Los autores agradecen la ayuda del Dr. Rui Wu del Departamento de Reumatología, El Primer hospital afiliado de la Universidad de Nanchang, Nanchang, Jiangxi, China.

Financiación

El presente estudio fue apoyado por la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (subvención no. 81360459), la Fundación de Ciencias Naturales de JiangxiProvincial de China (subvención no.20151BAB215031 y 20171BAB205113), el Proyecto de Ciencia y Tecnología de la Comisión de Salud y Planificación Familiar de Jiangxiprovincia de China (subvención no. 20165094), el Proyecto de Plan de Ciencia y Tecnología del Departamento de Educación de la provincia de Jiangxi (grantno. GJ170008) y la Fundación para Jóvenes Científicos Distinguidos de la Provincia China de Jiangxi (subvención no. 20171BCB23087).

Disponibilidad de datos y materiales

Los conjuntos de datos utilizados y / o analizados durante el estudio actual están disponibles a petición del autor correspondiente.

Contribuciones de los autores

QL participó en el diseño del estudio, realizó análisis estadísticos y redactó el manuscrito. PCX participó en el diseño del estudio y ayudó a revisar el manuscrito. XL realizó un análisis de citometría de flujo y redactó el manuscrito. ZD realizó análisis estadísticos y redactó el manuscrito. CQ realizó la adquisición de datos de marcadores de respuesta autoinmune, realizó análisis estadísticos y redactó el manuscrito. RG llevó a cabo la adquisición de datos de marcadores de inflamación, realizó análisis estadísticos y redactó el manuscrito. JQX realizó la adquisición de datos de la actividad y gravedad de la enfermedad, realizó análisis estadísticos y redactó el manuscrito. YG llevó a cabo los experimentos sobre la expresión de citoquinas y redactó el manuscrito. ZKH y JML concibieron el estudio, participaron en su diseño y coordinación, y ayudaron a redactar el manuscrito. Los autores leyeron y aprobaron el manuscrito final.

Aprobación ética y consentimiento para participar

El estudio fue aprobado por el Comité de Ética del Primer Hospital Afiliado de la Universidad de Nanchang (019) y se llevó a cabo de conformidad con la Declaración de Helsinki. Se obtuvo el consentimiento informado por escrito de todos los participantes antes de que entraran en el estudio.

Consentimiento del paciente para la publicación

No se aplica.

Intereses en competencia

Los autores declaran que no tienen intereses en competencia.

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