Chelex 100

Chelex 100 ist ein Chelatbildner von Bio-Rad, der zur Reinigung anderer Verbindungen über Ionenaustausch verwendet wird. Es ist bemerkenswert für seine Fähigkeit, Übergangsmetallionen zu binden.

Es ist ein Styrol-Divinylbenzol-Copolymer, das Iminodiessigsäuregruppen enthält.

Eine konzentrierte Lösung von Metallen wird erhalten, indem das Harz mit einem kleinen Volumen von 2 M Salpetersäure eluiert wird, die die Iminodiacetatgruppen protoniert.Chelex-Harz wird häufig zur DNA-Extraktion zur Vorbereitung der Polymerase-Kettenreaktion durch Bindung an Kationen einschließlich Mg2 + verwendet, das ein essentieller Cofaktor für DNasen ist. Chelex schützt die Probe vor DNasen, die nach dem Kochen aktiv bleiben und die DNA anschließend abbauen können, wodurch sie für die PCR ungeeignet wird. Nach dem Kochen ist das Chelex-DNA-Präparat stabil und kann 3-4 Monate bei 4 ° C gelagert werden. Polare Harzkügelchen binden nach dem Aufbrechen von Zellen polare zelluläre Komponenten, während DNA und RNA in Wasserlösung über dem Chelexharz verbleiben.

Die Erhitzungsschritte denaturieren jedoch die Doppelhelix, und die resultierende einzelsträngige DNA ist weniger lagerstabil.

Schreibe einen Kommentar

Deine E-Mail-Adresse wird nicht veröffentlicht.