Chelex 100

Chelex 100 je chelatační materiál z Bio-Rad, který se používá k čištění jiných sloučenin iontovou výměnou. Je pozoruhodný svou schopností vázat ionty přechodných kovů.

je to styren-divinylbenzenový kopolymer obsahující skupiny kyseliny iminodioctové.

koncentrovaný roztok kovů se získá elurací pryskyřice malým objemem 2 M kyseliny dusičné, která protonuje iminodiacetátové skupiny.

chelexová pryskyřice se často používá k extrakci DNA při přípravě polymerázové řetězové reakce vazbou na kationty včetně Mg2+, což je základní kofaktor pro Dnázy. Chelex chrání vzorek před Dnázami, které by mohly zůstat aktivní i po varu a mohly by následně degradovat DNA, což by ji činí nevhodnou pro PCR. Po varu je přípravek Chelex-DNA stabilní a může být skladován při 4°C po dobu 3-4 měsíců. Kuličky polární pryskyřice vážou polární buněčné složky po rozbití otevřených buněk, zatímco DNA a RNA zůstávají ve vodném roztoku nad pryskyřicí Chelex.

Nicméně, topení kroky denaturaci dvoušroubovice, a výsledný single-stranded DNA je méně stabilní při skladování.

Napsat komentář

Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna.