Chelex 100

Chelex 100 on kelatoiva aine Bio-Radista, jota käytetään muiden yhdisteiden puhdistamiseen ioninvaihdon avulla. Se on huomionarvoinen kyvystään sitoa siirtymämetalli-ioneja.

se on iminodietikkahapporyhmiä sisältävä styreeni-divinyylibentseenikopolymeeri.

väkevää metalliliuosta saadaan elutoimalla hartsia pienellä 2 M: n typpihapolla, joka protonoi iminodiasetaattiryhmät.

Kelex-hartsia käytetään usein DNA: n uuttamiseen valmistettaessa polymeraasiketjureaktiota sitoutumalla kationeihin, mukaan lukien Mg2+, joka on dnaasien välttämätön kofaktori. Chelex suojaa näytettä dnaaseilta, jotka saattavat pysyä aktiivisina kiehumisen jälkeen ja jotka voivat myöhemmin hajottaa DNA: ta, jolloin se ei sovellu PCR: lle. Keittämisen jälkeen Chelex-DNA-valmiste on stabiili ja sitä voidaan säilyttää 4°C: ssa 3-4 kuukautta. Polaarihartsihelmet sitovat polaarisia solukomponentteja avattuaan soluja, kun taas DNA ja RNA jäävät vesiliuokseen Kelex-hartsin yläpuolelle.

kuumennusvaiheet kuitenkin denaturoivat kaksoiskierteen, eikä tuloksena oleva yksijuosteinen DNA ole varastoitaessa vähemmän stabiili.

Vastaa

Sähköpostiosoitettasi ei julkaista.