tekst

CD177 is een glycosylfosfatidylinositol (GPI) – verankerd glycoproteïne dat uitsluitend wordt uitgedrukt door neutrofielen, neutrofiele metamyelocyten en myelocyten, maar niet door andere bloedcellen. Alleen een subpopulatie neutrofielen brengt CD177 tot expressie op het celoppervlak, waarbij de gemiddelde grootte van de CD177-positieve populatie varieert van 45% tot 65%. CD177 is upregulated in verschillende inflammatoire instellingen, met inbegrip van bacteriële infectie en granulocyt kolonie-stimulerende factor (GCSF, of CSF3; 138970) aanvraag (samenvatting door Sachs et al., 2007).

NB1, een GPI-gekoppeld n-geglycosyleerd celoppervlak glycoproteïne, werd voor het eerst beschreven in een geval van neonatale alloimmune neutropenie (Lalezari et al., 1971). Het gebruiken van subtractieve kruising van mRNA van polycythemia vera (263300) patiënt granulocytes en mRNA van normale granulocytes, Temerinac et al. (2000) geïsoleerd een cDNA codering NB1, die ze genoemd PRV1. Northern blot analyse onthulde expressie van 2.1 – en 3.1-kb transcripten in granulocytes van PV-patiënten maar niet normale granulocytes. Zwakke expressie van PRV1 werd waargenomen bij een patiënt met idiopathische myelofibrose (zie 254450) en bij sommige patiënten met essentiële trombocytemie (zie 187950), maar er werd geen expressie waargenomen bij patiënten met acute of chronische myelogene leukemie (zie respectievelijk 601626 en 151410) of bij patiënten met polycythemische secundaire erytrocytose. Sterke expressie in beenmerg en lichte expressie in foetale lever werd waargenomen, maar PRV1 werd niet tot expressie gebracht in andere weefsels. Behandeling van normale stamceldonoren of, in vitro, normale granulocyten, met GCSF of CSF2 (138960) induceerde aanvankelijk expressie van het 3.1-kb transcript en vervolgens het 2.1 kb transcript. De afgeleide 437-aminozuur prv1 eiwit bevat een n-terminale signaalsequentie, 2 zeer homologe 188-residu cysteïne-rijke domeinen die homologie delen met UPAR domeinen (zie 606119), en een zeer hydrofobe C-terminale sequentie waarschijnlijk coderen een GPI link. Western blot en flow cytometrische analyses toonden cel oppervlakte expressie van een 60-KD eiwit, 14 KD groter dan de voorspelde grootte, waarschijnlijk als gevolg van de aanwezigheid van 3 potentiële n-glycosylation plaatsen. Immunohistochemie toonde expressie in beenmerg vroege erytroblasten, megakaryocytes, promyelocytes, en myelocytes.

onafhankelijk van elkaar, Kissel et al. (2001) gekloond en gekarakteriseerd NB1, die zij ook als CD177 en HNA2A verwezen. zij verkregen de cDNA na zuivering en microsequence analyse van NB1 eiwit uit normale rust granulocyten. Kissel et al. (2001) opgemerkt aminozuur verschillen tussen de PRV1 (Temerinac et al., 2000) en NB1 opeenvolgingen op posities 3, 119, 323, en 379 en suggereerden dat 2 verschillende, hoogst homologe genen kunnen bestaan.

met behulp van PCR – en sequentieanalyse, Caruccio et al. (2006) vastgesteld dat PRV1 en NB1 allelen van het gen CD177 zijn.

door genomische sequentieanalyse en PCR, Kissel et al. (2002) vastgesteld dat het NB1 Gen 9 exonen bevat.

door genomische sequentieanalyse, Kissel et al. (2001) bracht het NB1 gen in kaart op chromosoom 19q13.2.

met behulp van FISH, Caruccio et al. (2006) bracht het CD177 gen in kaart op chromosoom 19q13.31. Telomeer aan CD177 is een pseudogeen homoloog aan exons 4 tot en met 9 van CD177.

door flowcytometrische en immunoprecipitatieanalyses, Sachs et al. (2007) identificeerde PECAM1 (173445) als een heterofiele bindingspartner van CD177. De resonantieanalyse van het oppervlakteplasmon wees uit dat deze interactie kationafhankelijk was en de heterofiele domeinen van PECAM1 betrof. Monocyten met CD177-expressie hechtten niet aan PECAM1 in aanwezigheid van monoklonale antilichamen tegen CD177 of tegen domein 6 van PECAM1. De antilichamen remde ook transendotheliale migratie van neutrofielen.

Bayat et al. (2010) merkte op dat 3 gekoppelde SNPs binnen PECAM1 aminozuursubstituties coderen binnen IG-domein 1 (leu98 aan val; L98V), IG-domein 6 (ser546 aan asn; S546N), en het cytoplasmatische doman (arg643 aan gly; R643G), resulterend in 2 belangrijke isovormen genoemd LSR en VNG. Door het screenen van menselijke vasculaire endotheelcellen (HUVECs) en neutrofielen, bevestigden ze dat de 3 SNP ‘ s werden overgedragen als een blok, met VNG-homozygoten, LSR-homozygoten en VNG/LSR-heterozygoten gedetecteerd. Cytometrie van de stroom toonde aan dat beide varianten op gelijke niveaus werden uitgedrukt en dat hun HUVECs even permeabel waren. De CD177-spiegels in neutrofielen waren variabel en CD177 migreerde significant sneller via HUVECs met LSR-expressie dan via HUVECs met VNG-expressie. HUVECs met LSR-expressie had ook een verminderde itim-fosforylering. Betrokkenheid van PECAM1 met recombinant cd177 onderdrukte antilichaam-geïnduceerde itim fosforylering in LSR-expresserende cellen. Bayat et al. (2010) stelde voor dat heterofiele PECAM1/CD177 interacties de fosforylatietoestand van PECAM1 beïnvloeden, evenals endotheliale junctieintegriteit en neutrofieltransmigratie, op een allel-specifieke manier.

door een dataset van een genarray te onderzoeken, Xie et al. (2015) vond dat CD177 was het meest upregulated gen in menselijke neutrofielen na pulmonale endotoxine blootstelling.

Kissel et al. (2002) rapporteerde dat 2 vrouwen zonder cel-oppervlak NB1 expressie maar met NB1-specifieke alloantibodies na de bevalling van baby ‘ s met alloimmune neonatale neutropenie genomische NB1 bezaten. De auteurs stelden vast dat het NB1-negatieve fenotype het gevolg was van verschillende off-frame inserties op RNA-niveau die een afwezigheid van GPI-linkageplaatsen en transmembraansegmenten veroorzaakten. Kissel et al. (2002) concludeerde dat alle vermeende oplosbare fragmenten geproduceerd waren niet in staat om alloimmunisatie te voorkomen.

Xie et al. (2015) gegenereerde Cd177-null muizen, die gezond en normaal waren, behalve voor verminderde neutrofielentellingen in perifeer bloed. Huidinfectie met Staphylococcus aureus resulteerde in vermindering van neutrofielen in inflammatoire huid, zonder effect op cxcl1 (155730)- of fMLP (zie 300291)-geïnduceerde migratie. Xie et al. (2015) concludeerde dat CD177 een belangrijke rol speelt bij neutrofielen.