tekst

CD177 er et 58-Til 64-KD glycosylphosphatidylinositol (GPI) – forankret glycoprotein udtrykt udelukkende af neutrofiler, neutrofile metamyelocytter og myelocytter, men ikke af andre blodlegemer. Kun en subpopulation af neutrofiler udtrykker CD177 på celleoverfladen, med den gennemsnitlige størrelse af den CD177-positive population i området fra 45% Til 65%. CD177 opreguleres i forskellige inflammatoriske indstillinger, herunder bakteriel infektion og granulocytkolonistimulerende faktor (GCSF eller CSF3; 138970) ansøgning (sammendrag af Sachs et al., 2007).

kloning og ekspression

NB1, et GPI-bundet n-glykosyleret celleoverfladeglykoprotein, blev først beskrevet i et tilfælde af neonatal alloimmun neutropeni., 1971). Under anvendelse af subtraktiv hybridisering af mRNA fra polycythemia vera (263300) patientgranulocytter og mRNA fra normale granulocytter, Temerinac et al. (2000) isolerede en cDNA-kodning NB1, som de kaldte PRV1. Northern blot analyse afslørede udtryk for 2,1-og 3.1-kb-transkripter i granulocytter fra PV-patienter, men ikke normale granulocytter. Svag ekspression af PRV1 blev set hos en patient med idiopatisk myelofibrose (se 254450) og hos nogle patienter med essentiel trombocytæmi (se 187950), men der blev ikke set nogen ekspression hos patienter med akut eller kronisk myelogen leukæmi (se henholdsvis 601626 og 151410) eller hos patienter med polycytæmisk sekundær erytrocytose. Stærk ekspression i knoglemarv og let ekspression i føtal lever blev påvist, men PRV1 blev ikke udtrykt i andre væv. Behandling af normale stamcelledonorer eller in vitro normale granulocytter med GCSF eller CSF2 (138960) induceret ekspression oprindeligt af 3.1-kb-transkriptet og derefter 2.1 kb-transkriptet. Det udledte 437-aminosyre PRV1-protein indeholder en N-terminal signalsekvens, 2 Meget homologe 188-restcysteinrige domæner, der deler homologi med UPAR-domæner (Se 606119) og en meget hydrofob C-terminal sekvens, der sandsynligvis koder for et GPI-link. Vestlige blot-og strømningscytometriske analyser viste celleoverfladeekspression af et 60-kD-protein, 14 kD større end den forudsagte størrelse, sandsynligvis på grund af tilstedeværelsen af 3 potentielle n-glycosyleringssteder. Immunhistokemi viste ekspression i knoglemarv tidlige erythroblaster, megakaryocytter, promyelocytter og myelocytter.

uafhængigt, Kissel et al. (2001) klonet og karakteriseret NB1, som de også benævnt CD177 og hna2a. de opnåede cDNA efter oprensning og mikrosekvensanalyse af NB1-protein fra normale hvilende granulocytter. Kissel et al. (2001) bemærkede aminosyreforskelle mellem PRV1 (Temerinac et al., 2000) og NB1-sekvenser i position 3, 119, 323 og 379 og foreslog, at der kan eksistere 2 forskellige, meget homologe gener.

Ved hjælp af PCR og sekvensanalyse, Caruccio et al. (2006) fastslog, at PRV1 og NB1 er alleler af CD177-genet.

Ved genomisk sekvensanalyse og PCR, Kissel et al. (2002) fastslog, at NB1-genet indeholder 9 eksoner.

Ved genomisk sekvensanalyse, Kissel et al. (2001) kortlagt NB1-genet til kromosom 19k13.2.

brug af fisk, Caruccio et al. (2006) kortlagde CD177-genet til kromosom 19k13.31. Telomer til CD177 er en pseudogen homolog til eksoner 4 til 9 af CD177.

Ved strømningscytometriske og immunpræcipitationsanalyser, Sachs et al. (2007) identificeret PECAM1 (173445) som en heterofile bindingspartner af CD177. Overfladeplasmonresonansanalyse viste, at denne interaktion var kationsafhængig og involverede de heterofile domæner af PECAM1. Monocytter, der udtrykte CD177, kunne ikke klæbe til PECAM1 i nærvær af monoklonale antistoffer mod CD177 eller mod domæne 6 af PECAM1. Antistofferne hæmmede også transendothelial migration af neutrofiler.

Bayat et al. (2010) bemærkede, at 3 linkede SNP ‘ er inden for PECAM1 koder aminosyresubstitutioner inden for Ig-domæne 1 (leu98 til val; L98V), ig-domæne 6 (ser546 til asn; S546N) og den cytoplasmatiske doman (arg643 til gly; R643G), hvilket resulterer i 2 større isoformer betegnet LSR og VNG. Ved screening af humane vaskulære endotelceller (HUVECs) og neutrofiler bekræftede de, at de 3 SNP ‘ er blev transmitteret som en blok med VNG-homosygoter, LSR-homosygoter og VNG/LSR-heterosygoter påvist. Strømningscytometri viste, at begge varianter blev udtrykt på lige niveauer, og at deres HUVECs var lige så permeable. CD177-niveauer i neutrofiler var variable, og CD177 migrerede signifikant hurtigere gennem LSR-ekspressive Huvec ‘er end gennem VNG-ekspressive Huvec’ er. LSR-udtrykkende HUVECs havde også reduceret ITIM-phosphorylering. Engagement af PECAM1 med rekombinant CD177 undertrykt antistofinduceret ITIM-phosphorylering i LSR-ekspressive celler. Bayat et al. (2010) foreslog, at heterofile pecam1/CD177-interaktioner påvirker phosphoryleringstilstanden for PECAM1 såvel som endotelforbindelsesintegritet og neutrofil transmigration på en allelspecifik måde.

Ved at undersøge et gene array datasæt, et al. (2015) fandt, at CD177 var det mest opregulerede gen i humane neutrofiler efter pulmonal endotoksineksponering.

Kissel et al. (2002) rapporterede, at 2 kvinder uden celleoverflade NB1-ekspression, men med NB1-specifikke alloantistoffer efter fødslen af babyer med alloimmun neonatal neutropeni havde genomisk NB1. Forfatterne fastslog, at den NB1-negative fænotype skyldtes forskellige insertioner uden for rammen på RNA-niveau, hvilket forårsagede fravær af GPI-bindingssteder og transmembrane segmenter. Kissel et al. (2002) konkluderede, at eventuelle formodede opløselige fragmenter, der blev produceret, ikke var i stand til at forhindre alloimmunisering.

et al. (2015) genererede Cd177-null mus, som var sunde og normale bortset fra reducerede neutrofiltal i perifert blod. Hudinfektion med Staphylococcus aureus resulterede i reduktion af neutrofiler i inflammatorisk hud uden indvirkning på ckscl1 (155730)- eller fMLP (se 300291)-induceret migration. Et al. (2015) konkluderede, at CD177 spiller en vigtig rolle i neutrofiler.