TESTO

CD177 è una glicoproteina ancorata al glicosilfosfatidilinositolo da 58 a 64 kD espressa esclusivamente da neutrofili, metamielociti neutrofili e mielociti, ma non da altre cellule del sangue. Solo una sottopopolazione di neutrofili esprime CD177 sulla superficie cellulare, con la dimensione media della popolazione CD177-positiva che varia dal 45% al 65%. CD177 è upregulated in varie regolazioni infiammatorie, compreso l’infezione batterica ed il fattore stimolante la colonia dei granulociti (GCSF, o CSF3; 138970) applicazione (sintesi di Sachs et al., 2007).

NB1, una glicoproteina di superficie cellulare N-glicosilata legata al GPI, è stata descritta per la prima volta in un caso di neutropenia alloimmune neonatale (Lalezari et al., 1971). Utilizzando ibridazione sottrattiva di mRNA da policitemia vera (263300) granulociti pazienti e mRNA da granulociti normali, Temerinac et al. (2000) ha isolato una codifica cDNA NB1, che hanno chiamato PRV1. Analisi Northern blot ha rivelato espressione di 2.1-e 3.1-kb trascritti in granulociti da pazienti PV ma non granulociti normali. Una debole espressione di PRV1 è stata osservata in un paziente con mielofibrosi idiopatica (vedere 254450) e in alcuni pazienti con trombocitemia essenziale (vedere 187950), ma nessuna espressione è stata osservata in pazienti con leucemia mieloide acuta o cronica (vedere 601626 e 151410, rispettivamente) o in pazienti con eritrocitosi secondaria policitemica. È stata rilevata una forte espressione nel midollo osseo e una leggera espressione nel fegato fetale, ma PRV1 non è stata espressa in altri tessuti. Trattamento di donatori di cellule staminali normali o, in vitro, granulociti normali, con GCSF o CSF2 (138960) espressione indotta inizialmente della trascrizione 3.1-kb e, successivamente, della trascrizione 2.1 kb. La proteina 437-amminoacido PRV1 dedotta contiene una sequenza di segnale N-terminale, 2 domini altamente omologhi 188-residui ricchi di cisteina che condividono l’omologia con i domini UPAR (vedere 606119) e una sequenza C-terminale altamente idrofobica probabilmente codificante un collegamento GPI. Le analisi citometriche Western blot e flow hanno mostrato l’espressione della superficie cellulare di una proteina 60-kD, 14 kD maggiore della dimensione prevista, probabilmente a causa della presenza di 3 potenziali siti di N-glicosilazione. L’immunoistochimica ha dimostrato l’espressione negli eritroblasti precoci del midollo osseo, nei megacariociti, nei promielociti e nei mielociti.

Indipendentemente, Kissel et al. (2001) clonato e caratterizzato NB1, che hanno anche indicato come CD177 e HNA2A. Hanno ottenuto il cDNA dopo l’analisi di purificazione e microsequenza della proteina NB1 dai normali granulociti a riposo. Kissel et al. (2001) ha notato differenze di aminoacidi tra il PRV1 (Temerinac et al., 2000) e sequenze NB1 alle posizioni 3, 119, 323 e 379 e hanno suggerito che possono esistere 2 geni diversi e altamente omologhi.

Utilizzando PCR e analisi di sequenza, Caruccio et al. (2006) ha determinato che PRV1 e NB1 sono alleli del gene CD177.

Mediante analisi di sequenza genomica e PCR, Kissel et al. (2002) ha determinato che il gene NB1 contiene 9 esoni.

Mediante analisi della sequenza genomica, Kissel et al. (2001) mappato il gene NB1 al cromosoma 19q13.2.

Utilizzando il PESCE, Caruccio et al. (2006) mappato il gene CD177 al cromosoma 19q13.31. Telomeric a CD177 è uno pseudogene omologo agli esoni da 4 a 9 di CD177.

Mediante analisi citometriche a flusso e immunoprecipitazione, Sachs et al. (2007) ha identificato PECAM1 (173445) come partner legante eterofilo di CD177. L’analisi della risonanza plasmonica di superficie ha indicato che questa interazione era dipendente dai cationi e coinvolgeva i domini eterofili di PECAM1. I monociti che esprimono CD177 non hanno aderito a PECAM1 in presenza di anticorpi monoclonali contro CD177 o contro il dominio 6 di PECAM1. Gli anticorpi hanno anche inibito la migrazione transendoteliale dei neutrofili.

Bayat et al. (2010) ha osservato che 3 SNP collegati all’interno di PECAM1 codificano le sostituzioni di aminoacidi all’interno del dominio Ig 1 (leu98 a val; L98V), il dominio Ig 6 (ser546 a asn; S546N) e il doman citoplasmatico (arg643 a gly; R643G), risultando in 2 isoforme principali denominate LSR e VNG. Attraverso lo screening delle cellule endoteliali vascolari umane (HUVECs) e dei neutrofili, hanno confermato che i 3 SNP sono stati trasmessi come un blocco, con omozigoti VNG, omozigoti LSR e eterozigoti VNG/LSR rilevati. La citometria a flusso ha dimostrato che entrambe le varianti erano espresse a livelli uguali e che i loro HUVEC erano ugualmente permeabili. I livelli di CD177 nei neutrofili erano variabili e CD177 migrava significativamente più velocemente attraverso HUVEC che esprimevano LSR che attraverso HUVEC che esprimevano VNG. HUVECs che esprimeva LSR aveva anche ridotto la fosforilazione ITIM. L’impegno di PECAM1 con CD177 ricombinante ha soppresso la fosforilazione ITIM indotta da anticorpi in cellule che esprimono LSR. Bayat et al. (2010) ha proposto che le interazioni eterofile PECAM1/CD177 influenzino lo stato di fosforilazione di PECAM1, così come l’integrità della giunzione endoteliale e la trasmigrazione dei neutrofili, in modo allele-specifico.

Esaminando un set di dati di array di geni, Xie et al. (2015) ha scoperto che CD177 era il gene più altamente sovraregolato nei neutrofili umani dopo l’esposizione all’endotossina polmonare.

Kissel et al. (2002) ha riferito che 2 donne senza espressione NB1 della superficie cellulare ma con alloanticorpi NB1 specifici dopo il parto di bambini con neutropenia neonatale alloimmune possedevano NB1 genomico. Gli autori hanno determinato che il fenotipo NB1-negativo derivava da diversi inserimenti off-frame a livello di RNA causando un’assenza di siti di collegamento GPI e segmenti transmembrana. Kissel et al. (2002) ha concluso che eventuali frammenti solubili putativi prodotti non erano in grado di prevenire l’alloimmunizzazione.

Xie et al. (2015) ha generato topi Cd177-null, che erano sani e normali tranne che per la riduzione della conta dei neutrofili nel sangue periferico. L’infezione cutanea da Staphylococcus aureus ha comportato una riduzione dei neutrofili nella cute infiammatoria, senza alcun impatto sulla migrazione indotta da Cxcl1 (155730)- o fMLP (vedere 300291). Xie et al. (2015) ha concluso che CD177 svolge un ruolo importante nei neutrofili.