Introduction

Le carcinome hépatocellulaire (CHC), qui représente le principal sous-type histologique des cancers primaires du foie, est le cinquième cancer le plus fréquent dans le monde et la troisième cause de mortalité par cancer (1,2). Les taux de cancer du foie les plus élevés sont constatés dans les pays en développement, en particulier en Asie de l’Est/Sud-Est et en Afrique centrale/occidentale, tandis que les taux sont faibles en Asie Centrale du Sud, en Asie occidentale, en Europe du Nord et de l’Est(3). L’altération génétique et l’épigénétique des facteurs à haut risque tels qu’une infection chronique par le VHB ou le VHC, une cirrhose hépatique, une maladie alcoolique du foie et des aflatoxines expliquent la forte morbidité du CHC (4-6).Cependant, le mécanisme moléculaire accompagné del’hépatocarcinogenèse et la progression sont encore largement floues.Ainsi, il est essentiel pour nous de clarifier l’étiologie et d’étudier l’altération moléculaire vitale sous-jacente à l’initiation et à la progression de l’hépatocellularcarcinome, et finalement d’améliorer nos concepts actuels pour le diagnostic, le dépistage et le traitement de cette maladie.

Au cours du processus d’hépatocarcinogenèse, la suppression des points de contrôle du cycle cellulaire est une caractéristique importante qui peut favoriser la formation de cancer (2). En tant que l’un des régulateurs du point de contrôle du cycle cellulaire, le cycle de division cellulaire 20 (CDC20) semble agir comme une protéine régulatrice interagissant avec le complexe / cyclosome favorisant l’anaphase (APC / C) dans le cycle cellulaire, qui est nécessaire à l’initiation de l’anaphase et à la sortie de la mitose (7,8). Deux facteurs régulateurs, CDC20 et CDH1 se lient directement à l’APC et activent son ubiquitinationactivité de la cycline pendant la mitose et la phase G1 (9,10).Il a été rapporté que la protéine 80 associée au récepteur (RAP80), qui recrute BRCA1 sur des sites de lésions de l’ADN dans la voie ubiquitinsignale induite par des lésions de l’ADN, peut être dégradée par le complexe favorisant l’anaphase (APC /C-Cdc20) ou (APC/C-Cdh1) par la polyubiquitination pendant la mitose jusqu’à la phase G1 (11). La déplétion de RAP80 a montré un contrôle efficace du point de contrôle de la phase G2-M et a favorisé la progression du cycle cellulaire mitotique.

L’expression de CDC20 peut être remarquablement supprimée par la protéine p53 qui inhibe la transformation maligne par la régulation du cycle cellulaire, la sénescence cellulaire et les gènes liés à l’apoptose (12). Une expression élevée de CDC20 a été rapportée dans diverses tumeurs malignes, y compris l’adénocarcinome du canal pancréatique (13), le carcinome à cellules orales, le cancer gastrique (14), le cancer du col de l’utérus (15) et diverses cellules cancéreuses (14,16).Cependant, le profil d’expression du CDC20 et sa signification clinique dans le carcinome hépatocellulaire humain n’ont pas été clarifiés.

Dans cette étude, en analysant l’ensemble de données de microréseaux (numéro d’adhésion. GSE14520) de la base de données Omnibus d’expression génique (GEO) (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/), nous avons constaté que CDC20 était le nœud principal des réseaux d’interaction moléculaire HCC. Nous avons examiné le niveau d’expression de CDC20 dans le CHC primaire et les tissus adjacents non tumoraux et évalué sa signification clinicopathologique dans 132 échantillons de CHC archivés. L’effet de la suppression du CDC20 par siRNA sur la croissance et le cycle cellulaire des cellules cancéreuses du foie a également été étudié. Nos résultats suggèrent que le CDC20 pourrait jouer un rôle important dans le développement du CHC.

Matériaux et méthodes

Analyse bioinformatique

Le jeu de données de microarray GSE14520(17) a été téléchargé à partir de GEO. Au total, 183 CHC et 179 tissus de para-carcinome correspondants qui ont été testés avec des puces génétiques Affymetrix U133A provenant de patients chinois de la cohorte 2 ont été utilisés dans cette étude. Les données de profilage de l’expression génique ont été résumées à l’aide de la méthode RMA (18) et des fichiers CDF centrés sur le gène Entrez (19) (au lieu des fichiers CDF d’origine d’Affymetrix), qui filtraient des sondes non spécifiques sur les puces électroniques et fusionnaient plusieurs ensembles de sondes représentant le même gène Intrez en un seul ensemble de sondes. Une analyse de signification de microarray (SAM) (20) a été réalisée pour identifier des gènes exprimés différemment entre le CHC et les tissus depara-carcinome correspondants. Delta a été réglé sur 2,25 et le seuil ofFDR a été réglé sur 0,001. Des gènes surexprimés dans le CHC qui ont été exprimés dans plus de 50 tissus du CHC mais moins de 10 tissus correspondant au para-carcinome ont été étudiés. Les gènes ont ensuite été analysés avec le logiciel GenCLiP (21) (http://ci.smu.edu.cn) pour annoter les fonctions géniques et structurer les réseaux d’interactions moléculaires.

Énoncé d’éthique

Les échantillons cliniques ont été utilisés uniquement à des fins de recherche. L’approbation a été obtenue du comité d’éthique de l’Hôpital général ChinesePLA (LREC 2012/40). Tous les échantillons ont été collectés sous la condition d’un consentement préalable écrit et éclairé des patients.

Patients et échantillons de tissus

Seize paires de CHC frais et de tissus non tumoreux adjacents utilisés pour les analyses de PCR et de western blot en temps réel ont été collectées pendant la chirurgie de l’Hôpital général chinois PLA (Beijing, Chine) de novembre 2012 à février 2013. Les tissus ont été congelés dans de l’azote liquide jusqu’à utilisation. Des tissus non tumoraux à base de paraffine, archivés et adjacents utilisés pour l’immunohistochimie (IHC) ont été obtenus auprès de 132 patients atteints de CHC ayant subi une résection hépatique partielle au même hôpital entre janvier 2006 et décembre 2007. L’âge médian des patientsétait de 52 ans (entre 24 et 80 ans).

Culture cellulaire

Une lignée de cellules hépatiques normales (LO2) et trois lignées cellulaires HCC (HepG2, SMMC7721, Huh7) ont été achetées auprès de la Collection américaine TypeCulture (ATCC, Manassas, VA) ou de la Banque de cellules de l’Académie Chinoise des Sciences et ont été conservées à l’Institut de biotechnologie de l’Académie des Sciences Médicales militaires. Toutes les cellules ont été maintenues dans le milieu Eagle modifié de Dulbecco (DMEM, Invitrogen, CA) additionné de 10% de sérum fœtal bovin (FBS, Gibco, Carlsbad, CA) et de 2 mM de L-glutamine, 100 U/ml de pénicilline, 100 µg/ml de streptomycine à 37 °C avec 5% de CO2.

Extraction d’ARN, synthèse d’ADNc et analyse PCR en temps réel

L’ARN total a été extrait de lignées cellulaires et d’échantillons de tissus à l’aide du réactif TRIzol (Invitrogen) selon les instructions du fabricant. Un total de 2 µg d’ARN a été retranscrit à l’aide du kit de synthèse TransScript et ADNc de Transgen Biotech (Beijing, Chine). Real-time PCR was performed toexamine CDC20 mRNA level in cell lines and tissue samples by usinga Bio-Rad iQ5 Multicolor Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad,Hercules, CA). β-actin was used as an internal control fornormalization. PCR primers were designed using the Primer Premier 5software and the sequences were: CDC20 forward,5′-TCGCATCTGGAATGTGTGCT-3′; and reverse,5′-CCCGGGATGTGTGACCTTTG-3′; β-actin forward,5′-TGACGTGGACATCCGCAAAG-3′; and reverse, 5′-CTGGAAGGTGGACAGCGAGG-3′. Les données d’expression ont été normalisées à la moyenne géométrique du gène d’entretien β-actine et calculées avec le ΔΔCt(22) et les résultats ont été exprimés avec le 2−ΔΔCt.

Analyse Western blot

L’analyse Western blot a été réalisée selon le protocole standard. L’électrophorèse sur gel de polyacrylamide SDS (10%) a été utilisée pour séparer la protéine qui a ensuite été électrotransférée du gel vers une membrane de fluorure de polyvinylidène (PVDF). Après blocage avec du lait écrémé séché à 5% pendant 1 h, la membrane a été incubée avec un anticorps polyclonal anti-humain CDC20 de lapin (1:1 000, Bioworld Technology, St. Parc Louis, MN) pendant 1 h à température ambiante. L’anticorps monoclonal α-tubuline humaine anti-souris (1:5 000; Biotechnologie de Santa Cruz, Santa Cruz, Californie) a été utilisé comme contrôle interne. Après lavage trois fois avec une solution saline tamponnée Tris entre 20 (TBST), la membrane a été incubée avec un anticorps secondaire conjugué à la peroxydase de raifort contre la souris rabbitor (dilution 1: 5 000). La détection chimiluminescente a été réalisée avec le substrat HRP Chimiluminescent Immobon Western (Millipore Corporation, Billerica, MA).

L’immunohistochimie (IHC) et le dépistage

L’immunohistochimie pour l’expression du CDC20 dans les échantillons non tumoraux HCC et adjacents ont été effectués à l’aide de méthodes standard.Brièvement, des coupes de tissus ont été incubées avec du 1:200 dilué anti-CDC20 de lapin (technologie Bioworld) pendant une nuit à 4 ° C. La sérumalbumine bovine (1%; BSA) sans anticorps primaire a été utilisée comme contrôle négatif. L’anticorps IgG anti-lapin secondaire à la peroxydase de poly-raifort (HRP) (ZSGB-Bio, Beijing, Chine) a été incubé à température ambiante pendant 20 min.

Toutes les sections immunodéprimées ont été examinées et analysées indépendamment par deux pathologistes en aveugle, sans connaissance des informations cliniquesopathologiques, sur la base de la méthode du score H, qui considère l’intensité de la coloration conjointement avec le pourcentage de cellules colorées positivement (23,24).Pour la méthode du score H, 10 champs ont été choisis au hasard à une amplification ×400. L’intensité de coloration dans les cellules a été notée comme 0,1, 2 et 3 correspondant respectivement à la coloration négative, faible, intermédiaire et forte. Dans chaque champ, le nombre total de cellules et de cellules colorées à chaque intensité a été compté. Le score H a été calculé selon la formule suivante: (% de cellules colorées à la catégorie d’intensité 1×1) + (% de cellules colorées à la catégorie d’intensité 2 ×2) + (% de cellules colorées à la catégorie d’intensité 3×3). Les scores H varient de 0 à 300 où 300 représentent 100% des cellules fortement colorées (3+) (24). Une expression CDC20 élevée a été définie comme une coloration des scores H des cellules ≥200.

La suppression de CDC20 par un petit ARN interférent (siRNA)

Un petit ARN interférent double brin (siRNA) a été synthétisée et purifiée par GenePharma (Shanghai, Chine). Les sous-séquences correspondant à la région de codage du CDC20 humain étaient: sens, 5′-GGAGCUCAUCUCAGGCCA UUU-3′; antisens, 5′-AUGGCCUGAGAUGAGCUCCUU-3′. Un siRNA brouillé non ciblé étaitutilisé pour le contrôle négatif. Ces SIRNA ont été dissous dans de l’eau de pyrocarbonate d’indiéthyle (DEPC) pour atteindre une concentration de 20 µm. Les cellules HépG2 du cancer du foie ont été traitées avec un ARNsi témoin CDC20 ou un ARNsi témoin négatif à 20 nM en utilisant le réactif de transfection d’ARNsi INTERFERin invitro (Polyplus Transfection, NewYork, NY).

Des analyses quantitatives de PCR en temps réel et de western blot ont été utilisées pour détecter l’effet d’interférence du siCDC20. Les cellules non traitées ou traitées avec des siRNAoligonucléotides témoins négatifs constituaient les groupes témoins.

Essai de prolifération cellulaire

Deux flacons en plastique de 25 cm2 ont été chacun inoculés avec 2×105 cellules cancéreuses du foie (HepG2), qui ont ensuite été transfectées avec un siRNA témoin négatif de 20 nM et un ARN CDC20siRNA, respectivement, pour une incubation de 48 h. Ensuite, les cellules ont été digérées et ensemencées en plaques de 6 puits contenant 2 ml de milieu par puits.Ensuite, les cellules d’un puits ont été digérées et comptées par le compteur de cellules automatisées (Invitrogen) toutes les 24 h jusqu’au cinquième jour.

Test de tri cellulaire activé par fluorescence (FACS) du cycle cellulaire

L’ARNsi pour CDC20 et les siRNAoligonucléotides témoins négatifs ont été transfectés dans des cellules HepG2 avec le réactif de transfection d’ARNsi in vitro interférine pendant 48 h. Après traitement avec 2 µg / ml de thymidine (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) pendant 24 h, les cellules ont été récoltées à 0, 3, 6, 9, 12- h après avoir retiré la thymidine du milieu et fixé avec 70% d’alcool.Avant les analyses, les cellules ont été lavées avec du PBS, traitées avec 1 mg/mlRNase A à 37°C pendant 30 min, puis colorées avec de l’iodure de propidium (PI). Les analyses ont été effectuées par BD FACSCalibur (Becton-Dickinson, Franklin Lakes, NJ) et les résultats ont été analysés par le logiciel WinMDI Version 2.9.

Analyses statistiques

Toutes les analyses statistiques ont été effectuées à l’aide du progiciel statistique IBMSPSS 20.0. L’analyse unidirectionnelle de la variance (ANOVA) a été utilisée pour comparer l’expression de l’ARNM CDC20 normalisée à la β-actine dans les lignées cellulaires. La même méthode a également été utilisée pour comparer la différenciation histologique des tissus tumoraux normalisés à des échantillons hépatiques normaux. Les comparaisons de données en deuxgroupes ont été effectuées par le test t de Student. Le test χ2 a été utilisé pour analyser la relation entre l’expression de CDC20 et les caractéristiques cliniques. Les corrélations bivariées entre les variables ont été calculées par les coefficients de corrélation de Spearman.Le niveau de signification statistique a été fixé à P< 0,05 pour tous les tests.

Résultats

CDC20 est le nœud principal des réseaux d’interaction moléculaire du CHC

L’analyse SAM a identifié 4 358 gènes inHCC surexprimés, dans lesquels 137 gènes ont été exprimés dans plus de 50 tissus du CHC, mais dans moins de 10 tissus du para-carcinome. L’analyse de GenCLiP a montré que parmi les 137 gènes, 72 gènes étaient liés au cycle cellulaire (P = 1,238e-15, par test χ2), 19 gènes étaient liés à l’assemblage de l’anneau (P = 2,172e-55, par test χ2) et 26 gènes étaient liés à la ségrégation chromosomique (P = 5,472e-55, test byx2). Parmi les réseaux moléculaires construits avec les 137 gènes, CDC20 était le nœud principal qui n’a pas été précédemment rapporté comme étant lié à HCC. Neuf gènes (NEK2, E2F1, BUB1, BUB1B, AURKB, CCNB1, CCNB2, UBE2C et CDKN2A) sont connus pour interagir avec CDC20, dans lequel 7 gènes étaient liés au point de contrôle d’assemblage de broche (SAC) (Fig.1). La cible du SAC est CDC20 (25). Ainsi, nous avons déduit que dans HCC, la surexpression de CDC20 conduit à l’absence de SAC, et les cellules deviennent rapidement aneuploïdes.

CDC20 est surexprimé en HCC

Une PCR quantitative en temps réel a été utilisée pour examiner le niveau de CDC20 dans trois lignées cellulaires HCC (HepG2, SMMC-7721 et Huh7) et une lignée cellulaire hépatique normale (LO2). Le niveau d’ARNm CDC20 était plus élevé dans les trois lignées cellulaires HCC que dans la lignée cellulaire normale (Fig. 2).

Afin de déterminer si la régulation à la hausse du CDC20 dans les lignées cellulaires du CHC est similaire chez les patients atteints de CHC, nous avons effectué une PCR quantitative en temps réel sur 16 paires de tissus hépatiques appariés du CHC et adjacents. Comme le montre la Fig.3A, CDC20 s’est avéré être surexprimé de manière différentielle dans 14 de tous les échantillons de CHC primaires humains examinés par rapport à des échantillons non cancéreux provenant des mêmes patients. De plus, le rapport tumeur / non tumorale (T / NT) de l’expression de l’ARNm CDC20 était au moins > 2 fois dans tous ces 14 échantillons régulés à la hausse, et le rapport le plus élevé était même jusqu’à environ 40 fois. Le taux de protéines de CDC20 a été confirmé dans l’ensemble des 16 échantillons de tissus appariés par analyse western blot. Le logiciel Image J1.47v a été utilisé pour quantifier le niveau de gris de chaque bande et calculer le rapport CDC20 T / NT de chaque patient normalisant avec une tubuline. Les résultats ont révélé que tous les échantillons de CHC examinés présentaient un niveau d’expression plus élevé de la protéine CDC20, à l’exception de l’échantillon 1 et de l’échantillon 4, ce qui était compatible avec le taux d’ARNm (Fig. 3B). Ces résultats ont indiqué que le CDC20 était généralement régulé à la hausse dans les tissus du CHC ou les lignées cellulaires.

La coloration immunohistochimique de la protéine CDC20PROTÉINE

L’immunohistochimie (IHC) a été réalisée pour analyser l’expression protéique et la localisation de CDC20 dans 132 échantillons de tissus HCC archivés intégrés à des particules, y compris 14 cas de tumeurs bien différenciées, 78 cas de tumeurs modérément différenciées et 40 cas de tumeurs faiblement différenciées. La protéine CDC20 a été régulée à la hausse (score H ≥200) dans 90 (68,18%) des 132 tissus HCC. Comme le montre inFig. 4A, des niveaux élevés de CDC20 étaient présents dans les lésions primaires du CHC et la coloration positive principalement localisée dans le cytoplasme et les noyaux. En revanche, CDC20 étaitnégativement ou faiblement coloré dans les tissus non tumoraux correspondants. En comparant quantitativement les scores de coloration CDC20 entre 132 CHC archivés et des tissus non tumoraux adjacents (comprenant principalement l’hépatocirrhose et l’hépatite), les scores de coloration CDC20 ont considérablement augmenté dans les échantillons de CHC par rapport aux échantillons péritumoraux (Fig. 4B). De plus, les scores de coloration CDC20 ont été significativement augmentés parallèlement à la progression de la différenciation histologique tumorale à partir de tissus bien différenciés topologiquement (Fig.5).

Corrélation entre l’augmentation de l’expression CDC20 et les paramètres clinicopathologiques du CHC

La relation entre l’expression de la protéine CDC20 et les caractéristiques clinicopathologiques de 132 patients atteints de CHC a été analysée plus avant. Comme résumé dans le tableau I, l’expression du CDC20 était significativement associée au sexe (P = 0,013), à la différenciation tumorale (P = 0,000), au stade TNM (P = 0,012), à l’expression P53 et Ki-67 (P = 0,023 et P = 0,007, respectivement). Cependant, une association nostatistiquement significative a été trouvée entre une expression CDC20 élevée et d’autres caractéristiques clinicopathologiques, notamment l’âge, la taille de la tumeur, l’infection par le VHB, le taux sérique d’AFP, la cirrhose hépatique, l’invasion vasculaire et les métastases intra / extra hépatiques. L’analyse de la corrélation de Spearm a révélé que l’expression élevée de CDC20 était étroitement liée au sexe (R = 0,215, P = 0,013), une différenciation tumorale plus pauvre (R = 0,421, P < 0,001), une stadification TNM avancée (R = 0,218, P = 0,012), un niveau d’expression plus élevé de p53 (R = 0,212, P = 0,014) et Ki-67 (R = 0,235, P = 0,007) (Tableau II). Pris ensemble, ces résultats ont indiqué que le CDC20 était fortement exprimé dans les tissus du CHC et que son expression était étroitement corrélée à la différenciation et à la progression du CHC.

Suppression de l’expression de CDC20 par l’ARNNA

La PCR quantitative en temps réel a révélé une suppression de 90% du niveau transcriptionnel de CDC20 à 48 h après la transfection avec siCDC20, en comparaison avec cellules ou cellules transfectées avec un ARNsi témoin négatif (Fig. 6A) (P< 0.0001). L’analyse par western blot a également montré une suppression évidente du niveau de protéine CDC2048 h après transfection avec siCDC20 (Fig. 6B). L’expression altérée de la protéine inhibiteur de kinase 1A (p21) dépendante de la cycline a également été examinée par analyse western blot, et les résultats ont montré que le taux de protéine P21 était remarquablement régulé à la hausse en raison de la suppression de CDC20 (Fig. 6B).

L’effet de la suppression du CDC20 sur la prolifération cellulaire et le cycle cellulaire

Le test de prolifération cellulaire a révélé que la croissance cellulaire des cellules transfectées par l’ARNsi CDC20 était remarquablement inhibée par rapport aux cellules transfectées par l’ARNsi témoin négatif (Fig. 6C). On s’attendait à ce que l’inhibition de la prolifération cellulaire par le siCDC20 s’accompagne de la plus forte métaphase du cycle cellulaire. Par test de cytométrie en flux, un nombre accru de cellules dans la phase G2/M a été observé dans les cellules transfectées SICDC20 par rapport aux cellules transfectées avec un siRNA à contrôle négatif (Fig. 6D). Ces données ont indiqué que la suppression du CDC20 inhibait la croissance cellulaire en induisant l’arrêt de phase G2/M.

Discussion

Grâce à l’analyse bioinformatique d’un ensemble de microarraydataset de la base de données GEO, nous avons identifié CDC20 qui était le principal nœud dans les réseaux d’interaction moléculaire HCC, il était lié au point de contrôle de l’assemblage de l’anneau (SAC) dans le cycle cellulaire. Lors de l’origine tumorale, des défauts ou une perturbation du point de contrôle de l’assemblage de la broche ont été considérés comme responsables de l’augmentation du taux d’aneuploïdisation (26). Mondalet al ont rapporté que CDC20 est surexprimé dans les tumeurs primitives de la tête et du cou et dans plusieurs lignées cellulaires de carcinome épidermoïde oral (OSCC). Un niveau élevé d’expression de CDC20 dans les cellules OSCC est associé à une promotion prématurée de l’anaphase, conduisant à des anomalies mitotiques (27). Des études ont également révélé qu’une expression élevée de CDC20 est détectée dans le carcinome à cellules orales et les tissus cancéreux colorectaux et que sa surexpression peut prédire un mauvais pronostic pour les patients (28,29).

CDC20 est également nécessaire pour que les cellules d’anaphase tardive sortent de la mitose (30). La ciblecdc20 entraîne le blocage de la sortie de la mitose, ce qui peut être une meilleure stratégie thérapeutique anticancéreuse pour tuer les cellules cancéreuses de manière plus efficace que les médicaments perturbateurs du fuseau (31). Wang et al ont rapporté que le CDC20, qui peut fonctionner comme une oncoprotéine pour favoriser la progression et le développement des cancers humains, représente une cible thérapeutique prometteuse (32). Bien que le rôle de CDC20 dans la tumorigenèse et le pronostic de plusieurs cancéreux humains ait été profondément étudié et confirmé, des études limitées ont étudié la fonction potentielle de CDC20 dans l’initiation et la progression du carcinome hépatocellulaire.

Dans cette étude, nous avons évalué le niveau d’expression de CDC20 dans 16 tissus HCC frais congelés appariés et des échantillons non tumoraux correspondants. Les résultats ont indiqué que le taux moyen d’ARNm et de protéines de CDC20 dans les tissus du CHC était beaucoup plus élevé que dans les tissus non tumoraux appariés. L’immunohistochimie a été utilisée pour étudier la localisation subcellulaire du CDC20 et sa relation avec les paramètres pathologiques cliniques du CHC patients.By en utilisant le test χ2, nous avons constaté qu’un niveau d’expression protéique CDC20 plus élevé était associé au sexe, à la différenciation tumorale, au stade TNM, à l’expression de P53 et de Ki-67. Pour étudier la fonction biologique potentielle et le mécanisme moléculaire du CDC20 dans le CHC, nous avons conçu un ARN interférent double brin (siRNA) ciblant le CDC20 pour interférer avec son niveau d’expression dans la lignée cellulaire HepG2. Par essai de prolifération cellulaire et test FACS, nous avons constaté que les cellules transfectées avec des oligonucléotides siCDC20 présentaient une vitesse de croissance réduite et une proportion accrue de cellules au stade G2 / M.

Le knockdown spécifique de CDC20 par le siRNA a montré un effet inhibiteur contre la prolifération des cellules cancéreuses du foie invitro, ce qui indique que la surexpression de CDC20 pourrait accélérer la prolifération cellulaire et favoriser l’initiation tumorale et la progression du CHC. Les cellules cancéreuses du foie dont l’expression de CDC20 est stimulée ont été induites à s’accumuler en phase inG2/M, ce qui peut être responsable de l’inhibition de la croissance cellulaire. L’inhibiteur de kinase cycline-dépendante 1A (p21), connu pour participer au point de contrôle G2 / M (33), s’est avéré être régulé à la hausse lorsque l’expression de CDC20 a été spécifiquement supprimée dans les cellules cancéreuses du foie. P21 peut inhiber l’activité des CDK conduisant à l’accumulation de la protéine suppresseur de tumeur Rb non phosphorylée, qui inhibe l’activation transcriptionnelle de l’E2F et évite par la suite l’entrée des cellules dans la phase S du cycle cellulaire (34).

En conclusion, il s’agit de la première étude visant àexaminer l’expression du CDC20 dans les tissus et les lignées cellulaires du CHC, fournissant un nouvel accent sur le fait que le CDC20 peut être un indicateur cliniquement pertinent et une cible thérapeutique prometteuse du CHC. Néanmoins, d’autres études axées sur les mécanismes moléculaires du CDC20 dans l’initiation et la progression du CHC et des recherches sur la signification pronostique du CDC20 sont nécessaires.

Remerciements

Les auteurs remercient leurs collègues de l’Institut de Biotechnologie de l’Académie des Sciences de Médecine Militaire pour leur soutien technique.

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