Au cours de leur vieillissement in vivo, les globules rouges (RBC) augmentent en densité et deviennent plus petits. Les sous-populations de RBC définies par âge sont généralement collectées par centrifugation. Un fractionnement selon le volume de RBC a été proposé comme alternative améliorée à une telle séparation par âge. Étant donné que quelques données rapportées dans la littérature indiquent certaines divergences entre les deux méthodes, les échantillons de sang ont été séparés soit par centrifugation, soit par centrifugation à contre-courant, et certaines caractéristiques du RBC ainsi fractionné ont été étudiées. Les activités enzymatiques diminuent soit lorsque la densité augmente, soit lorsque le volume (MCV) diminue. Cependant, la comparaison d’autres caractéristiques de RBC suggère fortement que ces deux procédures ne conduisent pas à la collecte des mêmes sous-populations de RBC: par exemple, la teneur en hémoglobine augmente lorsque le MCV augmente, alors qu’elle reste constante quelle que soit la densité de RBC. Avec les cellules radiomarquées, il est démontré 1) que les globules rouges les plus denses sont récupérés dans toutes les sous‐populations de globules rouges séparées par la taille, même s’ils ont tendance à se concentrer dans les fractions ayant la plus grande MCV, et 2) que les globules rouges les plus petits sont presque équitablement répartis dans toutes les sous‐populations de globules rouges, quelle que soit leur densité, alors que les globules rouges les plus gros sont principalement, mais pas exclusivement, présents dans les fractions de densité élevée. Ainsi, le fractionnement en fonction de la taille ne correspond pas à la séparation en fonction de la densité. Combinées aux résultats d’expériences in vivo menées chez la souris et au fait que les réticulocytes sont présents dans toutes les fractions séparées par la taille, ces données suggèrent que la centrifugation à contre‐courant peut être une procédure très discutable pour obtenir un fractionnement de RBC en fonction de l’âge et donc que le volume de RBC pourrait ne pas être un critère fiable de l’âge de RBC.