Contexte & objectifs: La maladie cœliaque pourrait être traitée et potentiellement guérie en restaurant la tolérance des lymphocytes T à la gliadine. Nous avons étudié la sécurité et l’efficacité des nanoparticules de poly (lactide-co-glycolide) chargées négativement à 500 nm encapsulant la protéine gliadine (TIMP-GLIA) dans 3 modèles murins de maladie coeliaque. Il a été démontré que l’absorption de ces nanoparticules par les cellules présentatrices d’antigènes induisait une tolérance immunitaire chez d’autres modèles animaux de maladies auto-immunes.
Méthodes: Nous avons effectué des études avec des souris C57BL/6; RAG1-/- (C57BL/6); et HLA-DQ8, huCD4 souris NOD Ab0 transgéniques. Des souris ont reçu 1 ou 2 injections de TIMP-GLIA ou de nanoparticules témoins dans la veine de la queue. Certaines souris ont reçu des injections intradermiques de gliadine dans l’adjuvant complet de Freund (immunisation) ou de gliadine ou d’ovalbumine soluble (défi de l’oreille). Des souris RAG-/-ont reçu des injections intrapéritonéales de lymphocytes T CD4 + CD62L-CD44hi de souris C57BL/6 immunisées à la gliadine et ont été nourries avec un régime à base d’AIN-76A contenant du gluten de blé (défi oral) ou sans gluten. Les cellules de la rate ou des ganglions lymphatiques ont été analysées dans des essais de prolifération et de sécrétion de cytokines ou par cytométrie en flux, séquençage de l’ARN ou réaction quantitative en chaîne par polymérase en temps réel. Des échantillons de sérum ont été analysés par dosage immuno-enzymatique des anticorps anti-gliadine, et les tissus intestinaux ont été analysés par histologie. Les cellules mononucléées du sang périphérique humain, ou cellules dendritiques immatures dérivées de cellules mononucléées du sang périphérique humain, ont été cultivées dans un milieu contenant de la TIMP-GLIE, un anticorps anti-CD3 ou un lipopolysaccharide (témoins) et analysées dans des tests de prolifération et de sécrétion de cytokines ou par cytométrie en flux. Le sang total ou le plasma de volontaires sains a été incubé avec TIMP-GLIA, et l’hémolyse, l’activation et l’agrégation plaquettaires et l’activation ou la coagulation du complément ont été analysées.
Résultats: TIMP-GLIA n’a pas augmenté les marqueurs de maturation sur les cellules dendritiques humaines en culture ni induit l’activation des cellules T chez les patients atteints de maladie cœliaque active ou traitée. Dans les modèles d’hypersensibilité de type retardé (modèle 1), les modèles transgéniques HLA-DQ8 (modèle 2) et d’entéropathie à cellules T à mémoire de gliadine (modèle 3) de la maladie coeliaque, les injections intraveineuses de TIMP-GLIA ont considérablement diminué la prolifération des cellules T spécifiques à la gliadine (dans les modèles 1 et 2), la sécrétion inflammatoire de cytokines (dans les modèles 1, 2 et 3), les IgG / IgG2c spécifiques à la gliadine circulante (dans les modèles 1 et 2), le gonflement de l’oreille (dans le modèle 1), le gluten- entéropathie dépendante (dans le modèle 3) et perte de poids corporel (dans le modèle 3). Dans le modèle 1, les effets étaient dépendants de la dose. Les splénocytes de souris transgéniques HLA-DQ8 ayant reçu des nanoparticules TIMP-GLIA, mais pas des nanoparticules témoins, présentaient des niveaux accrus de signatures d’expression de FOXP3 et de gènes associés à l’induction de la tolérance.
Conclusions: Chez des souris sensibles à la gliadine, l’injection de nanoparticules TIMP-GLIA a induit une absence de réaction à la gliadine et réduit les marqueurs d’inflammation et d’entéropathie. Cette stratégie pourrait être développée pour le traitement de la maladie cœliaque.
