InVivoMAb anti-mouse CSF1R (CD115) (Clone: AFS98)

Bauche, D., et al. (2018). « LAG3(+) Regulatory T Cells Restrain Interleukin-23-Producing CX3CR1(+) Gut-Resident Macrophages during Group 3 Innate Lymphoid Cell-Driven Colitis. » Immunity 49(2): 342-352 e345. PubMed

Interleukin-22 (IL-22)-producing group 3 innate lymphoid cells (ILC3) maintains gut homeostasis but can also promote inflammatory bowel disease (IBD). The regulation of ILC3-dependent colitis remains to be elucidated. Nous montrons ici que les lymphocytes T régulateurs Foxp3 (+) (cellules Treg) ont empêché la colite médiée par l’ILC3 d’une manière indépendante de l’IL-10. Les cellules Treg ont inhibé la production d’IL-23 et d’IL-1beta à partir de macrophages CX3CR1 (+) résidents de l’intestin, mais pas de cellules dendritiques CD103 (+). De plus, les cellules Treg ont limité la production d’ILC3 d’IL-22 par la suppression de la production de macrophages CX3CR1 (+) d’IL-23 et d’IL-1beta. Cette suppression était dépendante du contact et était médiée par le gène d’activation latente-3 (LAG-3) – un récepteur de point de contrôle immunitaire – exprimé sur les cellules Treg. L’engagement du LAG-3 sur le CMH de classe II a entraîné une immunosuppression profonde des macrophages résidents des tissus CX3CR1 (+). Notre étude révèle que la santé de la muqueuse intestinale est maintenue par un axe entraîné par la communication des cellules Treg avec les macrophages résidents qui retiennent les stimuli inflammatoires nécessaires à la fonction de l’ILC3.

Gordon, S. R., et coll. (2017).  » L’expression de PD-1 par les macrophages associés aux tumeurs inhibe la phagocytose et l’immunité tumorale. »Nature 545 (7655): 495-499. PubMed

La protéine de mort cellulaire programmée 1 (PD-1) est un récepteur de point de contrôle immunitaire régulé à la hausse sur les lymphocytes T activés pour l’induction de la tolérance immunitaire. Les cellules tumorales surexpriment fréquemment le ligand de PD-1, le ligand de mort cellulaire programmée 1 (PD-L1), facilitant leur fuite du système immunitaire. Les anticorps monoclonaux qui bloquent l’interaction entre PD-1 et PD-L1, en se liant au ligand ou au récepteur, ont montré une efficacité clinique notable chez des patients atteints de divers cancers, notamment le mélanome, le cancer colorectal, le cancer du poumon non à petites cellules et le lymphome de Hodgkin. Bien qu’il soit bien établi que le blocage de PD-1-PD-L1 active les lymphocytes T, on en sait peu sur le rôle que cette voie peut avoir dans les macrophages associés aux tumeurs (TAM). Nous montrons ici que les TAMs de souris et d’humains expriment PD-1. L’expression de TAM PD-1 augmente avec le temps dans les modèles murins de cancer et avec l’augmentation du stade de la maladie dans les cancers humains primaires. L’expression de la TAM PD-1 est corrélée négativement avec la puissance phagocytaire contre les cellules tumorales, et le blocage de la PD-1-PD-L1 in vivo augmente la phagocytose des macrophages, réduit la croissance tumorale et allonge la survie des souris dans les modèles murins de cancer d’une manière dépendante des macrophages. Cela suggère que les thérapies PD-1-PD-L1 peuvent également avoir un effet direct sur les macrophages, avec des implications substantielles pour le traitement du cancer avec ces agents.

Moynihan, K. D., et al. (2016). « Éradication de grandes tumeurs établies chez la souris par immunothérapie combinée qui engage des réponses immunitaires innées et adaptatives. » Nat Med. doi: 10.1038/nm.4200. Le blocage du point de contrôle PubMed avec des anticorps spécifiques de la protéine associée aux lymphocytes T cytotoxiques (CTLA)-4 ou de la mort cellulaire programmée 1 (PDCD1; également connue sous le nom de PD-1) provoque une régression tumorale durable dans le cancer métastatique, mais ces réponses spectaculaires sont limitées à une minorité de patients. Ce résultat sous-optimal est probablement dû en partie au réseau complexe de voies immunosuppressives présentes dans les tumeurs avancées, qui ne seront probablement pas surmontées par une intervention à un seul point de contrôle de signalisation. Nous décrivons ici une immunothérapie combinée qui recrute une variété de cellules immunitaires innées et adaptatives pour éliminer de grandes charges tumorales dans des modèles de tumeurs syngéniques et un modèle de mélanome de souris génétiquement modifié; à notre connaissance, les tumeurs de cette taille n’ont pas été guérissables auparavant par des traitements reposant sur l’immunité endogène. L’efficacité antitumorale maximale nécessitait quatre composants: un anticorps ciblant les antigènes tumoraux, une interleukine-2 recombinante à demi-vie prolongée, un anti-PD-1 et un puissant vaccin contre les lymphocytes T. Des expériences d’épuisement ont révélé que les lymphocytes T CD8+, les cellules dendritiques à présentation croisée et plusieurs autres sous-ensembles de cellules immunitaires innées étaient nécessaires à la régression tumorale. Un traitement efficace a induit l’infiltration de cellules immunitaires et la production de cytokines inflammatoires dans la tumeur, a amélioré l’absorption d’antigène tumoral médiée par les anticorps et a favorisé la propagation de l’antigène. Ces résultats démontrent la capacité d’une réponse immunitaire endogène déclenchée à détruire de grandes tumeurs établies et à élucider les caractéristiques essentielles des immunothérapies combinées capables de guérir une majorité de tumeurs dans des contextes expérimentaux généralement considérés comme intraitables.

Arnold, C.I., et coll. (2015). « Les monocytes / macrophages CD11c favorisent une inflammation intestinale chronique induite par Helicobacter hepaticus par la production d’IL-23. »Immunol muqueux. doi: 10.1038/mi.2015.65. PubMed

Dans les maladies inflammatoires de l’intestin, une dégradation des interactions microbiennes de l’hôte accompagne l’activation soutenue des cellules immunitaires dans l’intestin. Des études fonctionnelles suggèrent un rôle clé de l’interleukine-23 (IL-23) dans l’orchestration de l’inflammation intestinale. L’IL-23 peut être produite par divers phagocytes mononucléaires (MNP) après une stimulation microbienne aiguë, mais on sait peu de choses sur les principales sources cellulaires d’IL-23 qui entraînent une inflammation intestinale chronique. Ici, nous avons abordé cette question en utilisant un modèle physiologique de colite causée par des bactéries. En combinant l’ablation conditionnelle des gènes et le profilage de l’expression des gènes, nous avons constaté que la production d’IL-23 par les MNP CD11c + était essentielle pour déclencher l’immunopathologie intestinale et avons identifié les monocytes et macrophages MHCII + comme la principale source d’IL-23. L’expression de l’IL-23 par les monocytes a été acquise lors de leur différenciation dans l’intestin et corrélée à l’expression du complexe majeur d’histocompatibilité de classe II (MHCII) et du CD64. En revanche, les cellules dendritiques CD103 + CD11b dépendantes de Batf3 étaient dispensables pour la colite induite par les bactéries dans ce modèle. Ces études renforcent le rôle pathogène des monocytes dans les réponses dérégulées aux bactéries intestinales et identifient la production d’IL-23 comme un élément clé de cette réponse. Une meilleure compréhension des sources fonctionnelles de l’IL-23 dans diverses formes d’inflammation intestinale peut conduire à de nouvelles stratégies thérapeutiques visant à interrompre la pathologie immunitaire entraînée par l’IL-23.Immunologie des muqueuses publication en ligne 5 août 2015. doi: 10.1038/ mi.2015.65.

Conde, P., et coll. (2015). « Les macrophages du SIGNE DC (+) Contrôlent l’Induction de la tolérance à la transplantation. »Immunité 42(6): 1143-1158. Les cellules effectrices tissulaires de la lignée monocytaire PubMed

peuvent se différencier en différents types cellulaires avec une fonction cellulaire spécifique en fonction de leur environnement. Le phénotype, les exigences de développement et les mécanismes fonctionnels des macrophages immunoprotecteurs qui médient l’induction de la tolérance à la transplantation restent insaisissables. Ici, nous démontrons que le blocage costimulateur favorisait l’accumulation de macrophages exprimant le SIGNE DC qui inhibaient l’immunité des lymphocytes T CD8 (+) et favorisaient l’expansion des cellules Treg CD4 (+) Foxp3 (+) en nombre. Mécaniquement, cet engagement simultané du SIGNE DC par les ligands fucosylés et la signalisation TLR4 était nécessaire pour la production d’IL-10 immunorégulatrice associée à une survie prolongée de l’allogreffe. La suppression des macrophages exprimant le SIGNE DC in vivo, interférant avec leur développement dépendant du CSF1, ou empêchant la voie de signalisation du SIGNE DC a abrogé la tolérance. Ensemble, les résultats fournissent de nouvelles informations sur les effets tolérogènes du blocage costimulateur et identifient les macrophages suppressifs du SIGNE DC (+) comme médiateurs cruciaux de la tolérance immunologique avec les implications thérapeutiques concomitantes en clinique.

Kaminsky, L. W., et al. (2015). « Une Fonction Redondante des Cellules Plasmacytoïdes et Dendritiques Conventionnelles Est Nécessaire Pour Survivre À une Infection Virale Naturelle. »J Virol 89 (19): 9974-9985. Les virus PubMed qui se propagent de manière systémique à partir d’un site périphérique d’infection provoquent une morbidité et une mortalité dans la population humaine. Les cellules myéloïdes innées, y compris les monocytes, les macrophages, les cellules dendritiques dérivées de monocytes (mo-DC) et les cellules dendritiques (DC), réagissent tôt pendant l’infection virale pour contrôler la réplication virale, réduisant ainsi la propagation du virus à partir du site périphérique. Le virus Ectromelia (ECTV), un orthopoxvirus qui infecte naturellement la souris, se propage de manière systémique à partir du site périphérique de l’infection et entraîne la mort des souris sensibles. Bien que les cellules phagocytaires jouent un rôle essentiel dans la réponse à l’ECTV, l’exigence de populations individuelles de cellules myéloïdes lors des réponses immunitaires aiguës à une infection virale périphérique n’est pas claire. Dans cette étude, diverses méthodes d’épuisement spécifiques aux myéloïdes ont été utilisées pour disséquer les rôles des sous-ensembles de cellules myéloïdes individuelles dans la survie de l’infection par ECTV. Nous avons montré que les DC sont les principaux producteurs d’interférons de type I (T1-IFN), cytokines nécessaires à la survie, après une infection par ECTV. La DC, mais pas les macrophages, les monocytes ou les granulocytes, étaient nécessaires pour contrôler le virus et la survie des souris après une infection par ECTV. La déplétion du DC plasmacytoïde (pDC) seul ou du sous-ensemble de DC résident lymphoïde (CD8alpha (+) DC) seul n’a pas conféré de sensibilité létale à l’ECTV. Cependant, la fonction d’au moins un des sous-ensembles pDC ou CD8alpha (+) DC est requise pour la survie de l’infection à ECTV, car les souris appauvries des deux populations étaient sensibles au défi ECTV. La présence d’au moins un de ces sous-ensembles DC est suffisante pour la production de cytokines qui réduit la réplication de l’ECTV et la propagation du virus, facilitant la survie après l’infection. IMPORTANCE: Avant l’éradication du virus de la variole, l’orthopoxvirus responsable de la variole, un tiers des personnes infectées ont succombé à la maladie. Après l’éradication réussie de la variole, les taux de vaccination avec le vaccin contre la variole ont considérablement diminué. Il y a maintenant une incidence croissante d’infections à orthopoxvirus zoonotiques pour lesquelles il n’existe aucun traitement efficace. De plus, l’innocuité du vaccin contre la variole est très préoccupante, car des complications peuvent survenir, entraînant une morbidité. Comme de nombreux virus responsables de maladies humaines importantes, les orthopoxvirus se propagent à partir d’un site d’infection périphérique pour devenir systémiques. Cette étude élucide la nécessité précoce de cellules immunitaires innées pour contrôler une infection périphérique par ECTV, l’agent causal de la fièvre aphteuse. Nous rapportons qu’il existe une redondance dans la fonction de deux sous-ensembles de cellules immunitaires innées dans le contrôle de la propagation du virus au début de l’infection. Le contrôle viral médié par ces sous-ensembles cellulaires constitue une cible potentielle pour les thérapies et la conception rationnelle des vaccins.

Naik, S., et al. (2015). « L’interaction commensale-dendritique-cellule spécifie une signature immunitaire protectrice unique de la peau. » Nature 520 (7545): 104-108. PubMed

La peau représente l’interface principale entre l’hôte et l’environnement. Cet organe abrite également des milliards de microorganismes qui jouent un rôle important dans l’homéostasie tissulaire et l’immunité locale. Les communautés microbiennes cutanées sont très diverses et peuvent être remodelées au fil du temps ou en réponse à des défis environnementaux. Comment, dans le contexte de cette complexité, des microorganismes commensaux individuels peuvent moduler de manière différentielle l’immunité cutanée et les conséquences de ces réponses sur la physiologie tissulaire restent floues. Nous montrons ici que les commensaux définis affectent principalement l’immunité cutanée et identifient les médiateurs cellulaires impliqués dans cette spécification. En particulier, la colonisation par Staphylococcus epidermidis induit des lymphocytes T IL-17A (+) CD8 (+) qui abritent l’épiderme, renforcent l’immunité barrière innée et limitent l’invasion des agents pathogènes. Les réponses des cellules T spécifiques aux commensaux résultent de l’action coordonnée des sous-ensembles de cellules dendritiques résidentes de la peau et ne sont pas associées à une inflammation, révélant que les cellules résidentes des tissus sont prêtes à détecter et à réagir aux altérations des communautés microbiennes. Cette interaction peut représenter un moyen évolutif par lequel le système immunitaire cutané utilise des signaux commensaux fluctuants pour calibrer l’immunité barrière et fournir une protection hétérologue contre les agents pathogènes invasifs. Ces résultats révèlent que le paysage immunitaire cutané est un environnement très dynamique qui peut être rapidement et spécifiquement remodelé par des rencontres avec des commensaux définis, des découvertes qui ont des implications profondes pour notre compréhension de l’immunité et des pathologies spécifiques aux tissus.

Sheng, K. C., et al. (2014). « IL-3 et CSF-1 interagissent pour favoriser la génération de macrophages producteurs de CD11c + IL-10. » PLoS One 9(4): e95208. PubMed

Démêler les mécanismes de l’hématopoïèse régulés par de multiples cytokines reste un défi en hématologie. L’IL-3 est une cytokine allergique au potentiel de multi-lignage, tandis que le LCR-1 est produit à l’état d’équilibre avec une couverture de lignée restreinte. Ici, nous avons découvert un rôle instructif du LCR-1 dans l’hématopoïèse médiée par l’IL-3. Le LCR-1 a favorisé de manière significative l’expansion cellulaire CD11c + entraînée par l’IL-3 et a amorti la génération de basophiles et de mastocytes à partir de la moelle osseuse C57BL / 6. D’autres études ont indiqué que l’axe CSF-1/CSF-1R a contribué de manière significative à la génération de cellules CD11c+ induite par l’IL-3 en améliorant la monopoïèse associée au c-Fos. Les cellules CD11c+ induites par l’IL-3 ou l’IL-3/CSF-1 étaient compétentes dans la maturation cellulaire et l’endocytose. Les cellules IL-3 et IL-3/CSF-1 n’avaient pas l’aspect classique des cellules dendritiques et ressemblaient à des macrophages en morphologie. Les deux populations ont produit un taux élevé d’IL-10, en plus de l’IL-1, de l’IL-6 et du TNFalpha, en réponse au LPS, et étaient des stimulateurs de cellules T relativement pauvres. Collectivement, ces résultats révèlent un rôle du LCR-1 dans la médiation de la voie hématopoïétique de l’IL-3 par monopoïèse, qui régule l’expansion des macrophages CD11c +.

Greter, M., et al. (2012). « Le GM-CSF contrôle l’homéostasie des cellules dendritiques du tissu non lymphoïde, mais est dispensable pour la différenciation des cellules dendritiques inflammatoires. »Immunité 36(6): 1031-1046. PubMed

Le GM-CSF (Csf-2) est une cytokine essentielle pour la génération in vitro de cellules dendritiques (CD) et on pense qu’il contrôle le développement de CD inflammatoires et de CD103 (+) résidents dans certains tissus. Nous avons montré ici que, contrairement à la compréhension actuelle, le récepteur du Lcr-2 agit à l’état d’équilibre pour favoriser la survie et l’homéostasie des CD103 (+) et CD11b (+) résidents des tissus non lymphoïdes. L’absence de récepteur du Lcr-2 sur les CD pulmonaires a annulé l’induction de l’immunité des lymphocytes T CD8 (+) après l’immunisation avec des antigènes particulaires. En revanche, le récepteur du Lcr-2 était dispensable pour la différenciation et la fonction innée des CD inflammatoires lors de lésions aiguës. Au lieu de cela, les CD inflammatoires nécessitaient un récepteur Csf-1 pour leur développement. Ainsi, le Lcr-2 est important dans l’immunité des lymphocytes T CD8 (+) induite par le vaccin par la régulation de l’homéostasie du DC des tissus non lymphoïdes plutôt que par le contrôle des CD inflammatoires in vivo.

Li, W., et al. (2012). « Imagerie intravitale à 2 photons du trafic de leucocytes dans le cœur battant. »J Clin Invest 122 (7): 2499-2508. PubMed

La microscopie intravitale à deux photons a considérablement élargi notre compréhension des différences spécifiques aux tissus et aux organes dans la régulation des réponses inflammatoires. Cependant, on sait peu de choses sur la régulation dynamique du recrutement des leucocytes dans le tissu cardiaque enflammé, en grande partie en raison de difficultés techniques inhérentes à l’imagerie des tissus en mouvement. Ici, nous rapportons une méthode d’imagerie des cœurs de murins battant en utilisant la microscopie intravitale à 2 photons. En utilisant cette méthode, nous avons visualisé le trafic de neutrophiles au début et pendant l’inflammation. Une lésion de reperfusion d’ischémie induite par une transplantation ou une ligature transitoire de l’artère coronaire a entraîné le recrutement de neutrophiles dans le cœur, leur extravasation des veines coronaires et l’infiltration du myocarde où ils ont formé de gros amas. Le greffage de cœurs contenant du mutant ICAM-1, un ligand important pour le recrutement des neutrophiles, a réduit les vitesses de rampement des neutrophiles à l’intérieur des vaisseaux et a nettement inhibé leur extravasation. Une altération similaire a été observée avec l’inhibition de la Mac-1, un récepteur de l’ICAM-1. Le blocage du LFA-1, un autre récepteur de l’ICAM-1, a empêché l’adhésion des neutrophiles à l’endothélium et l’extravasation dans les greffes cardiaques. Comme les réponses inflammatoires dans le cœur sont d’une grande pertinence pour la santé publique, cette approche d’imagerie est prometteuse pour l’étude des mécanismes spécifiques du recrutement des leucocytes dans le cœur et l’identification de nouvelles cibles thérapeutiques pour le traitement des maladies cardiaques.

Tagliani, E., et coll. (2011). « Coordonner la régulation de la dynamique des populations de macrophages tissulaires et de cellules dendritiques par CSF-1. »J Exp Med 208 (9): 1901-1916. PubMed

Les macrophages tissulaires (ISPM) et les cellules dendritiques (SCD) jouent un rôle essentiel dans l’homéostasie tissulaire et l’immunité. La façon dont ces cellules sont maintenues à leurs densités caractéristiques dans différents tissus est restée incertaine. Aidés par une nouvelle technique de cytométrie en flux pour évaluer les taux relatifs de recrutement de précurseurs transmis par le sang, nous avons examiné la dynamique des populations de Mphi et de DC dans l’utérus de souris gravides, où la croissance rapide des tissus a facilité la dissection des mécanismes de régulation sous-jacents. Nous démontrons comment la dynamique des Mphi, et donc les densités tissulaires des Mphi, sont contrôlées localement par le CSF-1, un facteur de croissance pléiotrope dont le niveau d’activité in situ variait largement entre les couches tissulaires utérines. Le LCR-1 agit en partie en induisant la prolifération des Mphi et en partie en stimulant l’extravasation des monocytes Ly6C (hi) (Mos) qui servent de précurseurs des Mphi. Le recrutement de la Mo dépendait de la production de ligands des récepteurs de la chimiokine CCR2 par les ISPM utérins en réponse au LCR-1. De façon inattendue, une voie parallèle régulée par le LCR-1, mais indépendante du CCR2, a influencé les densités tissulaires utérines en contrôlant les taux locaux d’extravasation pré-DC. Ensemble, ces données fournissent un aperçu cellulaire et moléculaire de la régulation des densités de tissus Mphi dans des conditions non inflammatoires et révèlent un rôle central pour le LCR-1 dans la coordination de l’homéostasie Mphi et DC.

Lim, A. K., et al. (2009). « Le blocage des anticorps du c-fms supprime la progression de l’inflammation et des lésions dans la néphropathie diabétique précoce chez les souris obèses db / db. »Diabétologie 52 (8): 1669-1679. PubMed

OBJECTIFS / HYPOTHÈSE: Les lésions rénales médiées par les macrophages jouent un rôle important dans le développement de la néphropathie diabétique. Le facteur stimulant les colonies (LCR)-1 est une cytokine produite dans les reins diabétiques et favorise l’accumulation, l’activation et la survie des macrophages. Le LCR-1 agit exclusivement à travers le récepteur c-fms, qui n’est exprimé que sur les cellules de la lignée monocyte-macrophage. Par conséquent, nous avons utilisé le blocage du c-fms comme stratégie pour cibler sélectivement les lésions médiées par les macrophages au cours de la progression de la néphropathie diabétique. MÉTHODE: Des souris obèses diabétiques de type 2 db/db BL/ KS présentant une albuminurie établie ont été traitées avec un anticorps monoclonal neutralisant anti-c-fms (AFS98) ou une IgG témoin adaptée à l’isotype de 12 à 18 semaines et examinées pour une lésion rénale. RÉSULTATS : Le traitement par AFS98 n’a pas affecté l’obésité, l’hyperglycémie, les taux de monocytes circulants ou l’albuminurie établie chez les souris db/db. Cependant, AFS98 a empêché l’hyperfiltration glomérulaire et supprimé les variables d’inflammation dans le rein diabétique, y compris les macrophages rénaux (accumulation, activation et prolifération), les taux de ligand à motif 2 de la chimiokine CC (ARNm et protéine urinaire), l’activation rénale des voies pro-inflammatoires (kinase amino-terminale c-Jun et facteur de transcription activant 2) et les taux d’ARNm du Tnf-alpha (également connu sous le nom de Tnf). De plus, AFS98 a diminué les dommages tissulaires causés par les macrophages, y compris les lésions tubulaires (apoptose et hypertrophie), les lésions interstitielles (prolifération cellulaire et accumulation de myofibroblastes) et la fibrose rénale (ARNm Tgf-beta1 et Col4a1). CONCLUSIONS / INTERPRÉTATION: Le blocage du c-fms peut supprimer la progression de la néphropathie diabétique établie chez les souris db / db en ciblant les lésions médiées par les macrophages.