Clonage d’ADNc

La transcription inverse de l’ARN en ADN complémentaire (ADNc) est la première étape de nombreux flux de travail en biologie moléculaire, y compris les études d’expression génique utilisant la PCR en temps réel, le clonage de gènes et la création de bibliothèques d’ADNc.

Une bibliothèque d’ADNc est une collection de séquences d’ADN clonées qui sont complémentaires de l’ARNm qui a été extrait d’une cellule ou d’un tissu donné. La bibliothèque ne représente que les séquences transcrites dans un échantillon spécifique et peut fournir une mine d’informations sur l’identité et la fonctionnalité de gènes spécifiques. Les bibliothèques d’ADNc fournissent également des informations sur l’abondance d’ARN produit dans un échantillon, car plus un ARNm est exprimé, plus l’ADNc sera produit.

Lors de la construction de bibliothèques d’ADNc, il est essentiel que les clones d’ADNc soient représentatifs de la population d’ARN d’origine, à la fois en termes de longueur totale et d’abondance relative. Cela signifie que le choix de la transcriptase inverse utilisée dans cette étape est d’une importance critique. Lors du clonage de CDNA et de la création de bibliothèques d’ADNc, nous recommandons notre gamme de produits UltraScript et UltraScript 2.0. Ces enzymes hautement actives et thermostables sont capables de synthétiser un produit d’ADNc plus complet, même avec des quantités limitées d’ARN, d’ARN exprimé en faibles niveaux ou contenant un degré élevé de structure secondaire.