Diskussion
In der aktuellen Studie wollten wir beurteilen, ob CD von Mäusen eine Ausfallrate aufweisen könnte, die zu einem Tierschutzproblem führte. Wir verwendeten die Zeit bis zum Atemstillstand als Ersatzmarker für das AVMA-Kriterium „Zeit, die erforderlich ist, um einen Bewusstseinsverlust auszulösen.“1 Wir erkannten, dass eine saubere Durchtrennung der hohen Halswirbelsäule über C2 einen Atemstillstand ohne Bewusstlosigkeit auslösen kann, aber das grobe Trauma der verschiedenen CD-Methoden schien unwahrscheinlich, dass dies zu diesem Ergebnis führte.
Wir setzen die Zeit bis zum Atemstillstand gleich 0 s als Grenzwert für die Definition einer erfolgreichen Euthanasie. Wir glauben, dass jede Euthanasie-Methode, nach der Mäuse weiter atmen können (unabhängig davon, wie lange), Vorsicht erfordert. Wenn an nicht betäubten Mäusen durchgeführt, Unvollständige Euthanasie hinterlässt eine potenziell bewusste Maus, die eine schwere traumatische Verletzung erleidet, bis ein Bediener das Verfahren wiederholen oder zu einer anderen Euthanasie-Methode wechseln kann. Eine vollständige Durchtrennung des mittelthorakalen ZNS kann den kaudalen Körper schmerzfrei lassen, aber verletztes Gewebe, das die Läsion umgibt und kranial ist, kann immer noch schmerzhaft sein.17,25 Tiere, die eine ausreichende motorische Innervation haben, um die Atmung fortzusetzen, hätten wahrscheinlich eine ausreichende afferente Innervation, damit Schmerzen auftreten können.In unserer Pilotarbeit atmeten einige Mäuse bis zu 15 Minuten weiter, bevor wir sie mit Natriumpentobarbital einschläferten; Diese Mäuse hätten wahrscheinlich noch länger atmen können. Wären sie aus der Narkose genommen worden und hätten das Bewusstsein wiedererlangt, mit mehreren Wirbelsäulenverletzungen, Ihr Leiden hätte schwerwiegend sein können. Selbst als Ergänzung zu inhalativen oder injizierbaren Euthanasie-Mitteln, würde sich eine Maus (möglicherweise in einem Kadaver-Gefrierschrank) von einer schlecht durchgeführten Dislokationstechnik erholen, würde das Potenzial für Schmerzen oder Leiden verstärkt. Es ist wichtig, dass jede Methode der CD die Anforderung erfüllt, dass im Wesentlichen 100% der Tiere sofort aufhören zu atmen.Unser 21% erfolgloser Prozentsatz für CD-Methoden, basierend auf der Zeit bis zum Atemstillstand, war ähnlich dem erfolglosen Prozentsatz in Berichten von Mäusen, die CD unterzogen wurden, aber keine radiologisch offensichtlichen Läsionen der Halswirbelsäule hatten.7,14 Die Autoren dieser früheren Studien7,14 geben ihre radiologischen Methoden nicht detailliert an. Da keine Ereignisse erfolgloser Euthanasie berichtet wurden,7,14 Die Autoren haben möglicherweise Mäuse mit zervikalen und thorakalen Läsionen, aber unzureichender Distraktion während der Radiographie als nur thorakale Läsionen missverstanden.
Im Lichte früherer Befunde,7,14 Wir postulierten, dass eine ausreichend starke Spannung, die irgendwo entlang des Rückenmarks angewendet wird, Bewusstlosigkeit und Atemstillstand hervorrufen kann, selbst wenn das Skeletttrauma kaudal zur empfohlenen hoch-zervikalen Region war. Unsere 100% erfolglose Rate für die Thoraxluxationsgruppe unterstützt diese Hypothese nicht. Wir verwendeten Thoraxluxation bei anästhesierten Mäusen, um die falsche Technik zu modellieren, die ein schlecht ausgebildeter Bediener durchführen könnte, und wir haben überprüft, dass die richtige Technik für eine erfolgreiche Euthanasie von Mäusen notwendig ist.
In den AVMA-Richtlinien wurde CD im Allgemeinen ohne spezifische Beschreibung des Verfahrens behandelt, was einen Mangel an vergleichenden Bewertungen verschiedener CD-Techniken widerspiegelt. Verschiedene Veröffentlichungen beschreiben verschiedene Techniken zur Durchführung einer zervikalen Dislokation.8,13,14,16,22 Andere, einschließlich der AVMA-Panel-Berichte, unterscheiden nicht zwischen verschiedenen CD-Techniken.3,10,12,24 Zusätzlich zu den von uns gewählten 3-Methoden haben die Autoren angegeben, dass MCD durch Hochziehen in einem 30 ° -Winkel durchgeführt werden sollte, in der Hoffnung, dass der Odontoid-Prozess des C2-Wirbels das Rückenmark schädigt und dadurch die Wirksamkeit der Technik erhöht.Es ist unwahrscheinlich, dass eine Fraktur dieses kleinen knöchernen Prozesses bei einer Maus radiologisch sichtbar ist. Darüber hinaus beschreiben einige Operateure das Ziehen, bis der Schädel als völlig losgelöst von der Wirbelsäule empfunden wird, und dies ist die Methode, die wir an unserer Einrichtung unterrichten. Diese Praxis ist sinnvoll, wenn CD nach anderen Euthanasietechniken (z. B. Überdosierung von Anästhetika) angewendet wird, aber dieses längere, langsamere Verfahren kann bei einem noch nicht bewusstlosen Tier zusätzliche Schmerzen verursachen.Die postmortale Radiographie könnte eine Rolle bei der Beurteilung des Erfolgs der Sterbehilfe nach dem Ereignis spielen, aber diese Technik ist arbeitsintensiv und muss vorsichtig interpretiert werden. Wir waren besorgt, dass ohne ausreichende Ablenkung intakte Bänder den Schädel nahe genug an der Wirbelsäule halten könnten, um in einigen Fällen eine erfolgreiche Luxation zu maskieren. Wir fanden die postmortalen Röntgenaufnahmen am einfachsten zu interpretieren, wenn Spannung angewendet wurde, um die Karkasse zu dehnen, aber dadurch entstand dann eine verdächtige Lücke zwischen den C2- und C3-Wirbelkörpern, die eine sorgfältige Beurteilung erforderte. Negative CO2-only-Kontrollen (Abbildung 2) waren hilfreich bei der Unterscheidung von Läsionen von normalen. Als wir die Zeit bis zum Atemstillstand als unseren ‚Goldstandard‘ festlegten, trug die zervikale Radiographie einen positiven Vorhersagewert von nur 71%. Wenn die Radiographie als Instrument zur Qualitätskontrolle oder Kompetenzbewertung verwendet wird, werden daher einige Fälle erfolgloser Sterbehilfe übersehen.Während alle erfolglosen Euthanasien thorakale oder lumbale Läsionen (oder beides) aufwiesen, taten dies 50 der 64 erfolgreichen Euthanasien. Wir schließen daraus, dass das Vorhandensein von thorakalen oder lumbalen Läsionen keine Diagnose für eine schlechte Technik ist. Darüber hinaus hatte keines der 11 CD-Tiere, die den 180-s-Endpunkt erreichten, beobachtbare zervikale Läsionen. Im Gegensatz dazu taten dies 63 von 64 erfolgreichen CD-Fällen, und die Maus, der eine beobachtbare zervikale Läsion fehlte (Abbildung 3), könnte eine Fehldiagnose einer subtilen Läsion widerspiegeln oder als Beweis dafür dienen, dass ein ausreichend schweres distales Rückenmarkstrauma einen Atemstillstand verursachen kann; tatsächlich erreichten 2 Mäuse in der Thoraxluxationsgruppe letztendlich einen Atemstillstand, bevor eine andere Technik angewendet werden konnte. Darüber hinaus wurden 6 CD-Mäuse erfolglos eingeschläfert, starben jedoch vor dem 180-s-Endpunkt, obwohl die Radiographie bei 5 dieser Mäuse zervikale Läsionen ergab. Radiologische Fehldiagnosen sind möglich, ebenso wie die Möglichkeit, dass Zwischenverletzungen, obwohl radiologisch offensichtlich, letztendlich tödlich sein können, aber zu lang sind, um das Ergebnis als guten Tod zu qualifizieren.‘
Wir erkennen einige Einschränkungen unserer Studie. Wir haben nicht alle beschriebenen oder möglichen Variationen von CD bei Mäusen durchgeführt. Wir haben keinen Versuch unternommen, Gehirnwellen oder andere Messungen zu verwenden, um die intakte Gehirnfunktion nach Dislokation zu analysieren. Wir haben keine atmenden Tiere aus der Anästhesiemaske entfernt, um das Potenzial für die Rückkehr zum Bewusstsein zu beurteilen. Das Vorhandensein einer Zeit bis zum Atemstillstand, die 0 s überschreitet, deutet zumindest auf eine minimale intakte Gehirnfunktion hin, ein Zustand, der mit einem ‚guten Tod‘ unvereinbar zu sein scheint; Wir präsentieren keine Daten über die Qualität des Todes, wenn die Zeit bis zum Atemstillstand 0 s beträgt.
Der Operatoreffekt, den wir festgestellt haben, erfordert weitere Untersuchungen. Bei nur 2 Bedienern konnte der Effekt nicht auf Unterschiede im Alter, Training, Kraft oder anderen Faktoren des Bedieners zurückgeführt werden. Möglicherweise würden sich andere Betreiber in ihren Erfolgsquoten unterscheiden. Follow-up-Studie, um den Bedienereffekt genauer zu untersuchen, muss das Wissen der verschiedenen Bediener, dass sie bewertet wurden, und die Auswirkungen dieses Wissens auf ihre Leistung berücksichtigen. Dass der erfolgreichere Betreiber in 8,1% der Fälle immer noch nicht erfolgreich war, gibt Anlass zur Sorge.
Darüber hinaus könnte die radiologische Diagnose einem Interpreter-Effekt unterliegen. Ohne einen ‚Goldstandard‘ für die korrekte radiologische Diagnose (zum Beispiel könnte das Fehlen einer sichtbaren Läsion bei einer erfolgreichen Euthanasie bedeuten, dass entweder eine Wirbelsäulenfraktur oder Luxation an dieser Stelle für einen schnellen Tod nicht notwendig ist oder dass der Radiologe die Läsion verpasst hat), Wir könnten die Möglichkeit eines Interpreter-Effekts nicht untersuchen. Pilotarbeit mit Klarfilm-Röntgenaufnahmen ergab bescheidene Meinungsverschiedenheiten in der Diagnose unter mehreren Tierärzten, die die Röntgenaufnahmen lasen.Schließlich wurden alle Mäuse aus humanen Gründen unter Isofluran-Anästhesie disloziert, weil wir wussten, dass wir erfolglose Fälle am Leben erhalten und mehrere Minuten atmen würden, anstatt den Vorgang sofort zu wiederholen. Da das Anästhetikum den Muskeltonus abgeschafft hat, kann diese Methode die postmortale CD besser modellieren als die CD als einzige Methode der Euthanasie. Da es sich um ein Atemdepressivum handelt, kann Isofluran in einigen Zwischenfällen den Atemstillstand beschleunigt haben. Als neuroprotektives Mittel kann Isofluran den Tod verzögert haben. So oder so, Die Verwendung von Isofluran hinderte uns daran, das potenzielle Bewusstsein in den noch atmenden erfolglosen Fällen zu beurteilen, weil wir sie nie von der Betäubung entwöhnt haben, um diese Beurteilung vorzunehmen.
Wir schließen daraus, dass 3 Methoden der CD zu einer erfolglosen Euthanasie führen können, bei der Mäuse nach der versuchten Dislokation weiter atmen. Wir können nicht sagen, ob Bewusstsein oder Schmerzwahrnehmung dieses Ergebnis begleiten. Das Üben an betäubten Mäusen könnte eine nützliche Trainingsmethode sein, wobei die Zeit bis zum Atemstillstand als Maß für den Erfolg des Auszubildenden festgelegt wird. Die Radiographie ist ein arbeitsintensives Instrument zur Beurteilung der Fähigkeiten, das nicht aussagekräftiger zu sein scheint als die Beobachtung der Praxis an anästhesierten Mäusen. Wenn zusätzliche Studien unsere Ergebnisse replizieren, müssen sich die empfohlenen Praktiken ändern, ob CD von nicht betäubten Mäusen verboten, eine CD-Methode mit einer höheren Erfolgsrate identifiziert oder betont werden muss, dass Mäuse nach CD genau beobachtet werden müssen und wenn sie noch atmen (was angesichts der motorischen Entladung, die häufig auf CD folgt, schwer festzustellen ist), sofort durch die gleiche oder eine alternative Methode der Euthanasie behandelt werden.
