TEXT

Chlamydia trachomatis und Neisseria gonorrhoeae sind die weltweit am häufigsten vorkommenden bakteriellen sexuell übertragbaren Infektionen (STI) (1). Der Verlauf dieser Infektionen ist unvorhersehbar und vielfältig (2-7). Die meisten Infektionen bei Frauen sind asymptomatisch und bleiben häufig unerkannt, was das Risiko für Komplikationen im Fortpflanzungstrakt erhöht (6, 8-10). Ein Einblick in die Mechanismen, die die Belastung dieser Infektionen antreiben, ist für die Krankheitskontrolle unerlässlich. Neben Alter, HIV-Infektion und Verhaltensfaktoren können mikrobiologische Merkmale, einschließlich Bakterienlast, eine wichtige Rolle für das Übertragungsrisiko, das klinische Erscheinungsbild und den Infektionsverlauf spielen (6, 11-14). Die Chlamydienlast wurde in Tiermodellen und bei Patienten mit okulärer C. trachomatis-Infektion mit dem klinischen Erscheinungsbild, dem Schweregrad der Infektion und der Übertragbarkeit in Verbindung gebracht (15-17). Es wurde gezeigt, dass sich die Gonorrhoe-Belastungen zwischen den anatomischen Lokalisationen und den damit verbundenen klinischen Darstellungen bei Männern unterscheiden (18). Obwohl Echtzeit-PCR und Quantifizierung der DNA-Belastung das Potenzial haben, neue Erkenntnisse über die Merkmale von Infektionen zu gewinnen, gibt es nur begrenzte Literatur über die Relevanz der Bakterienlast und Häufigkeit gleichzeitiger STI bei Frauen (19, 20). Das Wissen über mikrobiologische Merkmale von Infektionen könnte möglicherweise dazu beitragen, das Verständnis der Unterschiede in der STI-Prävalenz auf Bevölkerungsebene zu verbessern. Diese Studie zielte darauf ab, die gleichzeitige und bakterielle Belastung von genitalen und anorektalen C. trachomatis- und N. gonorrhoeae-Infektionen bei südafrikanischen Frauen in einer Umgebung mit hoher HIV-Prävalenz zu bewerten.Diese Studie war eine Unteranalyse einer zuvor beschriebenen Querschnittsstudie von 604 Frauen im ländlichen Mopani District, Südafrika (21). Kurz gesagt, einwilligende Frauen im Alter von 18 bis 49 Jahren, die in den letzten 6 Monaten sexuelle Aktivitäten gemeldet hatten, waren berechtigt. Fragebögen wurden ausgefüllt und Vaginal-, Anorektal- und Rachenabstriche (Copan Diagnostics, Brescia, Italien) wurden von Mitarbeitern des Gesundheitswesens erhalten und bei -20 ° C gelagert. Symptomatische Frauen wurden am selben Tag nach lokalen Behandlungsprotokollen behandelt, die einen Benachrichtigungszettel für den Partner enthalten. Asymptomatische Frauen mit einer durch molekularen Nachweis nachgewiesenen STI wurden aufgefordert, zur spezifischen Behandlung in die Klinik zurückzukehren. Für die in diesem Artikel vorgestellte Auswertung wurden alle Frauen (n = 263) ausgewählt, die vaginal und / oder anorektal mit mindestens einem der folgenden Erreger infiziert waren: C. trachomatis (n = 107), N. gonorrhoeae (n = 66), Mycoplasma genitalium (n = 66) und Trichomonas vaginalis (n = 116). Da wir nur eine Frau mit einer oropharyngealen Infektion beobachteten, haben wir diesen anatomischen Ort von weiteren Analysen ausgeschlossen. Das Human Ethics Research Committee der University of the Witwatersrand, Südafrika, genehmigte die Studie (Referenz-Nr. M110726), einschließlich des M. genitalium- und T. vaginalis-Tests.

Trockene Tupfer wurden auf Trockeneis transportiert, um Laboranalysen im Labor für Immunogenetik, VU University Medical Center, Amsterdam, Niederlande, durchzuführen. Bakterielle DNA wurde mit einem High Pure PCR Template Preparation Kit (Roche Diagnostics, Indianapolis, IN) extrahiert, gefolgt von Echtzeit-PCR-Nachweis von C. trachomatis, N. gonorrhoeae und T. vaginalis mit einem PrestoPluS CT-NG-TV Assay (Microbiome Ltd., Amsterdam, Niederlande) und ein LightMix Real-time PCR Kit (TIB Molbiol, Berlin, Deutschland) für M. genitalium, wie an anderer Stelle beschrieben (21, 22) (D. J. de Waaij, J. H. Dubbink, R. P. H. Peters, S. Ouburg und S.A. Morré, unveröffentlichte Daten). Die bakterielle DNA-Belastung von C. trachomatis und N. gonorrhoeae wurde wie folgt berechnet. Der Cp (Crossing-Point)-Wert, d.h. die Anzahl der Amplifikationszyklen vor Erreichen einer normierten Schwelle, wurde auf eine Kalibrierkurve einer bekannten C. trachomatis DNA-Menge und N bezogen. gonorrhoeae DNA-Menge zur Bestimmung der Menge an bakterieller DNA. In unserer Analyse wird die Bakterienlast als Logarithmus der Anzahl der einschlussbildenden Einheiten (IFU) pro Nanoliter für C. trachomatis und als Logarithmus der Anzahl der Kopien pro Mikroliter für N. gonorrhoeae angegeben. Statistische Analysen wurden unter Verwendung des Chi-Quadrat-Tests oder des exakten Fisher-Tests und des Mann-Whitney-U-Tests durchgeführt, um dichotome und kontinuierliche Variablen zwischen Gruppen zu vergleichen. Ein P-Wert von weniger als 0,05 wurde für alle Tests als statistisch signifikant angesehen.Von den 263 Frauen mit einer genitalen und / oder anorektalen STI hatten 247 (94%) eine genitale STI und 73 (27%) eine anorektale STI. Das Durchschnittsalter aller Frauen (n = 263) betrug 29 (Bereich 18 bis 49) Jahre und eine HIV-Infektion wurde von 33% gemeldet, während 44% angaben, in den letzten 6 Monaten HIV-negativ getestet zu haben, und 24% kannten ihren Status nicht. Fellatio wurde von 13% der Frauen und rezeptiver Analverkehr (RAI) von 5,5% berichtet.

Die Verteilung der genitalen Mikroorganismen ist in Abb. 1. Eine anorektale Infektion wurde bei 64 (88%) / 73 Frauen durch einen einzigen Mikroorganismus verursacht: C. trachomatis in 34/43, N. gonorrhoeae in 9/15, M. genitalium in 16/17 und T. vaginalis in 5/7. Einzelinfektionen traten signifikant häufiger an der anorektalen als an der genitalen Stelle auf (88% versus 74%, P = 0,013). Unter den 107 Frauen mit einer C. trachomatis-Infektion hatten 32 (30%) Frauen eine Doppelinfektion (kombinierte genitale und rektale Infektion). Unter den 66 Frauen mit einer N. gonorrhoeae-Infektion hatten 9 (14%) Frauen eine Doppelinfektion. Innerhalb der 66 und 116 Frauen mit einer M. genitalium-Infektion und einer T. vaginalis-Infektion hatten 3 (4,5%) bzw. 4 (3,4%) Frauen eine Doppelinfektion.

Die mediane Belastung von genitalem C. trachomatis betrug 2,7 log10 IFU/nl (Bereich 0,36 bis 4,5) und die von anorektalem C. trachomatis betrug 2,5 log10 IFU/ nl (Bereich 0,58 bis 3,6). Für N. gonorrhoeae betrug die mittlere Belastung der Genitalinfektion 2, 7 log10 Kopien / µl (Bereich 1, 6 bis 8, 0) und die der Rektalinfektion 4, 4 log10 Kopien / µl (Bereich 2, 2 bis 6, 3). Merkmale und Assoziationen der genitalen und rektalen Bakterienlast sind in Tabelle 1 dargestellt. In multivariaten Analysen waren ein Alter von ≤24 Jahren (P = 0,009) und eine Schwangerschaft (P = 0,023) unabhängig voneinander mit einer höheren C. trachomatis-Belastung und derselben Altersgruppe (P < 0,0001) assoziiert und hatten in den letzten 6 Monaten mehr als 1 Sexualpartner (P = 0,029) mit einer höheren N. gonorrhoeae-Belastung. Die Assoziation einer gleichzeitigen Beziehung im letzten Jahr mit der N. gonorrhoeae-Belastung zeigte sich in der multivariaten Analyse nicht mehr (P = 0,32).

Dieser Bericht beschreibt die Übereinstimmung von STI und bakterieller DNA-Belastung bei südafrikanischen Frauen mit genitalen und anorektalen Chlamydia trachomatis und Neisseria gonorrhoeae infektion. Es wurden nur wenige Berichte über Studien zu diesen mikrobiologischen Merkmalen der Infektion veröffentlicht, und unseres Wissens ist dies der erste Bericht einer Studie, die in einem ländlichen Umfeld mit hoher HIV-Prävalenz durchgeführt wurde. Wir beobachteten, dass fast die Hälfte der Frauen mit genitaler C. trachomatis-Infektion (47%) und N. gonorrhoeae-Infektion (48%) eine gleichzeitige Genitalinfektion hatten. Obwohl es nur begrenzte Kenntnisse über die Bedeutung von Mischinfektionen gibt, Diese könnten theoretisch die Anfälligkeit für Langzeitkomplikationen und die Übertragbarkeit für einzelne STI erhöhen. Gemischte rektale Infektionen waren bei Frauen signifikant seltener als genitale STI, da 88% dieser Infektionen durch einen einzigen Mikroorganismus verursacht wurden. Mögliche Erklärungen wären eine weniger häufige Exposition gegenüber Infektionen, da RAI in unserer Kohorte nicht üblich war, und unterschiedliche Anfälligkeiten der anorektalen Schleimhaut für bestimmte Mikroorganismen.Frauen mit einer Doppelinfektion hatten signifikant höhere C. trachomatis- und N. gonorrhoeae-Genitalbelastungen als Frauen mit nur einer Genitalinfektion. Unseres Wissens wurde dies noch nicht berichtet und könnte die Hypothese der Autoinokulation durch Zervikovaginalflüssigkeiten von der Vagina bis zum Rektum stützen. Diese mögliche Rolle des Spillover könnte die hohe Prävalenz von erklären anorektale Infektion trotz der geringen Häufigkeit von RAI in unserer Studie (23, 24).

Wir beobachteten keinen signifikanten Unterschied zwischen der bakteriellen Belastung von Einzel- und Mischinfektionen für einen der STI. In Übereinstimmung mit zwei anderen auf Nukleinsäureamplifikationstests (NAAT) basierenden Studien beobachteten wir keinen Zusammenhang zwischen bakterieller Belastung und genitaler Symptomatik (25, 26). Vodstrcil und Kollegen beobachteten kürzlich in einem Review, dass kulturbasierte Studien eher einen Zusammenhang mit Anzeichen und Symptomen finden als NAAT-basierte Studien (89% gegenüber 38%) (27). Dies könnte sich in der Tendenz lebensfähiger Organismen widerspiegeln, enger mit klinischen Manifestationen assoziiert zu sein. Jüngeres Alter und Schwangerschaft waren unabhängig voneinander mit einer höheren Bakterienlast von C verbunden. trachomatis und jüngeres Alter und hatte in den letzten 6 Monaten mehr als einen Sexualpartner mit einer höheren Belastung durch N. gonorrhoeae. Die gleiche Beziehung mit dem Alter (für C. trachomatis) in mehreren NAAT-Studien wurde bereits beschrieben und könnte auf Veränderungen im Zervixepithel oder auf jüngere Frauen zurückzuführen sein sexuell aktiver und riskanter Verhalten oder könnte erworbene Immunität bei Erwachsenen widerspiegeln (28-30). Es gab mehrere Einschränkungen für unsere Studie. Erstens haben wir die Variabilität der Probenahme nicht berücksichtigt, indem wir Lasten berichteten, die der Anzahl der eukaryotischen Zellen entsprachen. Da jedoch Entzündungszellen, die von der Infektionsstelle angezogen werden, zu den Probenahmezellen gehören würden, würde die Belastung pro eukaryotischer Zelle verringert (25). Eine zweite Einschränkung kann die Verwendung von gelagerten Proben sein, aber die Literatur zeigt keinen klinisch relevanten Abbaueinfluss (31). Eine letzte Einschränkung könnte die Verwendung antimikrobieller Mittel durch Frauen darstellen, ein Faktor, der dazu geführt haben könnte, dass wir unsere Ergebnisse in gewissem Maße unterschätzt haben, da dies kein Ausschlusskriterium war.

Zusammenfassend ergab diese Studie häufige gleichzeitige Infektionen von C. trachomatis und N. gonorrhoeae und Unterschiede in der bakteriellen Belastung in einem Umfeld hoher HIV-Prävalenz. Diese neuen Erkenntnisse könnten dazu beitragen, Unterschiede in der STI-Prävalenz auf Bevölkerungsebene zu erklären, wo erhöhte Anstrengungen erforderlich sind, um die Belastung durch C. trachomatis- und N. gonorrhoeae-Infektionen zu kontrollieren.