Der Abbau von Zellmembranen durch elektrischen und mechanischen Stress

Wir haben versucht zu bestimmen, ob mechanische Spannung und elektrischer Stress Paar Membranabbau in Zellen verursachen. Mit zellgebundenen Pflastern aus HEK293-Zellen schätzten wir die mechanisch erzeugte Spannung aus dem aufgebrachten Druck und der Geometrie des Pflasters. Spannungsimpulse mit zunehmender Amplitude wurden angelegt, bis wir einen plötzlichen Anstieg der Leitfähigkeit und Kapazität beobachteten. Für Pulse von 50 µs Dauer benötigte der Durchbruch >0,5 V und war spannungsabhängig. Für Impulse von 50-100 ms Dauer benötigte der Durchbruch 0,2-0,4 V und war spannungsunabhängig. Anscheinend können zwei physikalisch unterschiedliche Prozesse zum Membranabbau führen. Wir könnten die Reaktion auf die kurzen Hochspannungsimpulse erklären, wenn ein Zusammenbruch in der Lipiddoppelschicht auftrat. Die kritische elektromechanische Energie pro Flächeneinheit für den Durchbruch durch kurze Impulse betrug ∼4 Dyn / cm, in Übereinstimmung mit früheren Ergebnissen an Doppelschichten. Unsere Daten deuten darauf hin, dass die Doppelschicht zumindest in einem Patch einen signifikanten Anteil (∼40%) der mittleren Spannung halten kann. Um mit den großen, nichtlytischen Flächenänderungen von Patches kompatibel zu sein, scheint die Doppelschicht in Richtung der Pipettenspitze gezogen zu werden, möglicherweise durch hydrophobe Kräfte, die Membranproteine benetzen, die an das Glas gebunden sind. Obwohl Durchbruchsspannungen für lange Impulse mit früheren Arbeiten an Algen übereinstimmten, bleiben die Mechanismen für diesen Zusammenbruch unklar.

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