cDNA Cloning

Die reverse Transkription von RNA in komplementäre DNA (cDNA) ist der erste Schritt in vielen molekularbiologischen Arbeitsabläufen, einschließlich Genexpressionsstudien unter Verwendung von Echtzeit-PCR, Genklonierung und bei der Erstellung von cDNA-Bibliotheken.Eine cDNA-Bibliothek ist eine Sammlung klonierter DNA-Sequenzen, die komplementär zu der mRNA sind, die aus einer bestimmten Zelle oder einem bestimmten Gewebe extrahiert wurde. Die Bibliothek stellt nur die transkribierten Sequenzen innerhalb einer bestimmten Probe dar und kann eine Fülle von Informationen über die Identität und Funktionalität bestimmter Gene liefern. cDNA-Bibliotheken bieten auch Einblicke in die Häufigkeit der in einer Probe produzierten RNA, denn je mehr eine mRNA exprimiert wird, desto mehr cDNA wird produziert.

Bei der Konstruktion von cDNA-Bibliotheken ist es wichtig, dass die cDNA-Klone sowohl in ihrer vollen Länge als auch in ihrer relativen Häufigkeit repräsentativ für die ursprüngliche RNA-Population sind. Dies bedeutet, dass die Wahl der in diesem Schritt verwendeten reversen Transkriptase von entscheidender Bedeutung ist. Beim Klonen von cDNAs und Erstellen von cDNA-Bibliotheken empfehlen wir unsere UltraScript- und UltraScript 2.0-Produktreihe. Diese hochaktiven und thermostabilen Enzyme sind in der Lage, mehr cDNA-Produkte in voller Länge zu synthetisieren, selbst mit begrenzten Mengen an RNA, RNA, die in geringen Mengen exprimiert wird oder einen hohen Grad an Sekundärstruktur enthält.