eftersom immunterapier blir allt viktigare vid behandling av olika cancerformer blir övervakning av immunsvaret för att återspegla terapins effektivitet också allt viktigare. Tidigare korrelerade tumörantigenspecifika humorala svar hos patienter som fick vacciner för lågkvalitativt follikulärt lymfom (FL) med kliniska resultat, inklusive tumörregression, molekylär remission, progressionsfri överlevnad (PFS) och total överlevnad (OS). Däremot har T-cellens immunsvar varit svåra att validera. T – cellproliferationsanalyser mäter mestadels CD4 T-cellsvar; medan CD8 T-celler kan vara de viktiga effektorerna som genereras av immunterapier. Analyser utformade för att mäta CD8 – T-celler, dvs. kromfrisättnings – CTL-analyser, och IFN-Kazaki ELISPOT och intracellulära flödescytometrianalyser, är svåra att göra reproducerbara. För att ta itu med denna fråga erhölls PBL från FL-patienter, kryokonserverades och tinades och användes sedan för att utforma en standardiserad metod för detektion av intracellulär IFN-sackari genom flödescytometri. Den kombinerade stimulansen av lösliga anti-CD3-och anti-CD28-antikroppar ger en robust stimulering, vanligtvis svarar cirka 5% av normala PBL CD8+ T-celler. Genom att använda en panel av bestrålade B-celllymfomcellinjer som stimulatorer visade vi att i genomsnitt 1 – 2% av dessa T-celler kunde montera ett svar i denna analys. Överraskande var CD8 + PBL T-celler från flera patienter med FL mer mottagliga för kombinerad anti-CD3 och anti-CD28-stimulering såväl som allo-stimulering, 15 – 22% respektive 2 – 6%. Detta svar åtföljdes av ytuttryck av CD107, en surrogatmarkör för CTL-degranulering, i samma population av celler som demonstreras av flerfärgsflödescytometri. Både IFN-Macau och CD107-svaren hämmades av en anti-klass i-antikropp, W6/32, vilket tyder på ett klass i-begränsat t-cellreceptormedierat svar. Vidare, vid senare tidpunkter, uppreglerade dessa T-celler också CD137 på deras yta. Denna aktiveringsmolekyl uppregleras på CD8 T-celler som svar på specifikt antigenigenkänning och ger en anti-apoptotisk signal till cellerna. Sammanfattningsvis kan immunkompetens hos CD8 T-celler isolerade från FL-patienter bedömas genom allo-stimulering av en panel av B-celllymfomcellinjer. Ännu viktigare är att korrelation genom flödescytometri av 3 oberoende indikatorer på svar (IFN-GHz, CD107 och CD137) inom enskilda populationer av celler till både allo-stimulering och till det specifika målet, kan leda till bättre förståelse av T-cellernas roll i immunsvaret. I slutändan måste dessa svar valideras med patientresultat i kliniska prövningar av vacciner i lymfom.