InVivoMAb anti-mouse CSF1R (CD115) (Clone: AFS98)

Bauche, D., et al. (2018). ”LAG3(+) Regulatory T Cells Restrain Interleukin-23-Producing CX3CR1(+) Gut-Resident Macrophages during Group 3 Innate Lymphoid Cell-Driven Colitis.” Immunity 49(2): 342-352 e345. PubMed

Interleukin-22 (IL-22)-producing group 3 innate lymphoid cells (ILC3) maintains gut homeostasis but can also promote inflammatory bowel disease (IBD). The regulation of ILC3-dependent colitis remains to be elucidated. Här visar vi att Foxp3 ( + ) regulatoriska T-celler (Treg-celler) förhindrade ILC3-medierad kolit på ett IL-10-oberoende sätt. Treg-celler hämmade IL-23-och IL-1beta-produktion från intestinala cx3cr1(+) makrofager men inte CD103(+) dendritiska celler. Dessutom hindrade Treg-celler ILC3-produktion av IL-22 genom undertryckande av cx3cr1(+) makrofagproduktion av IL-23 och IL-1beta. Denna undertryckning var kontaktberoende och medierades av latent aktiveringsgen-3 (LAG-3)-en immunkontrollpunktreceptor-uttryckt på Treg-celler. Engagemang av LAG – 3 på MHC klass II drev djup immunsuppression av cx3cr1(+) vävnadsboende makrofager. Vår studie avslöjar att tarmslemhinnans hälsa upprätthålls av en axel som drivs av Treg-celler kommunikation med bosatta makrofager som håller inne inflammatoriska stimuli som krävs för ILC3-funktion.

Gordon, S. R., et al. (2017). ”PD-1-uttryck med tumörassocierade makrofager hämmar fagocytos och tumörimmunitet.”Natur 545 (7655): 495-499. PubMed

programmerat celldödsprotein 1 (PD-1) är en immunkontrollpunktreceptor som uppregleras på aktiverade T-celler för induktion av immuntolerans. Tumörceller överuttrycker ofta liganden för PD-1, programmerad celldöd ligand 1 (PD-L1), vilket underlättar deras flykt från immunsystemet. Monoklonala antikroppar som blockerar interaktionen mellan PD – 1 och PD-L1, genom att binda till antingen liganden eller receptorn, har visat anmärkningsvärd klinisk effekt hos patienter med olika cancerformer, inklusive melanom, kolorektal cancer, icke-småcellig lungcancer och Hodgkins lymfom. Även om det är väl etablerat att PD-1-PD-L1-blockad aktiverar T-celler, är lite känt om den roll som denna väg kan ha i tumörassocierade makrofager (TAMs). Här visar vi att både mus och mänskliga TAMs uttrycker PD-1. Tam PD-1-uttryck ökar med tiden i musmodeller av cancer och med ökande sjukdomsstadium i primära humana cancerformer. Tam PD-1-uttryck korrelerar negativt med fagocytisk potens mot tumörceller, och blockad av PD-1-PD-L1 in vivo ökar makrofagfagocytos, minskar tumörtillväxt och förlänger överlevnaden hos möss i musmodeller av cancer på ett makrofagberoende sätt. Detta antyder att PD-1-PD-L1-terapier också kan fungera genom en direkt effekt på makrofager, med betydande konsekvenser för behandling av cancer med dessa medel.

Moynihan, K. D., et al. (2016). ”Utrotning av stora etablerade tumörer hos möss genom kombinationsimmunterapi som engagerar medfödda och adaptiva immunsvar.”Nat Med. doi: 10.1038 / nm.4200. PubMed

Checkpoint-blockad med antikroppar specifika för cytotoxiskt t-lymfocytassocierat protein (CTLA)-4 eller programmerad celldöd 1 (PDCD1; även känd som PD-1) framkallar varaktig tumörregression i metastatisk cancer, men dessa dramatiska svar är begränsade till en minoritet av patienterna. Detta suboptimala resultat beror troligen delvis på det komplexa nätverket av immunsuppressiva vägar som finns i avancerade tumörer, vilket sannolikt inte kommer att övervinnas genom ingrepp vid en enda signalkontrollpunkt. Här beskriver vi en kombinationsimmunterapi som rekryterar en mängd medfödda och adaptiva immunceller för att eliminera stora tumörbördor i syngeniska tumörmodeller och en genetiskt konstruerad musmodell av melanom; så vitt vi vet har tumörer av denna storlek inte tidigare varit härdbara genom behandlingar som bygger på endogen immunitet. Maximal antitumöreffektivitet krävde fyra komponenter: en tumör-antigen-targeting antikropp, en rekombinant interleukin – 2 med en förlängd halveringstid, anti-PD-1 och ett kraftfullt t-cellvaccin. Utarmningsexperiment avslöjade att CD8 + T-celler, korspresenterande dendritiska celler och flera andra medfödda immuncellsundergrupper krävdes för tumörregression. Effektiv behandling inducerad infiltration av immunceller och produktion av inflammatoriska cytokiner i tumören, förbättrad antikroppsmedierad tumörantigenupptagning och främjad antigenspridning. Dessa resultat visar kapaciteten hos ett framkallat endogent immunsvar för att förstöra stora, etablerade tumörer och belysa väsentliga egenskaper hos kombinationsimmunterapier som kan härda en majoritet av tumörer i experimentella inställningar som vanligtvis ses som otänkbara.

Arnold, I. C., et al. (2015). ”CD11c monocyt / makrofager främjar kronisk Helicobacter hepaticus-inducerad tarminflammation genom produktion av IL-23.”Mukosal Immunol. doi: 10.1038 / mi.2015.65. PubMed

vid inflammatoriska tarmsjukdomar, en nedbrytning i värd mikrobiella interaktioner åtföljer ihållande aktivering av immunceller i tarmen. Funktionella studier tyder på en nyckelroll för interleukin – 23 (IL-23) vid orkestrering av tarminflammation. IL – 23 kan produceras av olika mononukleära fagocyter (MNP) efter akut mikrobiell stimulering, men lite är känt om de viktigaste cellulära källorna till IL-23 som driver kronisk tarminflammation. Här har vi tagit upp denna fråga med hjälp av en fysiologisk modell av bakteriedriven kolit. Genom att kombinera villkorad genablation och genuttrycksprofilering fann vi att IL-23-produktion av CD11c+ MNPs var väsentlig för att utlösa tarmimmunopatologi och identifierade mhcii+ monocyter och makrofager som den viktigaste källan till IL-23. Uttryck av IL – 23 av monocyter förvärvades under deras differentiering i tarmen och korrelerade med uttrycket av major histokompatibilitetskomplex klass II (MHCII) och CD64. Däremot var Batf3-beroende CD103 + CD11b – dendritiska celler dispenserbara för bakterieinducerad kolit i denna modell. Dessa studier förstärker monocyternas patogena roll i dysregulerade svar på tarmbakterier och identifierar produktion av IL-23 som en nyckelkomponent i detta svar. Ytterligare förståelse av de funktionella källorna till IL-23 i olika former av tarminflammation kan leda till nya terapeutiska strategier som syftar till att avbryta IL-23-driven immunpatologi.Mucosal Immunology advance online publikation 5 augusti 2015. doi: 10.1038 / mi.2015.65.

Conde, P., et al. (2015). ”DC-tecken (+) makrofager styr induktionen av Transplantationstolerans.”Immunitet 42 (6): 1143-1158. PubMed

Vävnadseffektorceller i monocytlinjen kan differentieras till olika celltyper med specifik cellfunktion beroende på deras miljö. Fenotypen, utvecklingskraven och funktionella mekanismer för immunskyddande makrofager som förmedlar induktionen av transplantationstolerans förblir svårfångade. Här visar vi att costimulatorisk blockad gynnade ackumulering av DC-TECKENUTTRYCKANDE makrofager som hämmade CD8 ( + ) T-cellimmunitet och främjade CD4 (+) Foxp3 (+) Treg-cellutvidgning i antal. Mekanistiskt krävdes det samtidiga DC-tecken engagemang av fucosylerade ligander och TLR4-signalering för produktion av immunoregulatorisk IL-10 associerad med långvarig allograftöverlevnad. Radering av DC-TECKENUTTRYCKANDE makrofager in vivo, störande med deras CSF1-beroende utveckling eller förhindrande av DC-TECKENSIGNALVÄGEN upphävd tolerans. Tillsammans ger resultaten nya insikter om de tolerogena effekterna av costimulatorisk blockad och identifierar DC-tecken(+) undertryckande makrofager som avgörande mediatorer av immunologisk tolerans med de samtidiga terapeutiska konsekvenserna i kliniken.

Kaminsky, L. W., et al. (2015). ”Redundant funktion av Plasmacytoid och konventionella dendritiska celler krävs för att överleva en naturlig virusinfektion.”J Virol 89 (19): 9974-9985. PubMed

virus som sprids systemiskt från ett perifert infektionsställe orsakar sjuklighet och dödlighet i den mänskliga befolkningen. Medfödda myeloida celler, inklusive monocyter, makrofager, monocyt-härledda dendritiska celler (mo-DC) och dendritiska celler (DC), svarar tidigt under virusinfektion för att kontrollera virusreplikation, vilket minskar virusspridningen från det perifera stället. Ectromelia virus (ECTV), ett ortopoxvirus som naturligt infekterar musen, sprider sig systemiskt från det perifera infektionsstället och resulterar i död hos mottagliga möss. Medan fagocytiska celler har en nödvändig roll i svaret på ECTV, är kravet på individuella myeloida cellpopulationer under akuta immunsvar mot perifer virusinfektion oklart. I denna studie användes en mängd myeloid-specifika utarmningsmetoder för att dissekera rollerna för enskilda myeloidcellundergrupper i överlevnaden av ECTV-infektion. Vi visade att DC är de primära producenterna av typ i-interferoner (T1-IFN), nödvändiga cytokiner för överlevnad, efter ECTV-infektion. DC, men inte makrofager, monocyter eller granulocyter, krävdes för kontroll av viruset och överlevnad hos möss efter ECTV-infektion. Utarmning av antingen plasmacytoid DC (PDC) ensam eller lymfoid-bosatt DC-delmängd (CD8alpha (+) DC) ensam gav inte dödlig mottaglighet för ECTV. Funktionen hos minst en av DC-undergrupperna pDC eller CD8alpha(+) krävs dock för överlevnad av ECTV-infektion, eftersom möss utarmade av båda populationerna var mottagliga för ECTV-utmaning. Närvaron av minst en av dessa DC-delmängder är tillräcklig för cytokinproduktion som minskar ECTV-replikering och virusspridning, vilket underlättar överlevnad efter infektion. Betydelse: före utrotningen av variolavirus, orthopoxvirus som orsakar smittkoppor, gav en tredjedel av de infekterade människorna sjukdomen. Efter framgångsrik utrotning av smittkoppor har vaccinationsgraden med smittkoppsvaccinet minskat avsevärt. Det finns nu en ökande förekomst av zoonotiska ortopoxvirusinfektioner för vilka det inte finns några effektiva behandlingar. Dessutom är säkerheten för koppevaccinet av stor oro, eftersom komplikationer kan uppstå, vilket resulterar i sjuklighet. Liksom många virus som orsakar betydande mänskliga sjukdomar sprids ortopoxvirus från ett perifert infektionsställe för att bli systemiskt. Denna studie belyser det tidiga kravet på medfödda immunceller vid kontroll av en perifer infektion med ECTV, orsaksmedlet för mousepox. Vi rapporterar att det finns redundans i funktionen av två medfödda immuncellsundergrupper vid kontroll av virusspridning tidigt under infektion. Den virala kontrollen medierad av dessa cellundergrupper presenterar ett potentiellt mål för terapier och rationell vaccindesign.

Naik, S., et al. (2015). ”Kommensal-dendritisk-cellinteraktion specificerar en unik skyddande hudimmunsignatur.”Natur 520 (7545): 104-108. PubMed

huden representerar det primära gränssnittet mellan värden och miljön. Detta organ är också hem för biljoner mikroorganismer som spelar en viktig roll i vävnadshomeostas och lokal immunitet. Hudmikrobiska samhällen är mycket olika och kan ombyggas över tid eller som svar på miljöutmaningar. Hur, i samband med denna komplexitet, kan enskilda kommensala mikroorganismer differentiellt modulera hudimmunitet och konsekvenserna av dessa svar för vävnadsfysiologi förblir oklara. Här visar vi att definierade kommensaler dominerar hudens immunitet och identifierar de cellulära mediatorerna som är involverade i denna specifikation. I synnerhet inducerar kolonisering med Staphylococcus epidermidis IL-17A(+) CD8 ( + ) T-celler som hem till epidermis, förbättrar medfödd barriärimmunitet och begränsar patogeninvasion. Kommensalspecifika T-cellsvar är resultatet av den samordnade verkan av hudboende dendritiska cellundergrupper och är inte associerade med inflammation, vilket avslöjar att vävnadsboende celler är redo att känna och svara på förändringar i mikrobiella samhällen. Denna interaktion kan representera ett evolutionärt sätt genom vilket hudimmunsystemet använder fluktuerande kommensalsignaler för att kalibrera barriärimmunitet och ge heterologt skydd mot invasiva patogener. Dessa fynd avslöjar att hudimmunlandskapet är en mycket dynamisk miljö som snabbt och specifikt kan ombyggas av möten med definierade kommensaler, fynd som har djupa konsekvenser för vår förståelse av vävnadsspecifik immunitet och patologier.

Sheng, K. C., et al. (2014). ”Il-3 och CSF-1 interagerar för att främja generering av CD11c+ IL-10-producerande makrofager.”PLoS En 9 (4): e95208. PubMed

Unraveling mekanismerna för hematopoiesis reglerad av flera cytokiner är fortfarande en utmaning i hematologi. IL – 3 är en allergisk cytokin med multilineage potential, medan CSF-1 produceras i steady state med begränsad härstamning täckning. Här avslöjade vi en lärorik roll av CSF-1 i IL-3-medierad hematopoiesis. CSF – 1 främjade signifikant IL-3-driven CD11c+ cellutvidgning och dämpade basofil-och mastcellgenerering från C57BL/6 benmärg. Ytterligare studier indikerade att CSF-1/CSF-1R-axeln bidrog signifikant till IL-3-Inducerad CD11c+ cellgenerering genom att förbättra c-Fos-associerad monopoiesis. CD11c + – celler inducerade av IL – 3 eller IL-3/CSF-1 var kompetenta i cellulär mognad och endocytos. Både IL – 3-och IL-3/CSF-1-celler saknade klassiskt dendritiskt cellutseende och liknade makrofager i morfologi. Båda populationerna producerade en hög nivå av IL-10, förutom IL-1, IL-6 och TNFalpha, som svar på LPS, och var relativt dåliga t-cellstimulatorer. Sammantaget avslöjar dessa fynd en roll för CSF-1 vid förmedling av IL-3 hematopoietisk väg genom monopoiesis, som reglerar expansion av CD11c+ makrofager.

Greter, M., et al. (2012). ”GM-CSF kontrollerar nonlymphoid vävnad dendritisk cellhomeostas men är dispenserbar för differentiering av inflammatoriska dendritiska celler.”Immunitet 36 (6): 1031-1046. PubMed

GM-CSF (Csf-2) är en kritisk cytokin för in vitro-generering av dendritiska celler (DCs) och tros kontrollera utvecklingen av inflammatorisk DCs och bosatt CD103 (+) DCs i vissa vävnader. Här visade vi att i motsats till den nuvarande förståelsen verkar Csf-2-receptorn i steady state för att främja överlevnad och homeostas av icke-lymphoid vävnadsboende CD103(+) och CD11b(+) DCs. Frånvaro av Csf – 2-receptor på lung DCs upphävde induktionen av CD8(+) T-cellimmunitet efter immunisering med partikelformiga antigener. Däremot var Csf-2-receptorn dispenserbar för differentiering och medfödd funktion av inflammatoriska DCs under akuta skador. Istället krävde inflammatoriska DCs Csf-1-receptor för deras utveckling. Således är Csf-2 viktigt i vaccininducerad CD8(+) T-cellimmunitet genom reglering av nonlymphoid vävnad DC homeostas snarare än kontroll av inflammatorisk DC in vivo.

Li, W., et al. (2012). ”Intravital 2-foton avbildning av leukocythandel i slående hjärta.”J Clin Investera 122 (7): 2499-2508. PubMed

Tvåfoton intravital mikroskopi har väsentligt breddat vår förståelse av vävnads-och organspecifika skillnader i reglering av inflammatoriska svar. Men lite är känt om den dynamiska regleringen av leukocytrekrytering i inflammerad hjärtvävnad, till stor del på grund av tekniska svårigheter som är förknippade med att avbilda rörlig vävnad. Här rapporterar vi en metod för att avbilda slå murina hjärtan med hjälp av intravital 2-fotonmikroskopi. Med hjälp av denna metod visualiserade vi neutrofilhandel vid baslinjen och under inflammation. Ischemi reperfusionsskada inducerad av transplantation eller övergående kranskärlssligering ledde till rekrytering av neutrofiler till hjärtat, deras extravasation från kranskärl och infiltrering av myokardiet där de bildade stora kluster. Ympningshjärtan innehållande mutant ICAM-1, en ligand som är viktig för neutrofilrekrytering, minskade neutrofilernas kryphastigheter i kärlen och hämmade markant deras extravasation. Liknande försämring sågs med hämning av Mac-1, En receptor för ICAM-1. Blockad av LFA-1, en annan ICAM-1-receptor, förhindrade neutrofil vidhäftning till endotel och extravasation i hjärttransplantat. Eftersom inflammatoriska svar i hjärtat är av stor relevans för folkhälsan, har denna bildmetod löfte för att studera hjärtspecifika mekanismer för leukocytrekrytering och identifiera nya terapeutiska mål för behandling av hjärtsjukdomar.

Tagliani, E., et al. (2011). ”Koordinera reglering av vävnadsmakrofag och dendritisk cellpopulationsdynamik med CSF-1.”J Exp Med 208 (9): 1901-1916. PubMed

vävnadsmakrofager (Mphis) och dendritiska celler (DCs) spelar viktiga roller i vävnadshemostas och immunitet. Hur dessa celler bibehålls vid deras karakteristiska densiteter i olika vävnader har förblivit oklart. Med hjälp av en ny flödescytometrisk teknik för att bedöma relativa hastigheter av blodburen prekursorrekrytering undersökte vi mphi-och DC-populationsdynamik i den gravida musuterusen, där snabb vävnadstillväxt underlättade en dissektion av underliggande regleringsmekanismer. Vi visar hur mphi-dynamik, och därmed mphi-vävnadstätheter, styrs lokalt av CSF-1, en pleiotropisk tillväxtfaktor vars aktivitetsnivå på plats varierade mycket mellan livmodervävnadsskikt. CSF – 1 agerade delvis genom att inducera mphi-proliferation och delvis genom att stimulera extravasationen av Ly6C(hi) monocyter (Mos) som fungerade som mphi-prekursorer. Mo-rekrytering var beroende av produktionen av ccr2-kemokinreceptorligander av livmoder Mphis som svar på CSF-1. Oväntat påverkade en parallell CSF-1-reglerad, men CCR2-oberoende väg uterus DC-vävnadstätheter genom att kontrollera lokala extravasationshastigheter före DC. Tillsammans ger dessa data cellulär och molekylär inblick i regleringen av mphi-vävnadstätheter under icke-inflammatoriska förhållanden och avslöjar en central roll för CSF-1 i samordningen av mphi och DC homeostas.

Lim, A. K., et al. (2009). ”Antikroppsblockad av c-fms undertrycker progressionen av inflammation och skada vid tidig diabetisk nefropati hos överviktiga db/db-möss.”Diabetologia 52 (8): 1669-1679. PubMed

mål / hypotes: Makrofagmedierad njurskada spelar en viktig roll i utvecklingen av diabetisk nefropati. Kolonistimulerande faktor (CSF)-1 är ett cytokin som produceras i diabetiska njurar och främjar makrofagackumulering, aktivering och överlevnad. CSF – 1 verkar uteslutande genom c-fms-receptorn, som endast uttrycks på celler i monocyt-makrofaglinjen. Därför använde vi c-fms-blockad som en strategi för att selektivt rikta makrofagmedierad skada under progressionen av diabetisk nefropati. SÄTT: Feta, typ 2 diabetiska db/db BL/KS-möss med etablerad albuminuri behandlades med en neutraliserande Anti-c-fms monoklonal antikropp (AFS98) eller isotypmatchad kontroll IgG från 12 till 18 veckors ålder och undersöktes för njurskada. Resultat: behandling med AFS98 påverkade inte fetma, hyperglykemi, cirkulerande monocytnivåer eller etablerad albuminuri hos db/db-möss. AFS98 förhindrade emellertid glomerulär hyperfiltrering och undertryckta variabler av inflammation i diabetisk njure, inklusive njurmakrofager (ackumulering, aktivering och proliferation), kemokin CC-motivligand 2-nivåer (mRNA och urinprotein), njuraktivering av proinflammatoriska vägar (C-Jun amino-terminal Kinas och aktiverande transkriptionsfaktor 2) och TNF-alfa (även känd som Tnf) mRNA-nivåer. Dessutom minskade AFS98 vävnadsskadorna orsakade av makrofager inklusive tubulär skada (apoptos och hypertrofi), interstitiell skada (cellproliferation och myofibroblast periodisering) och njurfibros (TGF-beta1 och Col4a1 mRNA). Slutsatser / Tolkning: blockad av c-fms kan undertrycka utvecklingen av etablerad diabetisk nefropati i db/db-möss genom att rikta makrofagmedierad skada.