transkriptionsfaktor-medierad cancer cell omprogrammering: en pionjär

eftersom behandling mot cancer återfall, metastaser, och resistens förblir utmanande i kliniker, genomförandet av cancer genterapi har förblivit en blomstrande och krävande alternativ som kan övervinna sådana svårigheter . Det är välkänt att godartade celler kan bli cancerceller efter en malign övergång, men huruvida cancerceller kan genetiskt och epigenetiskt vändas tillbaka till en godartad fenotyp förblir oklart . Transkriptionsfaktormedierad omprogrammering har nyligen dykt upp som ett in vitro-tillvägagångssätt för att möjliggöra cancerceller att hämta godartade funktioner.som tidigare diskuterats har iPSC-teknik, som en sofistikerad omprogrammeringsmetod, inte bara utnyttjats för att inducera en somatisk övergång från terminalt differentierade somatiska celler till pluripotens utan också använts för att generera CSC för onkogen karakterisering . Dessutom har iPSC-teknik ofta använts för att inducera omprogrammering från cancerceller till pluripotenta celler med en godartad fenotyp. I 2009, Utikal et al. omprogrammeras humana melanocyter och mus melanom cellinje till iPSCs med en godartad fenotyp genom införandet av Yamanaka faktorer med effektivitet som sträcker sig från 0,05% till 0,1%. R545 melanomcellinje-härledda IPSC uppvisade endogent uttryck av Oct4, Klf4 och c-Myc, demetylering av Oct-4-och NANOG-promotorerna och förlusten av tumörgenicitet in vivo. Vid avbrytande av doxycyklininducerbart lentiviralt uttryck av Yamanaka-faktorer genom att dra tillbaka doxycyklin, muskimärer härledda från de omprogrammerade melanomcellerna hade bibehållit benignitet och bildade inte synlig tumör vid 5 månaders ålder, vilket indikerar att de omprogrammerade cellerna genomgick normal differentieringsprocess för att producera godartade celler in vivo.

under 2010, Miyoshi et al. fann att uttrycket av pluripotensassocierade gener, såsom NANOG, stegspecifikt embryonalt antigen-4 (SSEA-4), TRA-1-60 och TRA–1-81 förhöjdes efter införande av Yamanaka–faktorer i bukspottkörtel -, lever-och kolorektala cancerceller. Omprogrammering omvänd DNA-och histonmetylering i specifika promotorregioner för att uttrycka pluripotensassocierade gener så att de omprogrammerade cancercellerna kunde utveckla mönster som liknar ektoderm, mesoderm och endoderm. Dessutom hade de pluripotenta cancercellerna högre känslighet för kemoterapeutiskt medel 5-fluorouracil (5-Fu), vilket ledde till en potentiell klinisk betydelse för att återkalla förvärvad kemo-/radioresistens via cancercell omprogrammering. Dessutom kunde de omprogrammerade cancercellerna differentieras till olika linjer, inklusive epitel -, mesenkymala och neuronala celler (kollektivt kallade post pluripotenta cancerceller). De postpluripotenta cancercellerna var mindre maligna jämfört med föräldracancerceller in vitro och var fria från tumörgenisk potential baserat på tumörbildningsanalys hos NOD/SCID-möss. Omprogrammeringseffektiviteten från cancerceller till pluripotenta cancerceller förblir dock låg, vilket tyder på att det bara kunde finnas en minoritet av tumörceller framgångsrikt omprogrammeras till pluripotenta cancerceller. Senare studier visade också att andra kombinatoriska transkriptionsfaktorer, såsom Lin-28 homolog (LIN28), Oct-4, SOX2 och NANOG, också kunde omprogrammera lungadenokarcinom och gastrointestinal cancer i iPSCs med lindrad tumörgenicitet och metastatisk potential . Transkriptionsfaktormedierad omprogrammering kan vidare riktas, genom en mängd olika differentieringsassocierade faktorer, för att bilda funktionella celler av olika linjer . Även om en sådan omprogrammering tillvägagångssätt är genomförbart och etiskt acceptabelt att återaktivera post-epigenetiska tillstånd av cancerceller tillbaka till en godartad pluripotent tillstånd , effektiviteten och säkerheten för cancercell omprogrammering medierad av transkriptionsfaktorer förblir en utmanande uppgift som ska lösas innan det blir en lovande terapi för cancer .

kombinatoriska pluripotensassocierade transkriptionsfaktorer har visat bevisade förmågor att omprogrammera cancerceller till uiPSCs med potential att ytterligare differentiera till normala celler. Dessutom har utredare nyligen funnit att linjespecifika faktorer direkt kan omprogrammera cancerceller till funktionella somatiska celler genom att kringgå pluripotent stadium, vilket kan minska risken för malign transformation av inducerade pluripotenta cancerceller .

Breakpoint cluster region(BCR)-Abelson Murin leukemi viral onkogen homolog 1 (ABL1)+ prekursor B-cell akut lymfoblastisk leukemi (B-ALL) kännetecknas av blockad av B-celldifferentiering. Därför har omprogrammering av BCR-ABL1 + B-ALL till de icke-leukemiska cellerna betraktats som en utmärkt strategi för att övervinna differentieringsblockaden . En tidigare studie har visat att ccaat / enhancer-binding protein alpha (C / EBPa), en transkriptionsfaktor associerad med utvecklingen av ALL, kan inducera en cellulär övergång från murina B-härstamningsceller till makrofager med ungefär 100% effektivitet . Detta tidigare arbete har lett till övervägande av huruvida C / EBPa också kan användas för att omprogrammera cancer med B-celllinjer till funktionella makrofager. I 2013, Rapino et al. framgångsrikt omprogrammeras humant lymfom och leukemi B-cellinjer till makrofagliknande celler genom införande av C/EBPa. Enligt analysen av mer än 20 humana lymfom och leukemi B-cellinjer kan 80% av cellerna delvis eller helt omprogrammeras till makrofagliknande celler. De omprogrammerade lymfoblastiska leukemi B-cellerna visade mindre tumörgenicitet in vitro, med uppreglering av makrofagassocierade markörer och nedreglering av B-cellassocierade markörer. Experiment i murina modeller bekräftade också att ingen tumör bildades efter injektionen av C/EBPa-infekterade lymfoida leukemiceller i immunbristande möss. Även om majoriteten av de analyserade lymfom-och leukemicellinjerna genomgick omprogrammering åtminstone delvis eller övergående, upprätthöll endast två cellinjer med ett högre endogent uttryck av C/EBPa effektivt den cellulära övergången till makrofagliknande celler, vilket indikerar framgångsgraden för omprogrammering av cancerceller beror mycket på det endogena uttrycket av C/EBPa .

tidigare studier har fokuserat på att införa en enda nukleär transkriptionsfaktor för att lindra tumörgeniciteten hos inte bara b-cellassocierade maligniteter utan också hepatocellulärt karcinom (HCC) . För att framgångsrikt omprogrammera cancerceller i celler med normala funktioner är det nödvändigt för olika nukleära transkriptionsfaktorer att arbeta kooperativt . Huruvida det finns en specifik formel för transkriptionsfaktorer som effektivt kan inducera cancerövergång från malignitet till benignitet med hög effektivitet och säkerhet förblir svårfångad. Nya framsteg inom encellig RNA-sekvensering har gjort det möjligt för utredare att få mer omfattande profilering i olika cancerceller, och ett ökande antal transkriptionsfaktorkandidater har identifierats och karakteriserats för att förbättra effektiviteten av cancercell omprogrammering .

i 2014, Huang et al. fann att en kombination av transkriptionsfaktorer inklusive hepatocytkärnfaktor 1 alfa (HNF1A), hepatocytkärnfaktor 3 alfa (HNF3A) och gaffelhuvudboxprotein A3 (FOXA3) spelade en viktig roll vid omprogrammering av humana fibroblaster till hepatocytliknande celler. Sedan 2019, Cheng et al. visat att kombinationen av HNF1A, HNF4A och FOXA3 också kan inducera direkt omprogrammering av HCC till hepatocytliknande celler med normala funktioner inklusive albuminsekretion, glykogensyntes, lipoproteinupptag med låg densitet samt metabolismkontroll och avgiftning. I denna studie användes adenovirus för att synergistiskt introducera HNF1A, HNF4A och FOXA3 i hcclm3-och Huh7-cellinjer. Baserat på dess inneboende hepatotropism, jämfört med iPSC-omprogrammering, inducerade adenovirusmedierad infektion cirka 100% HCC-celler för att uttrycka de valda transkriptionsfaktorerna som signifikant förbättrade infektions-och omprogrammeringseffektiviteten. De kombinatoriska transkriptionsfaktorerna inducerade däruttryck av hepatocytassocierade gener och morfologiska förändringar i både HCCLM3-och Huh7-cellinjer, vilket indikerar en samtidig effekt av HNF1A, HNF4A och FOXA3 vid HCC-omprogrammering. Omprogrammerade hepatocyter visade gradvis ökning av hepatocytfunktioner och förlust av tumorigena egenskaper in vitro. Till exempel uppvisade de omprogrammerade hepatocyterna från hcclm3-cellinjer en signifikant ökning av albumin (ALB) – uttryck och minskning av alfa-fetoprotein (AFP) – uttryck. Resultaten från den kolonibildande analysen, migrationsanalysen och sfäroidbildningsanalysen indikerade också att proliferations-och migrationsförmågan samt antalet lever-CSC minskade. Resultaten av cDNA-mikroarray bekräftade att de omprogrammerade hepatocytliknande cellerna var genetiskt lika med primära humana hepatocyter. Murina modeller visade också att de omprogrammerade hepatocytliknande cellerna väsentligen förlorade tumörgenicitet in vivo och kunde rekonstruera leverstrukturen under regenerering. Vidare minskade epitelcelladhesionsmolekylen (EpCAM)+ subpopulationen i de omprogrammerade hepatocytliknande cellerna signifikant, vilket tyder på att omprogrammering av cancerceller via HNF1A, HNF4A och FOXA3 effektivt kunde eliminera CSC för att förhindra canceråterfall, återfall och resistens i HCC.

Transkriptionsfaktormedierad omprogrammering baseras på genetiska och epigenetiska modifieringar via specifik genleverans . Sedan Yamanaka et al. framgångsrikt utnyttjat transkriptionsfaktorerna för att omprogrammera mus och mänskliga fibroblaster till iPSCs, omprogrammeringstekniken har vidareutvecklats i utvecklingen av potentiella cancerbehandlingar . Ändå förblev kontroverser angående transkriptionsfaktormedierad cancercell omprogrammering . Flera studier har visat att omprogrammering från cancerceller till pluripotenta celler inte alltid leder till positiva effekter. Till exempel, på grund av närvaron av onkogener såsom c-Myc, KLF4 och SOX2, har pluripotenta cancerceller säkerhetsproblem vid onkogenes på grund av avvikande differentiering . Vidare har transkriptionsfaktormedierad cancercell omprogrammering tilläggsbegränsningar när det gäller kostnad, introduktionseffektivitet och in vivo-leverans, vilket har hindrat dess potential i klinisk översättning . Cancerinitiering och progression är främst relaterade till genetiska mutationer och komplicerade epigenetiska växlingar, inklusive mikroRNA-reglering, DNA-metylering, histonmodifieringar och kromosomremodellering . Transkriptionsfaktormedierad cancercell omprogrammering är mycket involverad i dessa komplexa molekylära nätverk och den underliggande mekanismen förblir i stort sett outforskad.

liten molekylmedierad omprogrammering av cancerceller: en spelväxlare

tillkomsten av transkriptionsfaktormedierad cancercell omprogrammering har gett banbrytande resultat för att bevisa möjligheten att omprogrammera canceröden . Även om transkriptionsmedierad cancercell omprogrammering är allmänt erkänd som en potentiellt lovande strategi mot maligniteter, kvarstår säkerhets-och effektivitetsproblem orsakade av transgena modifieringar som en icke försumbar blockad . De genetiska avvikelserna, såsom aktivering av onkogener eller tystnad av tumörsuppressorgener orsakade av införandet av exogena DNA-sekvenser kan äventyra framtida klinisk översättning av cancercell omprogrammeringsterapi. Det har funnits ett alternativt tillvägagångssätt för att ersätta virusinfektionen med övergående genleverans med specialdesignade mikropartiklar , men transkriptionsfaktormedierad cancercell omprogrammering förblir riskabel och tekniskt utmanande . Därför finns det ett brådskande krav på att upprätta alternativa strategier för att inducera effektiv omprogrammering av cancerceller. Nyligen har omprogrammering av små molekylmedierade cancerceller visat sig kunna omprogrammera terminalt differentierade celler till ett pluripotent tillstånd . Mer signifikant finns det också flera studier som framkallar att användning av små molekyler för att inducera cancercell omprogrammering från malignitet till benignitet kan kringgå några av begränsningarna i transkriptionsfaktormedierad cancercell omprogrammering .

liten molekylmedierad omprogrammering har tydliga fördelar, inklusive relativt låg kostnad, enkel teknik, lätt avstämbar mångsidighet, permeabilitet och reversibilitet . Små molekyler kan också fungera som en utmärkt kandidat för att effektivt reglera cellulära processer via direkt inriktning signalvägar såsom Wnt, igelkott och flodhäst vägar . Det är lämpligt att tillverka små molekyler och skala deras genomströmning för att inducera omprogrammering med olika linjer . Dessutom kan sådana molekyler användas som molekylära sonder för att undersöka de underliggande förändringarna i molekylär signalering under cancercell omprogrammering, vilket kan leda till en förbättring av omprogrammeringseffektiviteten och minskningen av off-target-effekten . För liten molekylmedierad cancercell omprogrammering för att lyckas är det nödvändigt att identifiera och utveckla små biokemiska molekyler som kan hjälpa cancerceller att övervinna de epigenetiska barriärerna och blockaderna i olika cellulära signalvägar . Eftersom användning av små molekylmedierad cancercell omprogrammering oberoende för att omvandla malignitet till benignitet förblir utmanande hittills finns det ett begränsat antal studier i den utvidgade gränsen .

genom att införa C / EBPa, Rapino et al. framgångsrikt omprogrammerade humant lymfom och leukemi B-cellinjer till makrofagliknande celler. Fyndet leder till en teoretisk insikt om huruvida små molekyler också kan utöva effekter på omprogrammering av lymfoblastisk leukemi. År 2015 McClellan et al. fann att myeloid differentieringsinducerande cytokiner, inklusive FMS-liknande tyrosinkinasligand (FLT3L), interleukin 7 (IL-7), interleukin 3 (IL-3), granulocyt-makrofagkolonistimulerande faktor (GM-CSF), makrofagkolonistimulerande faktor (MCSF) och myeloida transkriptionsfaktorer såsom C/EBPa och PU.1 kan effektivt omprogrammera primära humana BCR-ABL1 + B – alla celler till makrofagliknande celler. Efter 2 veckors exponering för myeloid differentieringsinducerande cytokiner befanns 53% av CD19+ / CD34 + leukemiska Blaster signifikant öka uttrycket av CD14 och minska uttrycket av CD19. CD14+ / CD19-subpopulationen sorterades och renades för att ge > 98% makrofagliknande celler med stabilt CD14-uttryck. De omprogrammerade cellerna hade makrofagliknande morfologi, ytimmunofenotyper, genuttrycksprofil, generering av oxidativ burst och fagocytisk förmåga. Vidare kan de omprogrammerade cellerna avsevärt lindra leukemogenicitet, vilket manifesteras av förlusten av förmågan att bilda maligna xenografter i djurmodeller. Resultaten kan leda till en genomförbar strategi som utnyttjar cancercell omprogrammering för att behandla BCR-ABL1+ B-ALL in vivo. Ändå var resultaten som genererades från leukemisk omprogrammering föreslagen in vivo omprogrammering i ett preliminärt skede eftersom underliggande genetiska avvikelser orsakade av cytokininduktion förblir outforskade. Dessutom visade 5 av 12 kliniska fall resistens mot CD14+ omprogrammering. Därför är det oklart hur man prospektivt väljer patienter som skulle dra nytta av leukemisk omprogrammering. Mer forskning medförs för att övervinna dessa begränsningar innan det kan bli en effektiv terapeutisk strategi mot b-cellassocierade maligniteter.

år 2019, Ishay-Ronen et al. framgångsrikt konverterade invasiva bröstcancerceller till funktionella adipocyter för att förhindra metastasering via liten molekylinduktion av epitel–mesenkymal övergång (EMT) och omdifferentiering. EMT är en välkänd omprogrammeringsprocess som kan förbättra cellulär plasticitet . Som tidigare visat är omprogrammeringsprocessen för att generera pluripotenta cancerceller vanligtvis associerad med potentialen att ytterligare differentiera till olika linjer med normala cellulära funktioner via transkriptionsfaktor eller induktion av små molekyler . Således, Ishay-Ronen et al. inducerad EMT genom att behandla Py2T – bröstcancerceller med transformerande tillväxtfaktor-beta (TGF-Xiaomi) in vitro och differentierade de omprogrammerade Py2T-cellerna till funktionella adipocyter genom att använda insulin, dexametason, rosiglitazon och benmorfogenetiskt protein 2 (BMP2). Resultaten avslöjade att de omprogrammerade Py2T-cellerna kunde induceras att genomgå adipogenes med en cocktail av små molekyler. Efter minst 20 dagars behandling med TGF-bronkiolit och adipogenes-inducerande faktorer uttryckte de omprogrammerade Py2T-cellerna med mesenkymala egenskaper signifikant högre C/EBPa och CCAAT/enhancer-bindande protein beta (C/EBP bronkiolit), som var regulatorer av adipogenes, jämfört med deras motsvarigheter med epiteliala egenskaper. Den mångsidiga pluripotensen hos de omprogrammerade bröstcancercellerna bekräftades av annan mesenkymrelaterad differentiering inklusive osteogenes och kondrogenes med detektion av osteo-och kondrospecifika markörer såsom transkriptionsfaktor Sp7 (Osterix), kollagen typ II och könsbestämmande region Y-box 9 (SOX9). Dessutom använde de MTflECad (epithelial) och Mt Ovaricad (mesenkymala) murina modeller för att testa effektiviteten och specificiteten hos EMT-relaterade omprogrammerings-och omdifferentieringsprocesser. In vitro-inducerad omprogrammering av TGF-bronkiolit och in vivo Cre-rekombinasmedierad omprogrammering visade båda att cirka 60% av bröstcancercellerna uttryckte C/EBPa+. Resultaten bekräftade att TGF-Macau spelade en viktig roll för att reglera den EMT-relaterade omprogrammeringsprocessen och mesenkymala egenskaper hos cancerceller både in vitro och in vivo. Dessutom ledde kombinatorisk behandling med trametinib och rosiglitazon i musmodellen till effektiv adipogenes in vivo av de omprogrammerade bröstcancercellerna. Eftersom trametinib och rosiglitazon är USA. Food and Drug Administration (FDA)-godkända läkemedel för att inducera EMT och adipogenes, med hjälp av dem som medlare i CancerCell omprogrammering terapi är kliniskt mer genomförbart jämfört med metoder som använder andra medlare . De signifikanta fördelarna med denna studie är inte bara för identifiering av de små molekylerna vid reglering av bröstcancercell omprogrammering och omdifferentiering utan också för etablering av en replikerbar modell som kan utnyttjas vid utvärdering av cancercell omprogrammering i många andra typer av cancer med olika linjer. Eliminering av invasiva mesenkymala cancerceller genom liten molekylmedierad cancercell omprogrammering terapi kan behandla förvärvad kemo – / radioresistens och cancermetastaser, men specificiteten av trametinib plus rosiglitazon behandling och förebyggande av biverkningar bör undersökas ytterligare i senare studier .

Som noterat verkar cellulär apoptos under omprogrammering av cancerceller vara opåverkad av de små molekylerna, liksom cellulär proliferation. Till exempel förlängs tiden för G0/G1-fasen och cellcykelfrämjande gener undertrycks, vilket indikerar att förbättringen av benignitet har inträffat . Liten molekylmedierad cancercell omprogrammering ger ett icke-viralt och icke-integrerat tillvägagångssätt för att inducera övergången från cancerceller till godartade celler. Som en av de potentiella strategierna har en sådan omprogrammeringsmetod ett stort löfte att effektivt undertrycka utveckling och återfall av olika maligniteter.

hittills står framsteg inom omprogrammering av cancerceller inför många utmaningar. För det första består vissa typer av cancer (såsom nasofaryngealt karcinom) av en stor subpopulation av odifferentierade cancerceller, vilket gör sådana cancerceller svåra att omprogrammeras till godartade celler på grund av in situ tumör heterogenitet . Direkt omprogrammering kan vara ett potentiellt genomförbart tillvägagångssätt som kan tillämpas på dessa typer av cancer, men det har inte funnits några lovande bevis hittills . För det andra finns det många små molekyler som kan fungera som utmärkta kandidater vid omprogrammering av cancerceller in vitro, men endast få av dem har officiellt godkänts av USA. FDA, eftersom varje litet molekylärt läkemedel måste strikt granskas baserat på dess fördelar och potentiella risker för de avsedda patienterna . Framtida undersökningar bör koncentrera sig på att utveckla farmakologiska medel-medierad cancercell omprogrammering för att minimera säkerhets-och effektivitetsproblem. Dessutom är funktionerna hos små biokemiska molekyler inte tillräckligt specifika, vilket tyder på potentiella off-target-effekter kan ibland hända under omprogrammering . Dessutom bör doseringen av små molekyler för att inducera omprogrammering och differentiering av cancerceller in vivo undersökas noggrant för att undvika potentiellt skadliga biverkningar hos patienter. Därför är det angeläget att exakt dechiffrera de molekylära mekanismerna för omprogrammering av cancerceller för att lindra biverkningarna. Det anser att det är nödvändigt att använda en effektiv leveransmetod för omprogrammering-associerade små molekyler eftersom många behandlingsfel inte har uppstått på grund av läkemedlets ineffektivitet, men ineffektiviteten av läkemedelsleverans .

mikroRNA och exosome-medierad cancercell omprogrammering: nya alternativ

det har rapporterats att mikroRNA, inklusive miRNA302s , miRNA200c , miRNA369 , miRNA34a och miRNA30b , är avgörande för att förbättra uttrycket av pluripotensassocierade gener. MikroRNA har betraktats som användbara biomarkörer och molekylära sonder för att rikta in sig på specifika celltyper och för att manipulera cell omprogrammering. Men för att exakt och effektivt reglera cellövergången för att behandla maligniteter genom att utnyttja mikroRNA förblir utmanande hittills.

Lin et al. först visade att mänskliga hudcancerceller kunde omprogrammeras till IPSC med hjälp av mikroRNA-302S, som uttrycks rikligt i mänskliga Esc men snabbt försvann efter differentiering. Det har rapporterats att pluripotenta cancerceller med mikroRNA-302S transfektion uppvisar minskad tumörgenicitet, genomisk demetylering och förhöjda uttryck av SSEA-3/4, SOX2, NANOG och Oct-3/4. Eftersom storleken på mikroRNA – 302S endast var cirka 1 kb nådde transfektionseffektiviteten > 99% baserat på flödescytometrianalyser, vilket tyder på att storleken på en exogen faktor spelade en viktig roll i transfektionseffektivitet . Emellertid omprogrammerades endast 2% -5% av cancercellerna framgångsrikt till pluripotenta ES – liknande celler. Genuttrycksanalys avslöjade att de pluripotenta ES – liknande cellerna visade mer än 86% likhet med humana ES-cellinjer H1 och H9. Under lineage-specifik differentiering-inducerande media, cancer-härledda ES-liknande celler differentieras ytterligare till godartade celler, inklusive neuroner, kondrocyter och fibroblaster. MikroRNA-200-familjen har också visat sig förbättra EMT via inriktning på zinkfinger E-box-bindande homeobox 1 (ZEB1)-axeln, som är känd för att hämma tumörsuppressorgenen E-cadherin . I humana koloncancerceller har medlemmar som tillhör microRNA34-familjen bevisats som nya transkriptionsmål för tumörsuppressorgen p53 .

exosomer har förmågan att hysa komponenter som efterliknar konstitutionen för den embryonala mikromiljön . ESC-relaterade omprogrammeringsfaktorer är inneslutna i mänskliga ESC-härledda exosomer och kan levereras till cancerceller för att inducera övergången från malignitet till benignitet. I 2017, Zhou et al. visade att mänskliga ESC-härledda exosomer kunde hämma cancerproliferation in vitro och lindra tumörgenicitet in vivo. När Colo-320 och MCF-7 cancercellinjer odlades i ESC-konditionerat medium uppvisade de omuttryck av pluripotensassocierade markörer, inklusive Oct-4, NANOG och SOX2 och reduktion av tumörgenicitet in vitro, vilket indikerar framgångsrik omprogrammering från malignitet till benignitet. Cirka 90% av bröstcancercellerna förlorade vimentinuttryck efter exponering för ESC-konditionerat medium, medan omprogrammeringseffektiviteten hos de kolorektala cancercellerna inte bestämdes. Resultaten föreslog att exosomer kunde undertrycka onkogenes genom att främja uttrycksnivåerna för kritiska pluripotensassocierade markörer. Därefter kunde cancerceller återställas till en pluripotent status och återställa godartade differentieringsvägar. De cancer-härledda ES – liknande cellerna var emellertid inte fria från tumörbildning in vivo, och 60% tumörstorleksreduktion observerades med cancerceller behandlade med ESC-härledda exosomer. Villkorligt medium innehållande exosomer inhiberade cancerproliferation via förlängning av tiden i G1-fas, medan sänkning av tiden i S-och G2/M-faser. Zhou et al. fann också att expressionsnivån för cyklin D1 reducerades för att upprätthålla retinoblastomhypofosforylering efter behandling av konditionerat medium, vilket ledde till hämning av G1/S-fasövergång . Dessutom reducerades fosforylering vid serinrest 10 i Histon H3, som en av de vitala epigenetiska modifieringarna under G2-fasen, signifikant . I överensstämmelse med tidigare fynd har olika ämnen från human embryonal mikromiljö potential att hämma cancerprogression och lindra tumörgenicitet in vivo .