Prezentare generală

fierul joacă un rol vital în majoritatea organismelor datorită capacității sale de a cataliza transferul de electroni, o parte vitală a reacțiilor metabolice în mitocondrii în timpul producției de energie. În plus, la mamifere, fierul este o componentă cheie a hemoglobinei, permițând transportul oxigenului către țesuturi prin intermediul globulelor roșii. Fierul liber este potențial toxic datorită capacității sale de a cataliza generarea de radicali liberi dăunători. Din acest motiv, fierul este de obicei legat de proteine ca parte a grupărilor heme sau a centrelor de fier-sulf pentru activitate funcțională. Fierul nefuncțional este legat de proteinele purtătoare sau de depozitare, dar poate fi atașat mai slab de alte proteine într-o formă labilă. Controlul atent al distribuției fierului la om nu numai că reglează disponibilitatea și toxicitatea, dar joacă și un rol în răspunsul imun. În timpul infecției, organismul sechestrează fierul disponibil pentru a preveni utilizarea acestuia prin invadarea bacteriilor, limitând semnificativ capacitatea lor de a crește și de a se multiplica.

unul dintre controlorii cheie ai transportului fierului în celule este CD71, cunoscut și sub numele de receptorul transferinei 1. Figura 1 rezumă rolul său în transportul fierului din lichidul tisular sau plasmă în celulă. Fierul „liber”, sub formă de Fe(III) se leagă de transferină, care în sine devine un ligand pentru CD71 legat de membrană. Complexul Fe (III)-transferină-CD71 este apoi endocitozat într-un endozom care este acidificat prin acțiunea pompelor ionice. În mediul acid, complexul se disociază în părțile sale componente. CD71 și transferina sunt reciclate înapoi la suprafață, în timp ce Fe(III) este redus la Fe(II) prin activitatea METALOPROTEAZĂ3. Fe (II) poate fi apoi exportat din endozom de către proteina DMT1 (transportor metalic bivalent 1). În citoplasmă, Fe (II) se poate asocia cu feritina și poate fi depozitat pentru utilizare ulterioară; procesat în mitocondrii pentru sinteza grupărilor heme și a compușilor Fe-s; sau eliberat înapoi în mediul extracelular prin acțiunea ferroportinei. Eliberarea Fe (II) de către ferroportin este controlată negativ de hormonul hepcidină din ficat, de exemplu în timpul inflamației pentru a limita disponibilitatea fierului la agenții patogeni. Fierul FE(II) eliberat poate fi apoi transformat înapoi în forma Fe(III) de proteinele plasmatice, cum ar fi ceruloplasmina.

Fig. 1. Rolul receptorului transferinei 1 în transportul fierului în celule.

studiul transportului fierului

Bio-Rad vinde o serie de anticorpi împotriva proteinelor implicate în homeostazia fierului.

Target	Human	Mouse	Rat
CD71/TfR1	MCA1148, MCA2775, VMA00037	MCA1033, MCA2474	MCA155
Transferrin	9100-0004, 9100-1055, AHP081, AHP1757, AHP858, VMA00578, VPA00797	AHP081	9100-1055, AHP081
Ferritin	4420-4804, 4420-3010, 4420-3904GA, 4420-4804, AHP2179, OBT1639
Ceruloplasmin
Proerythroblasts / Erythrocytes	MCA506G	MCA6044G

Flow Cytometry Analysis of Key Iron Transport Marker CD71

Rat Anti-Mouse CD71 Antibody, clone 8D3 recognizes mouse CD71, a 763 amino acid ~95 kDa single pass type II suprafața celulelor glicoproteice transmembranare, altfel cunoscută sub numele de receptor de transferină. CD71 este exprimat pe celule din linia eritroidă, dar lipsit de majoritatea eritrocitelor mature. Clona 8D3 recunoaște formele native, solubile și denaturate ale CD71 murin. Legarea anticorpului 8D3 la CD71 nu interferează cu absorbția fierului în celule. Șobolan anti-șoarece ter-119 / celule eritroide anticorp, clona TER-119 recunoaște TER-119, de asemenea, cunoscut sub numele de Ly-76. Clona TER-119 detectează o proteină de 52 kDa care este asociată cu glicoforina a exprimată pe suprafața celulei. TER-119 este un antigen specific eritroidelor exprimat de la proeritroblastul timpuriu până la stadiul eritrocitar Matur. Acest antigen este, de asemenea, exprimat într-o măsură mai mică pe 20-25% din celulele măduvei osoase și 2-3% din celulele splinei. Acești markeri cheie au fost utilizați împreună în citometria de flux (Figura 2) pentru a arăta CD71 necesar pentru importul FE pentru a sintetiza hemoglobina în proeritroblastele pozitive TER-119.

Fig. 2. Analiza citometriei în flux a markerilor de transport tron de șoarece CD71 și TER-119. A, RPE conjugat șobolan Anti-șoarece ter-119 (MCA6044PE) anticorp și FITC conjugat șobolan Igg2a Izotip de Control (MCA1212F). B, RPE conjugat șobolan anti-șoarece ter-119 (MCA6044PE) anticorp și FITC conjugat șobolan anti-șoarece CD71 (MCA2474F) anticorp. Toate experimentele efectuate pe măduva osoasă de șoarece. Datele obținute de la analizorul de celule ZE5-inkt.