fundal& obiective: boala celiacă ar putea fi tratată și potențial vindecată prin restabilirea toleranței celulelor T la gliadină. Am investigat siguranța și eficacitatea nanoparticulelor Poly(lactide-Co-glicolide) încărcate negativ de 500 nm încapsulând proteina gliadină (TIMP-GLIA) în 3 modele de șoarece de boală celiacă. S-a demonstrat că absorbția acestor nanoparticule de către celulele care prezintă antigen induce toleranță imună la alte modele animale de boală autoimună.
metode: am efectuat studii cu șoareci c57bl/ 6; RAG1 -/ – (C57BL / 6); și HLA-DQ8, hucd4 transgenici Ab0 NOD. Șoarecilor li s-au administrat 1 sau 2 injecții cu venă coadă de TIMP-GLIA sau nanoparticule de control. Unii șoareci au primit injecții intradermice de gliadină în adjuvant complet Freund (imunizare) sau de gliadină solubilă sau ovalbumină (provocarea urechii). Șoarecii RAG -/-au primit injecții intraperitoneale de celule T CD4+CD62L-CD44hi de la șoareci c57bl/6 imunizați cu gliadină și au fost hrăniți cu o dietă pe bază de AIN-76a care conține gluten de grâu (provocare orală) sau fără gluten. Celulele splinei sau ganglionilor limfatici au fost analizate în teste de proliferare și secreție de citokine sau prin citometrie în flux, secvențiere ARN sau reacție cantitativă în timp real a polimerazei în lanț. Probele serice au fost analizate prin testul imunosorbent legat de anticorpi gliadinici, iar țesuturile intestinale au fost analizate prin histologie. Celulele mononucleare din sângele periferic uman sau celulele dendritice imature derivate din celulele mononucleare din sângele periferic uman au fost cultivate în mediu care conține TIMP-GLIA, anticorp anti-CD3 sau lipopolizaharidă (controale) și analizate în teste de proliferare și secreție de citokine sau prin citometrie în flux. Sângele integral sau plasma de la voluntari sănătoși a fost incubată cu TIMPGLIA și au fost analizate hemoliza, activarea și agregarea plachetară și activarea sau coagularea complementului.
rezultate: TIMP-GLIA nu a crescut markerii de maturare pe celulele dendritice umane cultivate și nici nu a indus activarea celulelor T de la pacienții cu boală celiacă activă sau tratată. În hipersensibilitatea de tip întârziat (modelul 1), modelele transgenice HLA-DQ8 (modelul 2) și enteropatia celulelor T cu memorie gliadină (modelul 3) ale bolii celiace, injecțiile intravenoase de TIMP-GLIA au scăzut semnificativ proliferarea celulelor T specifice gliadinei (la modelele 1 și 2), secreția inflamatorie de citokine (la modelele 1, 2 și 3), IgG/IgG2c circulant specific gliadinei (la modelele 1 și 2), umflarea urechii (la modelul 1), enteropatia 3) și pierderea în greutate corporală (în modelul 3). În modelul 1, efectele s-au dovedit a fi dependente de doză. Splenocitele de la șoarecii transgenici HLA-DQ8 cărora li s-au administrat nanoparticule TIMP-GLIA, dar care nu controlează nanoparticulele, au avut niveluri crescute de FOXP3 și semnături de Expresie genică asociate cu inducerea toleranței.
concluzii: la șoarecii cu sensibilitate la gliadină, injectarea de nanoparticule TIMP-GLIA a indus lipsa de reacție la gliadină și a redus markerii inflamației și enteropatiei. Această strategie ar putea fi dezvoltată pentru tratamentul bolii celiace.
