InVivoMAb anti-mouse CSF1R (CD115) (Clone: AFS98)

Bauche, D., et al. (2018). „LAG3(+) Regulatory T Cells Restrain Interleukin-23-Producing CX3CR1(+) Gut-Resident Macrophages during Group 3 Innate Lymphoid Cell-Driven Colitis.” Immunity 49(2): 342-352 e345. PubMed

Interleukin-22 (IL-22)-producing group 3 innate lymphoid cells (ILC3) maintains gut homeostasis but can also promote inflammatory bowel disease (IBD). The regulation of ILC3-dependent colitis remains to be elucidated. Aici arătăm că celulele T reglatoare Foxp3 ( + ) (celulele Treg) au prevenit colita mediată de ILC3 într-o manieră independentă de IL-10. Celulele Treg au inhibat producția de IL-23 și IL-1BETA din macrofage cx3cr1(+) rezidente intestinale, dar nu celulele dendritice CD103 (+). Mai mult, celulele Treg au restrâns producția de ILC3 de IL-22 prin suprimarea producției de macrofage CX3CR1(+) de IL-23 și IL-1BETA. Această suprimare a fost dependentă de contact și a fost mediată de gena de activare latentă-3 (LAG-3)-un receptor de punct de control imunitar-exprimat pe celulele Treg. Implicarea LAG-3 pe MHC clasa II a condus la imunosupresia profundă a macrofagelor rezidente în țesut CX3CR1 (+). Studiul nostru arată că sănătatea mucoasei intestinale este menținută de o axă condusă de comunicarea celulelor Treg cu macrofagele rezidente care rețin stimulii inflamatori necesari pentru funcția ILC3.

Gordon, S. R., și colab. (2017). „Expresia PD-1 prin macrofage asociate tumorii inhibă fagocitoza și imunitatea tumorală.”Natură 545 (7655): 495-499. PubMed

proteina de moarte celulară programată 1 (PD-1) este un receptor de control imunitar care este reglat în sus pe celulele T activate pentru inducerea toleranței imune. Celulele tumorale supraexprimă frecvent ligandul pentru PD-1, ligand de moarte celulară programată 1 (PD-L1), facilitând evadarea lor din sistemul imunitar. Anticorpii monoclonali care blochează interacțiunea dintre PD-1 și PD-L1, prin legarea fie de ligand, fie de receptor, au demonstrat eficacitate clinică notabilă la pacienții cu o varietate de tipuri de cancer, inclusiv melanom, cancer colorectal, cancer pulmonar cu celule mici și limfom Hodgkin. Deși este bine stabilit că blocarea PD-1-PD-L1 activează celulele T, se știe puțin despre rolul pe care această cale îl poate avea în macrofagele asociate tumorilor (Tam). Aici arătăm că atât Tam-urile mouse-ului, cât și cele umane exprimă PD-1. Expresia TAM PD-1 crește în timp în modelele de cancer la șoarece și cu creșterea stadiului bolii în cancerele umane primare. Expresia TAM PD-1 se corelează negativ cu potența fagocitară împotriva celulelor tumorale, iar blocarea PD-1-PD-L1 in vivo crește fagocitoza macrofagelor, reduce creșterea tumorii și prelungește supraviețuirea șoarecilor la modelele de cancer la șoarece într-un mod dependent de macrofage. Acest lucru sugerează că Terapiile PD-1-PD-L1 pot funcționa, de asemenea, printr-un efect direct asupra macrofagelor, cu implicații substanțiale pentru tratamentul cancerului cu acești agenți.

Moynihan, K. D., și colab. (2016). „Eradicarea tumorilor mari stabilite la șoareci prin imunoterapie combinată care implică răspunsuri imune înnăscute și adaptive.”Nat Med. doi: 10.1038 / nm.4200. PubMed

blocarea punctului de control cu anticorpi specifici pentru proteina citotoxică asociată limfocitelor T (CTLA)-4 sau moartea celulară programată 1 (PDCD1; cunoscută și sub numele de PD-1) provoacă o regresie tumorală durabilă în cancerul metastatic, dar aceste răspunsuri dramatice sunt limitate la o minoritate de pacienți. Acest rezultat suboptimal se datorează probabil în parte rețelei complexe de căi imunosupresoare prezente în tumorile avansate, care este puțin probabil să fie depășite prin intervenție la un singur punct de control de semnalizare. Aici descriem o imunoterapie combinată care recrutează o varietate de celule imune înnăscute și adaptive pentru a elimina sarcinile tumorale mari în modelele tumorale syngeneice și un model de melanom de șoarece modificat genetic; din cunoștințele noastre, tumorile de această dimensiune nu au fost anterior vindecabile prin tratamente bazate pe imunitatea endogenă. Eficacitatea antitumorală maximă a necesitat patru componente: un anticorp care vizează antigenul tumoral, un interleukin-2 recombinant cu un timp de înjumătățire prelungit, anti-PD-1 și un vaccin puternic cu celule T. Experimentele de epuizare au arătat că celulele T CD8+, celulele dendritice cu prezentare încrucișată și alte câteva subseturi de celule imune înnăscute au fost necesare pentru regresia tumorii. Tratamentul eficient a indus infiltrarea celulelor imune și producerea de citokine inflamatorii în tumoare, a sporit absorbția antigenului tumoral mediată de anticorpi și a promovat răspândirea antigenului. Aceste rezultate demonstrează capacitatea unui răspuns imun endogen provocat de a distruge tumorile mari și stabilite și de a elucida caracteristicile esențiale ale imunoterapiilor combinate care sunt capabile să vindece majoritatea tumorilor în medii experimentale considerate de obicei ca fiind intractabile.

Arnold, I. C. și colab. (2015). „Monocitele/macrofagele CD11c promovează inflamația intestinală cronică indusă de Helicobacter hepaticus prin producerea de IL-23.”Mucoasa Immunol. doi: 10.1038 / mi.2015.65. PubMed

în bolile inflamatorii intestinale, o defalcare a interacțiunilor microbiene gazdă însoțește activarea susținută a celulelor imune din intestin. Studiile funcționale sugerează un rol cheie pentru interleukina-23 (IL-23) în orchestrarea inflamației intestinale. IL-23 poate fi produs de diverse fagocite mononucleare (MNP) în urma stimulării microbiene acute, dar se știe puțin despre sursele celulare cheie ale IL-23 care conduc inflamația intestinală cronică. Aici am abordat această întrebare folosind un model fiziologic de colită bazată pe bacterii. Prin combinarea ablației genetice condiționate și a profilării expresiei genetice, am constatat că producția de IL-23 de către CD11c+ MNPs a fost esențială pentru declanșarea imunopatologiei intestinale și a identificat MHCII+ monocite și macrofage ca sursă majoră de IL-23. Expresia IL-23 de către monocite a fost dobândită în timpul diferențierii lor în intestin și corelată cu expresia complexului major de histocompatibilitate clasa II (MHCII) și CD64. În schimb, celulele CD103 + CD11b-dendritice dependente de Batf3 au fost dispensabile pentru colita indusă de bacterii în acest model. Aceste studii consolidează rolul patogen al monocitelor în răspunsurile dysregulate la bacteriile intestinale și identifică producția de IL-23 ca o componentă cheie a acestui răspuns. Înțelegerea în continuare a surselor funcționale ale IL-23 în diverse forme de inflamație intestinală poate duce la noi strategii terapeutice menite să întrerupă patologia imună condusă de IL-23.Imunologie mucoaselor advance publicarea online 5 August 2015. doi: 10.1038 / mi.2015.65.

Conde, P., și colab. (2015). „Macrofagele DC-SIGN (+) controlează inducerea toleranței la transplant.”Imunitatea 42 (6): 1143-1158. PubMed

celulele efectoare de țesut din linia monocitelor se pot diferenția în diferite tipuri de celule cu funcție celulară specifică în funcție de mediul lor. Fenotipul, cerințele de dezvoltare și mecanismele funcționale ale macrofagelor protectoare imune care mediază inducerea toleranței la transplant rămân evazive. Aici, demonstrăm că blocada costimulatoare a favorizat acumularea de macrofage care exprimă semne DC care au inhibat imunitatea celulelor T CD8 (+) și au promovat expansiunea celulelor treg CD4 (+) Foxp3 ( + ) în număr. Din punct de vedere mecanic, implicarea simultană a semnului DC de către liganzi fucosilați și semnalizarea TLR4 a fost necesară pentru producerea IL-10 imunoregulator asociat cu supraviețuirea prelungită a alogrefei. Eliminarea macrofagelor care exprimă semne DC in vivo, interferând cu dezvoltarea lor dependentă de CSF1 sau împiedicând calea de semnalizare a semnelor DC toleranță abrogată. Împreună, rezultatele oferă noi perspective asupra efectelor tolerogene ale blocadei costimulatoare și identifică macrofagele supresive DC-SIGN(+) ca mediatori cruciali ai toleranței imunologice cu implicațiile terapeutice concomitente în clinică.

Kaminsky, L. W., și colab. (2015). „Funcția redundantă a celulelor Plasmacitoide și dendritice convenționale este necesară pentru a supraviețui unei infecții virale naturale.”J Virol 89 (19): 9974-9985. Virusurile PubMed

care se răspândesc sistemic dintr-un loc periferic de infecție provoacă morbiditate și mortalitate în populația umană. Celulele mieloide înnăscute, inclusiv monocitele, macrofagele, celulele dendritice derivate din monocite (MO-DC) și celulele dendritice (DC), răspund devreme în timpul infecției virale pentru a controla replicarea virală, reducând răspândirea virusului de la locul periferic. Virusul Ectromelia (ECTV), un ortopoxvirus care infectează în mod natural șoarecele, se răspândește sistemic de la locul periferic al infecției și duce la moartea șoarecilor sensibili. În timp ce celulele fagocitare au un rol necesar în răspunsul la ECTV, cerința pentru populațiile individuale de celule mieloide în timpul răspunsurilor imune acute la infecția virală periferică este neclară. În acest studiu, o varietate de metode de epuizare specifice mieloidelor au fost utilizate pentru a diseca rolurile subseturilor individuale de celule mieloide în supraviețuirea infecției ECTV. Am arătat că DC sunt producătorii primari de interferoni de tip I (T1-IFN), citokine necesare pentru supraviețuire, în urma infecției cu ECTV. DC, dar nu macrofage, monocite sau granulocite, au fost necesare pentru controlul virusului și supraviețuirea șoarecilor după infecția cu ECTV. Epuizarea fie a plasmacitoidului DC (pDC) singur, fie a subsetului DC rezident limfoid (CD8alpha (+) DC) singur nu a conferit susceptibilitate letală la ECTV. Cu toate acestea, funcția a cel puțin unuia dintre subseturile PDC sau CD8alpha(+) DC este necesară pentru supraviețuirea infecției ECTV, deoarece șoarecii epuizați din ambele populații au fost susceptibili la provocarea ECTV. Prezența a cel puțin unuia dintre aceste subseturi DC este suficientă pentru producerea de citokine care reduce replicarea ECTV și răspândirea virusului, facilitând supraviețuirea după infecție. Importanță: înainte de eradicarea virusului variolei, ortopoxvirusul care provoacă variola, o treime din persoanele infectate au cedat bolii. După eradicarea cu succes a variolei, ratele de vaccinare cu vaccinul împotriva variolei au scăzut semnificativ. În prezent există o incidență crescândă a infecțiilor zoonotice cu ortopoxvirus pentru care nu există tratamente eficiente. Mai mult, siguranța vaccinului împotriva variolei este de mare îngrijorare, deoarece pot apărea complicații, ducând la morbiditate. La fel ca mulți viruși care provoacă boli umane semnificative, ortopoxvirusurile se răspândesc dintr-un loc periferic de infecție pentru a deveni sistemice. Acest studiu elucidează cerința timpurie pentru celulele imune înnăscute în controlul unei infecții periferice cu ECTV, agentul cauzal al mousepox. Raportăm că există redundanță în funcția a două subseturi de celule imune înnăscute în controlul răspândirii virusului devreme în timpul infecției. Controlul viral mediat de aceste subseturi celulare prezintă o țintă potențială pentru terapii și proiectarea rațională a vaccinului.

Naik, S., și colab. (2015). „Interacțiunea cu celule comensal-dendritice specifică o semnătură imună unică de protecție a pielii.”Natură 520 (7545): 104-108. PubMed

pielea reprezintă interfața principală dintre gazdă și mediu. Acest organ găzduiește, de asemenea, trilioane de microorganisme care joacă un rol important în homeostazia țesuturilor și imunitatea locală. Comunitățile microbiene ale pielii sunt foarte diverse și pot fi remodelate în timp sau ca răspuns la provocările de mediu. Cum, în contextul acestei complexități, microorganismele comensale individuale pot modula diferențiat imunitatea pielii, iar consecințele acestor răspunsuri pentru fiziologia țesuturilor rămân neclare. Aici arătăm că comensalele definite afectează în mod dominant imunitatea pielii și identifică mediatorii celulari implicați în această specificație. În special, colonizarea cu Staphylococcus epidermidis induce celulele T IL-17A (+) CD8 ( + ) care găzduiesc epiderma, sporesc imunitatea barierei înnăscute și limitează invazia patogenă. Răspunsurile specifice celulelor T comensale rezultă din acțiunea coordonată a subseturilor de celule dendritice rezidente în piele și nu sunt asociate cu inflamația, dezvăluind că celulele rezidente în țesut sunt gata să simtă și să răspundă la modificările comunităților microbiene. Această interacțiune poate reprezenta un mijloc evolutiv prin care sistemul imunitar al pielii utilizează semnale comensale fluctuante pentru a calibra imunitatea barierei și pentru a oferi protecție heterologă împotriva agenților patogeni invazivi. Aceste descoperiri arată că peisajul imunitar al pielii este un mediu extrem de dinamic, care poate fi remodelat rapid și specific prin întâlniri cu comensale definite, descoperiri care au implicații profunde pentru înțelegerea imunității și patologiilor specifice țesuturilor.

Sheng, K. C., și colab. (2014). „IL-3 și CSF-1 interacționează pentru a promova generarea de macrofage producătoare de CD11c+ IL-10.”PLoS Unul 9 (4): e95208. PubMed

dezlegarea mecanismelor hematopoiezei reglementate de citokine multiple rămâne o provocare în hematologie. IL-3 este o citokină alergică cu potențial multiliniar, în timp ce CSF-1 este produs în starea de echilibru cu acoperire descendentă limitată. Aici, am descoperit un rol instructiv al CSF-1 în hematopoieza mediată de IL-3. CSF-1 a promovat în mod semnificativ expansiunea celulară CD11C+ condusă de IL-3 și generarea de bazofile și mastocite umezite din măduva osoasă C57BL/6. Studii suplimentare au indicat faptul că axa CSF-1/CSF-1R a contribuit semnificativ la generarea de celule CD11c+ induse de IL-3 prin îmbunătățirea monopoiezei asociate cu c-Fos. Celulele CD11c + induse de IL-3 sau IL-3/CSF-1 au fost competente în maturarea celulară și endocitoză. Atât celulele IL-3, cât și IL-3/CSF-1 nu aveau aspectul clasic al celulelor dendritice și semănau cu macrofage în morfologie. Ambele populații au produs un nivel ridicat de IL-10, pe lângă IL-1, IL-6 și TNFalpha, ca răspuns la LPS și au fost stimulatori relativ slabi ai celulelor T. În mod colectiv, aceste descoperiri dezvăluie un rol pentru CSF-1 în medierea căii hematopoietice IL-3 prin monopoieză, care reglează expansiunea macrofagelor CD11c+.

Greter, M., și colab. (2012). „GM-CSF controlează homeostazia celulelor dendritice ale țesutului nelimfoid, dar este dispensabilă pentru diferențierea celulelor dendritice inflamatorii.”Imunitatea 36 (6): 1031-1046. PubMed

GM-CSF (Csf-2) este o citokină critică pentru generarea in vitro a celulelor dendritice (DCs) și se crede că controlează dezvoltarea DCs inflamatorii și a DCS rezidente CD103(+) în unele țesuturi. Aici am arătat că, spre deosebire de înțelegerea actuală, receptorul Csf-2 acționează în starea de echilibru pentru a promova supraviețuirea și homeostazia CD103 rezidentă a țesutului nelimfoid(+) și CD11b(+) DCs. Absența receptorului Csf-2 pe DCS pulmonar a abrogat inducerea imunității celulelor T CD8(+) după imunizarea cu antigene de particule. În schimb, receptorul Csf-2 a fost dispensabil pentru diferențierea și funcția înnăscută a DCs inflamatorii în timpul leziunilor acute. În schimb, DCS inflamator a necesitat receptorul Csf-1 pentru dezvoltarea lor. Astfel, Csf-2 este important în imunitatea celulelor T CD8(+) indusă de vaccin prin reglarea homeostaziei DC a țesutului nelimfoid, mai degrabă decât controlul DCs inflamator in vivo.

Li, W., și colab. (2012). „Imagistica intravitală cu 2 fotoni a traficului de leucocite în bătăile inimii.”J Clin Invest 122 (7): 2499-2508. Microscopia intravitală cu doi fotoni a lărgit substanțial înțelegerea diferențelor specifice țesuturilor și organelor în reglarea răspunsurilor inflamatorii. Cu toate acestea, se știe puțin despre reglarea dinamică a recrutării leucocitelor în țesutul cardiac inflamat, în mare parte datorită dificultăților tehnice inerente țesutului în mișcare imagistică. Aici, raportăm o metodă de imagistică care bate inimile murine folosind microscopie intravitală cu 2 fotoni. Folosind această metodă, am vizualizat traficul de neutrofile la momentul inițial și în timpul inflamației. Leziunea de reperfuzie ischemică indusă prin transplant sau ligarea tranzitorie a arterei coronare a dus la recrutarea neutrofilelor în inimă, extravazarea lor din venele coronare și infiltrarea miocardului unde au format clustere mari. Altoirea inimilor care conțin ICAM-1 mutant, un ligand important pentru recrutarea neutrofilelor, a redus viteza de târâre a neutrofilelor în interiorul vaselor și a inhibat semnificativ extravazarea acestora. O afectare similară a fost observată la inhibarea Mac-1, un receptor pentru ICAM-1. Blocarea LFA-1, un alt receptor ICAM-1, a împiedicat aderarea neutrofilelor la endoteliu și extravazarea în grefele cardiace. Deoarece răspunsurile inflamatorii din inimă sunt de mare relevanță pentru sănătatea publică, această abordare imagistică este promițătoare pentru studierea mecanismelor specifice cardiace de recrutare a leucocitelor și identificarea unor ținte terapeutice noi pentru tratarea bolilor de inimă.

Tagliani, E., și colab. (2011). „Coordonarea reglării macrofagelor tisulare și a dinamicii populației celulare dendritice de către CSF-1.”J Exp Med 208 (9): 1901-1916. PubMed

macrofagele tisulare (Mphis) și celulele dendritice (DCs) joacă roluri esențiale în homeostazia țesutului și imunitatea. Modul în care aceste celule sunt menținute la densitățile lor caracteristice în diferite țesuturi a rămas neclar. Ajutat de o nouă tehnică citometrică în flux pentru evaluarea ratelor relative de recrutare a precursorilor transmise de sânge, am examinat dinamica populației Mphi și DC în uterul mouse-ului gravidă, unde creșterea rapidă a țesuturilor a facilitat o disecție a mecanismelor de reglementare subiacente. Demonstrăm modul în care dinamica Mphi și, prin urmare, densitățile țesutului Mphi sunt controlate local de CSF-1, un factor de creștere pleiotropic al cărui nivel de activitate in situ a variat foarte mult între straturile de țesut uterin. CSF-1 a acționat parțial prin inducerea proliferării Mphi și parțial prin stimularea extravazării monocitelor Ly6C(hi) (Mos) care au servit ca precursori Mphi. Recrutarea Mo a fost dependentă de producerea liganzilor receptorilor de chemokină CCR2 de către Mphis uterin ca răspuns la CSF-1. În mod neașteptat, o cale paralelă reglementată de CSF-1, dar independentă de CCR2, a influențat densitățile țesutului uterin DC prin controlul ratelor locale de extravazare pre-DC. Împreună, aceste date oferă o perspectivă celulară și moleculară asupra reglării densităților țesutului Mphi în condiții neinflamatorii și dezvăluie un rol central pentru CSF-1 în coordonarea homeostaziei Mphi și DC.

Lim, A. K. și colab. (2009). „Blocarea anticorpilor c-fms suprimă progresia inflamației și a leziunilor la nefropatia diabetică timpurie la șoarecii obezi db/db.”Diabetologia 52 (8): 1669-1679. PubMed

obiective / ipoteză: leziunea renală mediată de macrofage joacă un rol important în dezvoltarea nefropatiei diabetice. Factorul de stimulare a coloniilor (LCR) -1 este o citokină care este produsă în rinichii diabetici și promovează acumularea, activarea și supraviețuirea macrofagelor. CSF-1 acționează exclusiv prin receptorul c-fms, care este exprimat numai pe celulele liniei monocite-macrofage. Prin urmare, am folosit blocarea c-fms ca strategie pentru a viza selectiv leziunile mediate de macrofage în timpul progresiei nefropatiei diabetice. Metode: Șoarecii obezi, diabetici de tip 2 db / db BL / KS cu albuminurie stabilită au fost tratați cu un anticorp monoclonal anti-c-fms neutralizant (AFS98) sau cu izotip IgG de control corespunzător de la vârsta de 12 până la 18 săptămâni și examinați pentru leziuni renale. Rezultate: tratamentul cu AFS98 nu a afectat obezitatea, hiperglicemia, nivelurile de monocite circulante sau albuminuria stabilită la șoarecii db/db. Cu toate acestea, AFS98 a prevenit hiperfiltrarea glomerulară și a suprimat variabilele de inflamație la nivelul rinichiului diabetic, inclusiv macrofagele renale (acumulare, activare și proliferare), nivelurile de ligand 2 cu motiv cc de chemokină (ARNm și proteine urinare), activarea renală a căilor proinflamatorii (kinaza amino-terminală c-Jun și factorul de transcripție activator 2) și nivelurile ARNm Tnf-alfa (cunoscut și sub numele de Tnf). În plus, AFS98 a scăzut leziunile tisulare cauzate de macrofage, inclusiv leziunile tubulare (apoptoză și hipertrofie), leziunile interstițiale (proliferarea celulară și acumularea de miofibroblaste) și fibroza renală (ARNm TGF-beta1 și Col4a1). Concluzii / interpretare: blocarea c-fms poate suprima progresia nefropatiei diabetice stabilite la șoarecii db/db prin direcționarea leziunilor mediate de macrofage.