TEXT

Chlamydia trachomatis și Neisseria gonorrhoeae sunt cele mai răspândite infecții bacteriene cu transmitere sexuală (ITS) din lume (1). Cursul acestor infecții este imprevizibil și divers (2-7). Majoritatea infecțiilor la femei sunt asimptomatice și rămân frecvent nerecunoscute, ceea ce crește riscul de complicații ale tractului reproductiv (6, 8-10). O perspectivă asupra mecanismelor care determină povara acestor infecții este esențială pentru Controlul Bolilor. În plus față de vârstă, infecția cu HIV și factorii comportamentali, caracteristicile microbiologice, inclusiv încărcătura bacteriană, pot juca un rol important în riscul de transmitere, prezentarea clinică și evoluția infecției (6, 11-14). Sarcina chlamydială a fost asociată cu prezentarea clinică, severitatea infecției și transmisibilitatea la modelele animale și la pacienții cu infecție oculară cu C. trachomatis (15-17). S-a demonstrat că sarcinile gonoreice diferă între locațiile anatomice și prezentările clinice asociate la bărbați (18). Deși PCR în timp real și cuantificarea încărcăturii ADN au potențialul de a dezvălui noi perspective asupra caracteristicilor infecției, există doar o literatură limitată despre relevanța încărcăturii bacteriene și frecvența its concurente la femei (19, 20). Cunoașterea caracteristicilor microbiologice ale infecției ar putea contribui la îmbunătățirea înțelegerii diferențelor de prevalență a ITS la nivelul populației. Acest studiu a urmărit să evalueze concurența și încărcăturile bacteriene ale infecțiilor genitale și anorectale cu C. trachomatis și N. gonorrhoeae la femeile din Africa de Sud dintr-un cadru de prevalență ridicată a HIV.

acest studiu a fost o subanaliză a unui studiu transversal descris anterior pe 604 de femei din districtul rural Mopani, Africa de Sud (21). Pe scurt, femeile cu vârsta cuprinsă între 18 și 49 de ani care au raportat activitate sexuală în ultimele 6 luni au fost eligibile. Chestionarele au fost completate, iar tampoanele vaginale, anorectale și faringiene (Copan Diagnostics, Brescia, Italia) au fost obținute de lucrătorii din domeniul sănătății și depozitate la -20 C. menstruația în ziua recrutării și refuzul de a avea toate cele trei site-uri anatomice testate au fost criterii de excludere. Femeile simptomatice au fost tratate în aceeași zi conform protocoalelor locale de tratament, care includ o fișă de notificare pentru partener. Femeile asimptomatice cu its dovedite prin detecție moleculară au fost chemate să se întoarcă la clinică pentru un tratament specific. Pentru evaluarea prezentată în acest articol, am selectat toate femeile (n = 263) infectate vaginal și/sau anorectal cu cel puțin unul dintre următorii agenți patogeni: C. trachomatis (n = 107), N. gonorrhoeae (n = 66), Mycoplasma genitalium (n = 66) și Trichomonas vaginalis (n = 116). Deoarece am observat o singură femeie cu infecție orofaringiană, am exclus această locație anatomică din analizele ulterioare. Comitetul de cercetare a eticii Umane al Universității din Witwatersrand, Africa de Sud, a aprobat studiul (referința nr. M110726), inclusiv testarea M. genitalium și T. vaginalis.

tampoanele uscate au fost transportate pe gheață uscată pentru a efectua analize de laborator la laboratorul de imunogenetică, Centrul Medical Universitar VU, Amsterdam, Olanda. ADN-ul bacterian a fost extras folosind un kit de preparare a șablonului PCR pur (Roche Diagnostics, Indianapolis, IN) urmat de detectarea PCR în timp real A C. trachomatis, N. gonorrhoeae și T. vaginalis folosind un test PrestoPluS CT-ng-TV (Microbiome Ltd., Amsterdam, țările de Jos) și un kit PCR LightMix în timp real (TIB Molbiol, Berlin, Germania) pentru M. genitalium, așa cum este descris în altă parte (21, 22) (D. J. de Waaij, J. H. Dubbink, R. P. H. Peters, S. Ouburg și S. A. Morr, date nepublicate). Sarcina ADN bacteriană a C. trachomatis și N. gonorrhoeae a fost calculată după cum urmează. Valoarea Cp( punctul de trecere), adică numărul de cicluri de amplificare înainte de atingerea unui prag standardizat, a fost legată de o curbă de calibrare a unei cantități cunoscute de ADN C. trachomatis și N. cantitatea de ADN gonorrhoeae pentru a determina cantitatea de ADN bacterian. În analiza noastră, încărcătura bacteriană este furnizată ca logaritm al numărului de unități formatoare de incluziune (IFU) pe nanoliter pentru C. trachomatis și ca logaritm al numărului de copii pe microliter pentru N. gonorrhoeae. Analizele statistice au fost efectuate folosind testul chi-square sau testul exact al lui Fisher și testul U Mann-Whitney pentru a compara variabilele dihotomice și continue între grupuri. O valoare P Mai mică de 0,05 a fost considerată semnificativă statistic pentru toate testele.dintre cele 263 de femei cu its genitală și/sau anorectală, 247 (94%) au avut its genitală și 73 (27%) o its anorectală. Vârsta medie a tuturor femeilor (n = 263) a fost de 29 (interval, 18 până la 49) de ani, iar infecția cu HIV a fost raportată cu 33%, în timp ce 44% au raportat testarea HIV negativă în ultimele 6 luni și 24% nu și-au cunoscut statutul. Felația a fost raportată de 13% dintre femei și actul sexual anal receptiv (RAI) cu 5,5%.

distribuția microorganismelor genitale este prezentată în Fig. 1. Infecția anorectală a fost cauzată la 64 (88%)/73 de femei de un singur microorganism: C. trachomatis în 34/43, N. gonorrhoeae în 9/15, M. genitalium în 16/17 și T. vaginalis în 5/7. Infecțiile unice au fost semnificativ mai frecvente la nivelul anorectal decât la nivelul locului genital (88% față de 74%, P = 0, 013). Dintre cele 107 femei cu infecție cu C. trachomatis, 32 (30%) femei au avut o infecție dublă (infecție combinată genitală și rectală). Dintre cele 66 de femei cu infecție cu N. gonorrhoeae, 9 (14%) femei au avut o infecție dublă. În cadrul celor 66 și 116 femei cu o infecție cu M. genitalium și o infecție cu T. vaginalis, 3 (4,5%) și 4 (3,4%) femei au avut o infecție dublă, respectiv.

sarcina mediană a C. trachomatis genital a fost de 2, 7 log10 IFU/nl (interval, 0, 36 până la 4, 5), iar cea a C. trachomatis anorectal a fost de 2, 5 log10 IFU / nl (interval, 0, 58 până la 3, 6). Pentru N. gonorrhoeae, sarcina mediană a infecției genitale a fost de 2,7 log10 copii/ilft (interval, 1,6 până la 8,0), iar cea a infecției rectale a fost de 4,4 log10 copii/ilft (interval, 2,2 până la 6,3). Caracteristicile și asociațiile încărcăturii bacteriene genitale și rectale sunt prezentate în tabelul 1. În analizele multivariate, vârsta de 24 de ani (p = 0,009) și sarcina (P = 0,023) au fost asociate independent cu o sarcină C. trachomatis mai mare și aceeași grupă de vârstă (P < 0,0001) și au avut mai mult de 1 partener sexual în ultimele 6 luni (P = 0,029) cu o sarcină N. gonorrhoeae mai mare. Asocierea unei relații concurente în ultimul an cu sarcina N. gonorrhoeae nu s-a mai manifestat în analiza multivariată (P = 0,32).

Acest raport descrie concurența its și încărcarea ADN-ului bacterian la femeile din Africa de Sud cu Chlamydia genitală și anorectală infecția cu trachomatis și Neisseria gonorrhoeae. Au fost publicate doar câteva rapoarte de studii privind aceste caracteristici microbiologice ale infecției și, din cunoștințele noastre, acesta este primul raport al unui studiu realizat într-un cadru rural cu prevalență ridicată a HIV. Am observat că aproape jumătate dintre femeile cu infecție genitală cu C. trachomatis (47%) și infecție cu N. gonorrhoeae (48%) au avut o infecție genitală concomitentă. Deși există cunoștințe limitate despre semnificația infecțiilor mixte, acestea ar putea crește teoretic susceptibilitatea la complicații pe termen lung și transmisibilitatea pentru its individuale. Infecțiile rectale mixte au fost semnificativ mai puțin frecvente în rândul femeilor decât its genitală, deoarece 88% dintre aceste infecții au fost cauzate de un singur microorganism. Explicațiile potențiale ar fi expunerea mai puțin frecventă la infecție, deoarece RAI nu a fost comună în cohorta noastră și susceptibilități diferite ale mucoasei anorectale pentru anumite microorganisme.

femeile cu infecție dublă au avut sarcini genitale C. trachomatis și N. gonorrhoeae semnificativ mai mari decât femeile cu infecție genitală. Din cunoștințele noastre, acest lucru nu a fost raportat înainte și ar putea susține ipoteza autoinoculării prin fluide cervicovaginale de la vagin la rect. Acest rol posibil al spillover-ului ar putea explica prevalența ridicată a infecției anorectale, în ciuda frecvenței scăzute a RAI în studiul nostru (23, 24).

nu am observat nicio diferență semnificativă între încărcăturile bacteriene ale infecțiilor unice și mixte pentru oricare dintre its. În conformitate cu alte două studii bazate pe testul de amplificare a acidului nucleic (NAAT), nu am observat o relație între încărcătura bacteriană și simptomatologia genitală (25, 26). Vodstrcil și colegii săi au observat într-o revizuire recentă că studiile bazate pe cultură sunt mai susceptibile de a găsi o asociere cu semne și simptome decât studiile bazate pe NAAT (89% față de 38%) (27). Acest lucru ar putea fi reflectat de tendința organismelor viabile de a fi mai strâns asociate cu manifestările clinice. Vârsta mai mică și sarcina au fost asociate independent cu o încărcătură bacteriană mai mare de C. trachomatis și vârsta mai mică și având mai mult de un partener sexual în ultimele 6 luni cu o încărcătură mai mare de N. gonorrhoeae. Aceeași relație cu vârsta (pentru C. trachomatis) în mai multe studii NAAT a fost descrisă anterior și s-ar putea datora modificărilor epiteliului cervical sau femeilor mai tinere care sunt mai active sexual și prezintă un comportament mai riscant sau ar putea reflecta imunitatea dobândită la adulți (28-30). Au existat mai multe limitări în studiul nostru. În primul rând, nu am luat în considerare variabilitatea eșantionării prin raportarea sarcinilor corespunzătoare numărului de celule eucariote. Cu toate acestea, deoarece celulele inflamatorii care sunt atrase de locul infecției ar fi incluse printre celulele eșantionate, sarcina per celulă eucariotă ar fi scăzută (25). O a doua limitare poate fi utilizarea specimenelor stocate, dar literatura de specialitate nu prezintă un impact de degradare relevant din punct de vedere clinic (31). O ultimă limitare poate fi reprezentată de femeile care utilizează antimicrobiene, un factor care ne-ar fi putut determina să ne subestimăm într-o oarecare măsură rezultatele, deoarece acesta nu a fost un criteriu de excludere.

În concluzie, acest studiu a evidențiat infecții frecvente concomitente cu C. trachomatis și N. gonorrhoeae și diferențe în încărcăturile bacteriene într-un cadru de prevalență ridicată a HIV. Aceste noi descoperiri ar putea ajuta la explicarea diferențelor în prevalența its la un nivel al populației în care sunt necesare eforturi sporite pentru a controla povara infecțiilor cu C. trachomatis și N. gonorrhoeae.