rezumat

se raportează dezvoltarea unui proces continuu de centrifugare în două etape pentru îndepărtarea celulelor hibridoma și a resturilor celulare din bulionul de cultură. Scopul a fost de a genera supernatant, care poate fi utilizat direct pentru ultrafiltrare sau cromatografie fără nicio etapă de filtrare.

prima etapă de centrifugare pentru îndepărtarea celulelor hybridoma din fermentarea repetată în lot la scară de 100 L a fost realizată de un separator îmbunătățit de stivă de discuri. Centrifuga a fost echipată cu un sistem de alimentare hidrohermetic, care a permis o separare liberă a celulelor prin forță centrifugă moderată.

clarificarea pentru celulele mamiferelor în această etapă a fost cuprinsă între 99 și 99,9 %. Cantitatea de particule subcelulare în faza lichidă clarificată a fost redusă până la 50% din conținutul de particule din fluxul de alimentare.

într-o a doua etapă de centrifugare s-a efectuat îndepărtarea cantității rămase de resturi celulare și alte particule mici. A fost realizată cu forțe centrifuge de până la 18000 * g într-o centrifugă de mare viteză echipată cu un sistem de curgere continuă.

anticorpii monoclonali din supernatantul rezultat au fost concentrați direct prin ultrafiltrare și metode cromatografice. În acest proces nu a fost observată murdărirea membranelor UF sau a membranelor cromatografice.

costurile pentru înlocuirea membranei pot fi reduse drastic prin utilizarea procesului de centrifugare în două etape.