discussão
no presente estudo, procurámos avaliar se o CD dos ratinhos poderia ter uma taxa de insucesso que se traduzisse numa preocupação com o bem-estar dos animais. Usámos o tempo para a paragem respiratória como nosso marcador substituto para o critério AVMA de “tempo necessário para induzir a perda de consciência.”1 reconhecemos que o corte limpo da coluna vertebral cervical superior a C2 pode induzir paragem respiratória Sem perda de consciência, mas o trauma Bruto dos vários métodos de CD parecia improvável que resultasse neste resultado.fixamos o tempo para uma paragem respiratória igual a 0 s como limite para definir a eutanásia bem sucedida. Acreditamos que qualquer método de eutanásia após o qual os ratos podem continuar a respirar (independentemente de quanto tempo) requer cautela. Se realizado em ratos não anestesiados, eutanásia incompleta deixa um rato potencialmente consciente experimentando uma lesão traumática grave até que um operador pode repetir o procedimento ou mudar para outro método de eutanásia. O corte completo do SNC pode deixar o analgésico do corpo caudal, mas o tecido ferido em torno e o crânio à lesão ainda pode ser doloroso.17,25 animais que têm inervação motora suficiente para continuar a respiração provavelmente teriam inervação afetiva suficiente para a dor ocorrer.no nosso trabalho-piloto, alguns ratos continuaram a respirar durante 15 minutos antes de os eutanasiar com pentobarbital de sódio; estes ratos poderiam ter continuado a respirar ainda mais tempo. Se tivessem sido removidos da anestesia e recuperado a consciência, com múltiplas lesões na coluna vertebral, o seu sofrimento poderia ter sido grave. Mesmo como um acessório a agentes de eutanásia inalantes ou injetáveis, um rato para se recuperar (possivelmente dentro de um congelador de carcaça) de uma técnica de deslocamento mal realizada, o potencial de dor ou angústia seria agravado. É essencial que qualquer método de CD cumpra a exigência de que, essencialmente, 100% dos animais cessem imediatamente a sua respiração.a nossa percentagem de 21% de insucesso nos métodos CD, com base no tempo até à paragem respiratória, foi semelhante à percentagem de insucesso nos relatórios de ratinhos que foram submetidos a CD mas que não apresentavam lesões radiograficamente evidentes na coluna cervical.7,14 os autores desses estudos anteriores 7, 14 Não detalham seus métodos radiográficos. Como não foram relatados eventos de eutanásia falhada, 7, 14 Os autores podem ter lido mal os ratos que tiveram lesões cervicais e torácicas, mas distração insuficiente durante a radiografia como tendo apenas lesões torácicas.à luz de achados anteriores, 7, 14 postulamos que a tensão suficientemente forte aplicada em qualquer lugar ao longo da medula espinhal poderia induzir perda de consciência e paragem respiratória, mesmo quando o trauma ósseo era caudal para a região do alto-cervical recomendada. A nossa taxa de 100% de insucesso para o grupo de deslocamento torácico não suporta esta hipótese. Usámos luxação torácica em ratos anestesiados para modelar a técnica incorrecta que um operador mal treinado pode executar, e verificámos que a técnica correcta é necessária para uma eutanásia bem sucedida de ratos.as linhas de orientação de AVMA têm tratado o CD de uma forma geral, sem descrição específica do procedimento, reflectindo uma escassez de avaliações comparativas das diferentes técnicas de CD. Várias publicações descrevem técnicas variadas para a realização de deslocamento cervical.8,13,14,16,22 outros, incluindo os relatórios do painel AVMA, não distinguem entre várias técnicas de CD.3,10,12,24 além dos 3 métodos que escolhemos, os autores especificaram que a MCD deve ser realizada puxando para cima em um ângulo de 30°, na esperança de que o processo odontóide da vértebra C2 danifique a medula espinhal e, assim, aumentar a eficácia da técnica.Não é provável que a fractura deste pequeno processo ósseo num rato seja visível radiograficamente. Além disso, alguns operadores descrevem puxar até que se sinta que o crânio está completamente desapegado à coluna vertebral, e este é o método que ensinamos em nossa instituição. Esta prática é razoável quando o CD é utilizado após outras técnicas de eutanásia (por exemplo, sobredosagem anestésica), mas este procedimento mais longo e mais lento pode causar dor adicional num animal ainda não inconsciente.a radiografia pós-morte pode desempenhar um papel na avaliação do sucesso da eutanásia após o evento, mas esta técnica é trabalhosa e deve ser interpretada com cautela. Estávamos preocupados que, sem distracção suficiente, ligamentos intactos pudessem manter o crânio perto o suficiente da coluna vertebral para mascarar luxação bem sucedida em alguns casos. Encontrámos as radiografias pós-morte mais fáceis de interpretar quando a tensão foi aplicada para esticar a carcaça, mas ao fazê-lo, criou uma lacuna suspeita entre os corpos vertebrais C2 E C3 que exigia uma avaliação cuidadosa. Os controlos negativos apenas com CO2 (Figura 2) foram úteis para distinguir as lesões do normal. Quando estabelecemos o tempo para a paragem respiratória como o nosso “padrão-ouro”, a radiografia cervical tinha um valor preditivo positivo de apenas 71%. Por conseguinte, quando a radiografia é utilizada como uma ferramenta de controlo da qualidade ou de avaliação de competências, não serão observados alguns casos de eutanásia mal sucedida.enquanto que todas as eutanasias mal sucedidas apresentavam lesões torácicas ou lombares (ou ambas), 50 das 64 eutanasias bem sucedidas também tiveram. Concluímos que a presença de lesões torácicas ou lombares não é um diagnóstico de má técnica. Além disso, nenhum dos 11 animais CD que foram ao endpoint de 180-s apresentava lesões cervicais observáveis. Em contraste, 63 de 64 casos bem sucedidos de CD o fizeram, e o ratinho que não tinha uma lesão cervical observável (Figura 3) pode refletir mal diagnóstico de uma lesão sutil ou servir como evidência de que trauma suficientemente grave da medula espinhal distal pode causar paragem respiratória.; na verdade, dois ratos do grupo de luxação torácica conseguiram, em última análise, uma paragem respiratória antes de outra técnica poder ser aplicada. Além disso, 6 ratos CD sofreram eutanásia sem sucesso, mas morreram antes do endpoint de 180-s, mesmo que a radiografia revelou lesões cervicais em 5 destes ratos. É possível um diagnóstico errado radiográfico, assim como a possibilidade de lesões intermédias, embora radiograficamente evidentes, poderem ser fatais, mas serem demasiado prolongadas para qualificar o resultado como uma “boa morte”.reconhecemos algumas limitações ao nosso estudo. Nós não realizamos todas as variações descritas ou possíveis de CD em ratos. Não fizemos nenhuma tentativa de usar ondas cerebrais ou outras medidas para analisar a função cerebral intacta após a deslocação. Não removemos animais respiratórios da máscara de anestesia para avaliar o potencial de retorno à consciência. A presença de um tempo de paragem respiratória superior a 0 s sugere pelo menos uma função cerebral intacta mínima, um estado que parece inconsistente com uma “boa morte”; não apresentamos dados sobre a qualidade da morte quando o tempo de paragem respiratória é 0 s.
O efeito do operador que observamos requer mais exploração. Com apenas 2 Operadores, o efeito não pode ser atribuído a diferenças na idade, Formação, Força ou qualquer outro fator do operador. Muito provavelmente, outros operadores difeririam nas suas taxas de sucesso. O estudo de acompanhamento para um exame mais completo do efeito do operador deve ter em conta o conhecimento de vários operadores de que estavam a ser contabilizados e o efeito que este conhecimento pode ter no seu desempenho. O facto de o operador mais bem sucedido não ter tido ainda êxito em 8,1% dos casos suscita preocupações.além disso, o diagnóstico radiográfico pode estar sujeito a um efeito interpretador. Sem um “padrão-ouro” para o correto diagnóstico radiográfico (por exemplo, a ausência de uma lesão visível na bem-sucedida, a eutanásia poderia significar que vertebral fratura ou luxação no site não é necessário para morte rápida, ou que o radiologista perdeu a lesão), não poderíamos explorar a possibilidade de um intérprete efeito. O trabalho piloto com radiografias de filme simples revelou discórdia modesta no diagnóstico entre vários veterinários que lêem as radiografias.finalmente, todos os ratos foram deslocados sob anestesia isoflurano por razões humanas, porque sabíamos que manteríamos os casos mal sucedidos vivos e respiraríamos durante vários minutos, em vez de repetir o procedimento imediatamente. Como o anestésico aboliu o tom muscular, este método pode modelar CD pós-morte melhor do que modela CD como o único método de eutanásia. Como é um depressor respiratório, o isoflurano pode ter acelerado a paragem respiratória em alguns casos intermédios. Como agente neuroprotector, o isoflurano pode ter atrasado a morte. De qualquer forma, o uso de isoflurano nos impediu de avaliar a consciência potencial nos casos de insucesso ainda respiratório, porque nunca os desmamamos da anestesia para fazer essa avaliação.
concluímos que 3 métodos de CD podem resultar em eutanásia mal sucedida em que os ratos continuam a respirar após a tentativa de deslocamento. Não podemos afirmar se a consciência ou a percepção da dor acompanham este resultado. A prática em ratos anestesiados pode ser um método de treino útil, com o tempo de paragem respiratória definido como a medida do sucesso do formando. A radiografia é uma ferramenta de avaliação de competências que parece não ser mais informativa do que a observação da prática em ratos anestesiados. Se estudos adicionais replicar nossas descobertas, práticas recomendadas, será necessário para mudar, seja para impedir o CD de unanesthetized ratos, identificar um CD método com uma maior taxa de sucesso, ou enfatizar que os ratos deve ser acompanhada de perto depois que o CD, e se ainda respiração (que pode ser difícil de determinar, dada a motor de descarga que, muitas vezes, segue CD), imediatamente tratada através do mesmo ou de um método alternativo de eutanásia.
