fundo & objectivos: a doença celíaca pode ser tratada e potencialmente curada, restaurando a tolerância das células T à gliadina. Investigámos a segurança e eficácia das nanopartículas de poli(lactido-Co-glicolido) carregadas negativamente com carga de 500 nm que encapsulam a proteína gliadina (TIMP-GLIA) em 3 modelos de ratinhos da doença celíaca. Demonstrou-se que a absorção destas nanopartículas pelas células que apresentam antigénios induz tolerância imunitária noutros modelos animais de doença autoimune. métodos

: realizámos estudos com C57BL/ 6; RAG1 -/ – (C57BL / 6); e HLA-DQ8, huCD4 transgénicos AB0 NOD ratinhos. Aos ratinhos foram administradas 1 ou 2 injecções de veia de cauda de TIMP-GLIA ou nanopartículas de controlo. Alguns ratos receberam injecções intradérmicas de gliadin no adjuvante completo de Freund (imunização) ou de gliadin solúvel ou ovalbumina (desafio Auricular). Foram administradas injecções intraperitoneais de células T CD4+CD62L-CD44hi de ratinhos imunizados com gliadin C57BL/6 e foram alimentados com uma dieta à base de Ain-76A contendo glúten de trigo (desafio oral) ou sem glúten. As células do baço ou dos gânglios linfáticos foram analisadas em ensaios de proliferação e secreção de citoquinas ou por citometria de fluxo, sequenciação de ARN ou reacção quantitativa em tempo real de polimerase em cadeia. As amostras de soro foram analisadas por teste imunoorbent enzimático de anticorpos de gliadina, e os tecidos intestinais foram analisados por histologia. As células mononucleares do sangue periférico humano, ou células dendríticas imaturas derivadas de células mononucleares do sangue periférico humano, foram cultivadas em meio contendo TIMP-GLIA, anticorpo anti-CD3, ou lipopolissacarídeo (controlos) e analisadas em ensaios de proliferação e secreção de citoquinas ou por citometria de fluxo. O sangue total ou plasma de voluntários saudáveis foi incubado com GLIA-TIMP, e hemólise, ativação e agregação plaquetária, e ativação ou coagulação do complemento foram analisados. resultados: O tmp-GLIA não aumentou os marcadores de maturação em células dendríticas humanas cultivadas nem induziu a activação de células T de doentes com doença celíaca activa ou tratada. No atrasada-hipersensibilidade do tipo (modelo 1), o HLA-DQ8 transgênicos (modelo 2), e a gliadina memória de células T enteropatia (modelo 3) os modelos de doença celíaca, injeções intravenosas de TIMP-GLIA diminuiu significativamente a gliadina-T específicas-proliferação de células (nos modelos 1 e 2), inflamatórias secreção de citocinas (nos modelos 1, 2 e 3), circulação de gliadina IgG específicos/IgG2c (nos modelos 1 e 2), ouvido o inchaço (modelo 1), glúten-dependente enteropatia (modelo 3), e perda de peso corporal (modelo 3). No modelo 1, os efeitos demonstraram ser dependentes da dose. Os esplenócitos de ratinhos transgénicos HLA-DQ8 aos quais foram administradas nanopartículas TIMP-GLIA, mas não as nanopartículas de controlo, apresentaram níveis aumentados de FOXP3 e assinaturas de expressão genética associadas à indução de tolerância. conclusões

: em ratinhos com sensibilidade à gliadina, a injecção de nanopartículas de TIMP-GLIA induziu uma falta de resposta à gliadina e reduziu os marcadores de inflamação e enteropatia. Esta estratégia pode ser desenvolvida para o tratamento da doença celíaca.