Overview

Iron playes a vital role in most organisms due to its ability to catalyze electron transfer, a vital part of metabolic reactions in the mitochondria during the production of energy. Adicionalmente, em mamíferos o ferro é um componente chave da hemoglobina, permitindo o transporte de oxigênio para tecidos através de glóbulos vermelhos. O ferro livre é potencialmente tóxico devido à sua capacidade de catalisar a geração de radicais livres prejudiciais. Por esta razão, o ferro é geralmente ligado a proteínas como parte de grupos heme ou centros ferro-enxofre para a atividade funcional. O ferro não-funcional é ligado a proteínas portadoras ou de armazenamento, mas pode ser mais vagamente ligado a outras proteínas em uma forma labial. O controlo cuidadoso da distribuição do ferro nos seres humanos não só regula a disponibilidade e a toxicidade, como também desempenha um papel na resposta imunitária. Durante a infecção, o organismo sequencia o ferro disponível para prevenir a sua utilização por bactérias invasoras, limitando significativamente a sua capacidade de crescimento e multiplicação.

um dos principais controladores de transporte de ferro para as células é o CD71, também conhecido como receptor de transferrina 1. A figura 1 resume o seu papel no transporte de ferro do fluido tecidular ou plasma para a célula. O ferro “livre”, na forma de Fe(III), liga-se à transferrina, que se torna um ligante para o CD71 ligado à membrana. O complexo Fe (III)-transfin-CD71 é então endocitado em um endossomo que é acidificado através da ação de bombas de íons. Dentro do ambiente ácido, o complexo dissocia-se em suas partes componentes. CD71 e transferrina são reciclados de volta para a superfície, enquanto Fe(III) é reduzido para Fe(II) através da atividade da metaloprotease STEAP3. Fe (II) pode então ser exportado do endossoma pela proteína DMT1 (divalent metal transporter 1). Dentro do citoplasma o Fe(II) pode associar-se à ferritina e ser armazenado para uso futuro; processado na mitocôndria para a síntese de grupos heme e compostos Fe-S; ou libertado de volta para o ambiente extracelular através da ação da ferroportina. A libertação de Fe (II) pela ferroportina é negativamente controlada pela hormona hepcidina do fígado, por exemplo durante a inflamação para limitar a disponibilidade de ferro aos agentes patogénicos. O ferro Fe(II) liberado pode então ser convertido de volta para a forma Fe(III) por proteínas plasmáticas como a ceruloplasmina.

o estudo do transporte de ferro

Bio-Rad vende uma gama de anticorpos contra proteínas envolvidas na homeostase do ferro.

Target	Human	Mouse	Rat
CD71/TfR1	MCA1148, MCA2775, VMA00037	MCA1033, MCA2474	MCA155
Transferrin	9100-0004, 9100-1055, AHP081, AHP1757, AHP858, VMA00578, VPA00797	AHP081	9100-1055, AHP081
Ferritin	4420-4804, 4420-3010, 4420-3904GA, 4420-4804, AHP2179, OBT1639
Ceruloplasmin
Proerythroblasts / Erythrocytes	MCA506G	MCA6044G

Flow Cytometry Analysis of Key Iron Transport Marker CD71

Rat Anti-Mouse CD71 Antibody, clone 8D3 recognizes mouse CD71, a 763 amino acid ~95 kDa single pass type II superfície celular da glicoproteína transmembranar, também conhecida como receptor da transferrina. O CD71 é expresso em células da linhagem eritrocitária, mas sem a maioria dos eritrócitos maduros. O clone 8D3 reconhece formas nativas, solúveis e desnaturadas de murine CD71. A ligação do anticorpo 8D3 ao CD71 não interfere com a captação de ferro nas células. Rat Anti-Mouse TER-119/Erythroid Cells anticorpo, clone TER-119 reconhece TER-119 também conhecido como Ly-76. O clone TER-119 detecta uma proteína 52 kDa que está associada à superfície celular expressa em glicoforina A. TER-119 é um antigénio específico do eritrocídio, expresso desde o proeritroblasto inicial até à fase dos eritrócitos maduros. Este antigénio é também expresso em menor extensão em 20-25% das células da medula óssea e 2-3% das células do baço. Estes marcadores chave foram utilizados em conjunto na citometria de fluxo (Figura 2) para mostrar o CD71 necessário para a importação de FE para sintetizar a hemoglobina em proeritroblastos positivos TER-119.