InVivoMAb anti-mouse CSF1R (CD115) (Clone: AFS98)

Bauche, D., et al. (2018). “LAG3(+) Regulatory T Cells Restrain Interleukin-23-Producing CX3CR1(+) Gut-Resident Macrophages during Group 3 Innate Lymphoid Cell-Driven Colitis.” Immunity 49(2): 342-352 e345. PubMed

Interleukin-22 (IL-22)-producing group 3 innate lymphoid cells (ILC3) maintains gut homeostasis but can also promote inflammatory bowel disease (IBD). The regulation of ILC3-dependent colitis remains to be elucidated. Aqui nós mostramos que as células T regulatórias da Foxp3 (+) (células Treg) impediram a colite mediada pela ILC3 de uma forma independente da IL-10. As células Treg inibiram a produção IL-23 e IL-1beta de macrófagos cx3cr1(+) residentes no intestino, mas não de células dendríticas CD103 (+). Além disso, as células Treg restringiram a produção ILC3 Da IL-22 através da supressão da produção de macrófagos CX3CR1(+) da IL-23 e da IL-1beta. Esta supressão foi dependente do contacto e foi mediada pela activação latente gene-3 (LAG-3)-um receptor do ponto de controlo imunológico-expresso em células Treg. O envolvimento do LAG-3 na MHC classe II conduziu a imunossupressão profunda dos macrófagos cx3cr1 (+) residentes nos tecidos. Nosso estudo revela que a saúde da mucosa intestinal é mantida por um eixo impulsionado pela comunicação das células Treg com macrófagos residentes que retêm os estímulos inflamatórios necessários para a função ILC3.Gordon, S. R., et al. (2017). “A expressão PD-1 por macrófagos associados ao tumor inibe a fagocitose e a imunidade tumoral.”Nature 545 (7655): 495-499. PubMed

proteína de morte celular programada 1 (PD-1) é um receptor de controle imunológico que é upregulado em células T ativadas para a indução de tolerância imunológica. As células tumorais frequentemente sobreexpressam o ligando para PD-1, O ligando de morte celular programado 1 (PD-L1), facilitando a sua fuga do sistema imunológico. Os anticorpos monoclonais que bloqueiam a interacção entre PD – 1 e PD-L1, ligando-se quer ao ligante quer ao receptor, demonstraram uma eficácia clínica notável em doentes com uma variedade de cancros, incluindo melanoma, cancro colorectal, cancro do pulmão de células não pequenas e linfoma de Hodgkin. Embora esteja bem estabelecido que o bloqueio PD-1-PD-L1 activa as células T, pouco se sabe sobre o papel que esta via pode ter nos macrófagos associados a tumores (TAMs). Aqui mostramos que o mouse e o human TAMs express PD-1. A expressão tam PD – 1 aumenta ao longo do tempo em modelos de câncer de ratinho e com o aumento do estágio da doença em cancros humanos primários. A expressão de PD-1 TAM correlaciona-se negativamente com a potência fagocítica contra as células tumorais, e o bloqueio de PD-1-PD-L1 in vivo aumenta a fagocitose macrófaga, reduz o crescimento do tumor e aumenta a sobrevivência de ratos em modelos de cancro do Ratinho de forma dependente de macrófagos. Isto sugere que as terapias PD-1-PD-L1 podem também funcionar através de um efeito directo nos macrófagos, com implicações substanciais no tratamento do cancro com estes agentes.

Moynihan, K. D., et al. (2016). “Erradicação de grandes tumores estabelecidos em ratinhos por imunoterapia combinada que engaja respostas imunitárias inatas e adaptativas.”Nat Med. doi: 10.1038 / nm.4200. PubMed

ponto de verificação de bloqueio com anticorpos específicos para linfócitos T citotóxicos proteína associada (CTLA)-4 ou morte celular programada 1 (PDCD1; também conhecido como PD-1) provoca durável tumor regressão de metástases de câncer, mas esses dramática respostas estão confinados a uma minoria de pacientes. Este resultado subóptimo é provavelmente devido em parte à complexa rede de vias imunossupressoras presentes em tumores avançados, que são improváveis de ser superados por intervenção em um único ponto de verificação de sinalização. Aqui nós descrevemos uma imunoterapia combinada que recruta uma variedade de células imunitárias inatas e adaptativas para eliminar grandes cargas tumorais em modelos tumorais syngeneicos e um modelo de rato geneticamente modificado do melanoma; para o nosso conhecimento, tumores deste tamanho não têm sido curáveis por tratamentos baseados na imunidade endógena. A eficácia máxima do antitumor requereu quatro componentes: um anticorpo direccionado para o antigénio tumoral, uma interleucina-2 recombinante com uma semi-vida prolongada, anti-PD-1 e uma poderosa vacina para as células T. Os experimentos de depleção revelaram que células T CD8+, células dendríticas de apresentação cruzada e vários outros subconjuntos inatos de células imunitárias eram necessários para a regressão tumoral. O tratamento eficaz induziu a infiltração das células imunitárias e a produção de citoquinas inflamatórias no tumor, aumentou a captação mediada por anticorpos do antigénio tumoral e promoveu a disseminação do antigénio. Estes resultados demonstram a capacidade de uma resposta imunitária endógena eliciada para destruir tumores grandes e estabelecidos e elucidar características essenciais de imunoterapias combinadas que são capazes de curar a maioria dos tumores em ambientes experimentais tipicamente vistos como intratáveis.Arnold, I. C., et al. (2015). “Os monócitos/macrófagos CD11c promovem inflamação intestinal crónica induzida por Helicobacter hepaticus através da produção de IL-23.”Imunol Mucoso. doi: 10.1038 / mi.2015.65. PubMed

em doenças inflamatórias intestinais, uma degradação nas interacções microbianas hospedeiras acompanha a activação sustentada das células imunitárias no intestino. Estudos funcionais sugerem um papel fundamental para a interleucina-23 (IL-23) na orquestração da inflamação intestinal. IL-23 pode ser produzido por vários fagócitos mononucleares (MNPs) após estimulação microbiana aguda, mas pouco se sabe sobre as principais fontes celulares da IL-23 que conduzem inflamação intestinal crônica. Aqui abordámos esta questão utilizando um modelo fisiológico de colite causada por bactérias. Ao combinar a ablação genética condicional e o perfil da expressão genética, descobrimos que a produção IL-23 pela CD11c+ MNPs era essencial para desencadear a imunopatologia intestinal e identificamos os MHCII+ monócitos e macrófagos como a principal fonte da IL-23. A expressão da IL-23 pelos monócitos foi adquirida durante a sua diferenciação no intestino e correlacionada com a expressão do complexo principal de histocompatibilidade classe II (MHCII) e CD64. In contrast, Batf3-dependent CD103+ CD11b – dendritic cells were dispensable for bacteria-induced colitis in this model. Estes estudos reforçam o papel patogénico dos monócitos nas respostas desreguladas às bactérias intestinais e identificam a produção de IL-23 como um componente fundamental desta resposta. Uma maior compreensão das fontes funcionais da IL-23 em diversas formas de inflamação intestinal pode levar a novas estratégias terapêuticas destinadas a interromper a patologia imunológica induzida pela IL-23.Mucosa Imunology advance online publication 5 August 2015. doi: 10.1038 / mi.2015.65.

Conde, P., et al. (2015). “DC-SIGN(+) macrófagos controlam a indução da tolerância ao transplante.”Immunity 42 (6): 1143-1158. As células efectoras dos tecidos da linhagem monocitária podem diferenciar-se em diferentes tipos de células com função celular específica, dependendo do seu ambiente. O fenótipo, os requisitos de desenvolvimento e os mecanismos funcionais dos macrófagos imuno-protectores que mediam a indução da tolerância ao transplante permanecem evasivos. Aqui, demonstramos que o bloqueio costimulatório favoreceu a acumulação de macrófagos que inibiam a imunidade celular CD8(+) T e promoviam a expansão celular CD4(+)Foxp3(+) Treg em números. Mecanicamente, o envolvimento simultâneo de sinais de DC por ligantes fucosilados e sinalização TLR4 foi necessário para a produção de IL-10 imunoregulatório associado à sobrevivência prolongada de aloenxertos. Eliminação in vivo de macrófagos que expressam sinais de corrente contínua, interferindo com o seu desenvolvimento dependente do CSF1, ou impedindo a tolerância AB-rogada pela via de sinalização de corrente contínua. Juntos, os resultados fornecem novos insights sobre os efeitos tolerogénicos do bloqueio costimulatório e identificam os macrófagos supressivos de sinal-DC(+) como mediadores cruciais da tolerância imunológica com as implicações terapêuticas concomitantes na clínica.Kaminsky, L. W., et al. (2015). “Função redundante de Plasmacitóide e células dendríticas convencionais é necessária para sobreviver a uma infecção pelo vírus Natural.”J Virol 89 (19): 9974-9985. Os vírus PubMed

que se propagam sistemicamente a partir de um local periférico de infecção causam morbilidade e mortalidade na população humana. As células mielóides inatas, incluindo monócitos, macrófagos, células dendríticas derivadas de monócitos (mo-DC) e células dendríticas (DC), respondem precocemente durante a infecção viral para controlar a replicação viral, reduzindo a propagação do vírus a partir do local periférico. O vírus Ectromelia (ECTV), um ortopoxvírus que infecta naturalmente o rato, espalha-se sistemicamente do local periférico de infecção e resulta na morte de ratos susceptíveis. Embora as células fagocíticas tenham um papel necessário na resposta à ECTV, a necessidade de populações individuais de células mielóides durante as respostas imunitárias agudas à infecção viral periférica não é clara. Neste estudo, foi utilizada uma variedade de métodos de depleção específicos da mielóide para dissecar os papéis dos subconjuntos celulares mielóides individuais na sobrevivência da infecção por ECTV. Nós mostramos que DC são os produtores primários de interferões tipo I (T1-IFN), citoquinas necessárias para a sobrevivência, após infecção por ECTV. DC, mas não macrófagos, monócitos ou granulócitos, foram necessários para controlar o vírus e a sobrevivência dos ratinhos após infecção por ECTV. A depleção do plasmacitóide DC (pDC) isoladamente ou do subconjunto DC residente no linfóide (CD8alpha (+) DC) isoladamente não conferiu susceptibilidade letal ao ECTV. No entanto, a função de, pelo menos, um dos subconjuntos DC pDC ou CD8alpha(+) é necessária para a sobrevivência da infecção por ECTV, uma vez que ratos esgotados de ambas as populações eram susceptíveis a desafios ECTV. A presença de pelo menos um destes subconjuntos DC é suficiente para a produção de citocina que reduz a replicação e propagação do vírus ECTV, facilitando a sobrevivência após a infecção. Importância: antes da erradicação do vírus da varíola, o ortopoxvírus que causa varíola, um terço das pessoas infectadas sucumbiu à doença. Após a erradicação bem sucedida da varíola, as taxas de vacinação com a vacina da varíola diminuíram significativamente. Existe agora uma incidência crescente de infecções por ortopoxvírus zoonótico para as quais não existem tratamentos eficazes. Além disso, a segurança da vacina da varíola é de grande preocupação, pois podem surgir complicações, resultando em morbilidade. Como muitos vírus que causam doenças humanas significativas, ortopoxvírus se espalhou a partir de um local periférico de infecção para se tornar sistêmico. Este estudo elucida a necessidade inicial de células imunitárias inatas no controle de uma infecção periférica com ECTV, o agente causador do mousepox. Relatamos que há redundância na função de dois subconjuntos inatos de células imunitárias no controle da propagação do vírus no início da infecção. O controlo viral mediado por estes subconjuntos celulares apresenta um potencial alvo para terapias e desenho racional da vacina.Naik, S., et al. (2015). “Comensal-dendritic-cell interaction specifies a unique protective skin immune signature.”Nature 520 (7545): 104-108. PubMed

a pele representa a interface primária entre o hospedeiro e o ambiente. Este órgão também abriga trilhões de microorganismos que desempenham um papel importante na homeostase tecidular e imunidade local. As comunidades microbianas cutâneas são altamente diversas e podem ser remodeladas ao longo do tempo ou em resposta a desafios ambientais. Como, no contexto desta complexidade, microorganismos comensais individuais podem modular diferencialmente a imunidade da pele e as consequências destas respostas para a fisiologia dos tecidos permanecem pouco claras. Aqui mostramos que as comensais definidas afetam predominantemente a imunidade da pele e identificamos os mediadores celulares envolvidos nesta especificação. Em particular, a colonização com Staphylococcus epidermidis induz células T IL-17A(+) CD8 ( + ) que abrigam a epiderme, aumentam a imunidade da barreira inata e limitam a invasão de agentes patogénicos. As respostas das células T específicas da comensal resultam da acção coordenada dos subconjuntos das células dendríticas residentes na pele e não estão associadas à inflamação, revelando que as células residentes nos tecidos estão preparadas para sentir e respondem a alterações nas comunidades microbianas. Esta interacção pode representar um meio evolutivo pelo qual o sistema imunitário da pele utiliza sinais comensais flutuantes para calibrar a imunidade da barreira e proporcionar protecção heteróloga contra agentes patogénicos invasivos. Estes achados revelam que a paisagem imunológica da pele é um ambiente altamente dinâmico que pode ser rápida e especificamente remodelado por encontros com com comensais definidos, achados que têm profundas implicações para a nossa compreensão da imunidade e patologias específicas do tecido.

Sheng, K. C., et al. (2014). “IL-3 and CSF-1 interact to promote generation of CD11c+ IL-10-producing macrophages.”PLoS One 9(4): e95208. PubMed

Unraveling the mechanisms of hematopoiesis regulated by multiple citokines remains a challenge in hematology. O IL-3 é uma citoquina alérgica com potencial de linhagem múltipla, enquanto o LCR-1 é produzido no estado estacionário com uma cobertura restrita de linhagem. Aqui, descobrimos um papel instrutivo do LCR – 1 na hematopoiese mediada pela IL-3. O CSF – 1 promoveu de forma significativa a expansão celular CD11c+ impulsionada pela IL-3 e a geração de basófilos e mastócitos atenuados a partir da medula óssea C57BL/6. Outros estudos indicaram que o eixo CSF-1/CSF-1R contribuiu significativamente para a geração de células CD11c+ induzidas pela IL-3 através do aumento da monopoiese associada à c-Fos. As células CD11c+ induzidas pela IL-3 ou IL-3/CSF-1 foram competentes na maturação celular e endocitose. Tanto as células IL-3 Como IL-3/CSF-1 careciam de aparência de células dendríticas clássicas e assemelhavam-se a macrófagos em morfologia. Ambas as populações produziram um nível elevado de IL-10, além de IL-1, IL-6 e TNFalpha, em resposta ao LPS, e foram estimuladores de células T relativamente pobres. Coletivamente, estes achados revelam um papel para o CSF – 1 na mediação da via hematopoiética IL-3 através da monopoiese, que regula a expansão dos macrófagos CD11c+.Greter, M., et al. (2012). “GM-CSF controla a homeostase das células dendríticas do tecido não-linfóide, mas é dispensável para a diferenciação das células dendríticas inflamatórias.”Immunity 36 (6): 1031-1046. PubMed

GM-CSF (Csf-2) é uma citocina crítica para a geração in vitro de células dendríticas (DCs) e acredita-se que controla o desenvolvimento de DCs inflamatórios e DCs residentes(+) em alguns tecidos. Aqui nós mostramos que, em contraste com o entendimento atual, o receptor Csf-2 atua no estado estacionário para promover a sobrevivência e homeostase do tecido não-linfóide CD103(+) e CD11b(+) DCS. A ausência do receptor Csf-2 nos RCS pulmonares revogou a indução da imunidade das células T CD8(+) após imunização com antigénios de partículas. Em contraste, o receptor Csf-2 era dispensável para a diferenciação e função inata dos DCs inflamatórios durante lesões agudas. Em vez disso, os DCs inflamatórios necessitavam do receptor Csf-1 para o seu desenvolvimento. Assim, o Csf-2 é importante na imunidade das células T CD8(+) induzida pela vacina através da regulação da homeostase do tecido não-linfóide DC em vez do controlo dos CD inflamatórios in vivo.Li, W., et al. (2012). “Imagem Intravital 2-fotões do tráfico de leucócitos em batimentos cardíacos.”J Clin Invest 122 (7): 2499-2508. PubMed

microscopia intravital de dois fotões ampliou substancialmente a nossa compreensão das diferenças específicas de tecidos e órgãos na regulação das respostas inflamatórias. No entanto, pouco se sabe sobre a regulação dinâmica do recrutamento de leucócitos para o tecido cardíaco inflamado, em grande parte devido a dificuldades técnicas inerentes à imagiologia do tecido móvel. Aqui, nós relatamos um método para imagiologia batendo corações murinos usando microscopia intravital 2-Foton. Usando este método, visualizamos o tráfico de neutrófilos na linha de base e durante a inflamação. Isquemia lesão de reperfusão induzida por transplante ou ligação arterial coronária transitória levou ao recrutamento de neutrófilos para o coração, a sua extravasação das veias coronárias, e infiltração do miocárdio onde formaram grandes aglomerados. Corações de enxerto contendo ICAM-1 mutante, um ligante importante para o recrutamento de neutrófilos, reduziu as velocidades rastejantes de neutrófilos dentro dos vasos e inibiu marcadamente a sua extravasação. Observou-se uma diminuição semelhante com a inibição do Mac-1, um receptor para o ICAM-1. Bloqueio do LFA-1, outro receptor ICAM-1, impediu a adesão dos neutrófilos ao endotélio e a extravasação nos Enxertos cardíacos. Como as respostas inflamatórias no coração são de grande relevância para a saúde pública, esta abordagem de imagem mantém promessa para o estudo de mecanismos cardíacos específicos de recrutamento de leucócitos e identificação de novos alvos terapêuticos para o tratamento da doença cardíaca.Tagliani, E., et al. (2011). “Coordinate regulation of tissue macrophage and dendritic cell population dynamics by CSF-1.”J Exp Med 208 (9): 1901-1916. Os macrófagos tecidulares (Mphis) e as células dendríticas (DCs) PubMed desempenham papéis essenciais na homeostase tecidular e na imunidade. A forma como estas células são mantidas nas suas densidades características em diferentes tecidos permaneceu pouco clara. Auxiliado por uma nova técnica citométrica de fluxo para avaliar as taxas relativas de recrutamento precursor de sangue, examinamos a dinâmica populacional de Mphi e DC no útero da ratinha grávida, onde o crescimento rápido dos tecidos facilitou uma dissecação dos mecanismos regulatórios subjacentes. Nós demonstramos como a dinâmica do Mphi, e assim as densidades do tecido Mphi, são localmente controladas pelo CSF-1, um fator de crescimento pleiotrópico cujo nível de atividade In situ variou amplamente entre as camadas do tecido uterino. O CSF – 1 agiu, em parte, induzindo a proliferação de Mphi e, em parte, estimulando a extravasação dos monócitos de Ly6C(hi) (Mos) que serviram como precursores de Mphi. O recrutamento de Mo dependeu da produção de ligantes do receptor de quimioquina CCR2 por Mphis uterina, em resposta ao CSF-1. Inesperadamente, uma via paralela regida pelo LCR-1, mas independente do CCR2, influenciou as densidades uterinas do tecido DC, controlando as taxas locais de extravasamento pré-DC. Juntos, estes dados fornecem informações celulares e moleculares sobre a regulação das densidades dos tecidos Mphi em condições não inflamatórias e revelam um papel central para o CSF-1 na coordenação da homeostase MPHI e DC.Lim, A. K., et al. (2009). “O bloqueio de anticorpos ao C-fms suprime a progressão da inflamação e lesão na nefropatia diabética precoce em ratos obesos db/db.”Diabetologia 52 (8): 1669-1679. Objectivos/hipótese: a lesão renal mediada por macrófagos desempenha um papel importante no desenvolvimento de nefropatia diabética. Factor de estimulação de colónias (CSF)-1 é uma citoquina produzida nos rins diabéticos e que promove a acumulação, activação e sobrevivência de macrófagos. O CSF – 1 actua exclusivamente através do receptor C-fms, que só é expresso em células da linhagem monócito-macrófago. Portanto, usámos o Bloqueio C-fms como estratégia para direccionar selectivamente a lesão mediada por macrófagos durante a progressão da nefropatia diabética. MEIOS: Obeso, tipo 2 diabéticos db/db BL/KS ratos com o estabelecido albuminuria foram tratados com um neutralizantes anti-c-fms anticorpo monoclonal (AFS98) ou isotype de correspondência de controle de IgG a partir de 12 a 18 semanas de idade e examinados para a lesão renal. Resultados: o tratamento com AFS98 não afectou a obesidade, a hiperglicemia, os níveis de monócitos circulantes ou a albuminúria estabelecida em ratos db/db. No entanto, o AFS98 preveniu a hiperfiltração glomerular e suprimiu variáveis de inflamação no rim diabético, incluindo macrófagos renais (acumulação, activação e proliferação), níveis de quimiocina CC do ligando motif 2 (mRNA e proteína da urina), activação renal de vias pró-inflamatórias (cinase amino-terminal C-Jun e Factor de transcrição activador 2) e níveis de Tnf-alfa (também conhecidos como Tnf) de mRNA. Além disso, o AFS98 diminuiu os danos nos tecidos causados por macrófagos, incluindo lesões tubulares (apoptose e hipertrofia), danos intersticiais (proliferação celular e especialização de exercícios de miofibroblast) e fibrose renal (mRNA Tgf-beta1 e mRNA Col4a1). Conclusões/interpretação: o bloqueio do fms-c pode suprimir a progressão da nefropatia diabética estabelecida em ratos db / db, visando lesões mediadas por macrófagos.