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vários cancros humanos são sensíveis ao stress mitótico, implicando defeitos nos pontos de controlo. Muitas proteínas que contêm domínios associados a forkhead (FHA) são pontos de verificação do ciclo celular. Para isolar novos genes de checkpoint mitóticos, Scolnick e Halazonetis (2000) pesquisaram uma base de dados EST para cDNAs contendo domínios FHA. Eles identificaram um cDNA chamado CHFR para “checkpoint with forkhead and ring finger domains” que codifica uma proteína 664-aminoácido com FHA e ring finger domains dentro de seu n terminus. Dentro de seu c terminus, CHFR contém uma região rica em cisteína que não exibe similaridade significativa com qualquer proteína no banco de dados GenBank, mas é altamente conservado entre humanos e ratos. Através da análise do Northern blot, a expressão CHFR é onipresente em tecidos humanos normais; no entanto, 3 de 8 linhas celulares de câncer humano examinadas não continham mRNA CHFR. Estas mesmas linhas celulares não expressaram a proteína CHFR, determinada pelo teste de imunoblot. Scolnick e Halazonetis (2000) mostraram que o gene CHFR foi inactivado devido à falta de expressão ou por mutação em 4 de 8 linhas celulares de cancro humano examinadas. Células primárias normais e linhas de células tumorais expressando o tipo selvagem CHFR exibiram entrada atrasada na metafase quando a separação centrossoma foi inibida pelo estresse mitótico. Em contraste, as linhas celulares tumorais que tinham perdido a função CHFR entraram sem demora na metafase. A expressão ectópica do CHFR de tipo selvagem restaurou o atraso do ciclo celular e aumentou a capacidade das células para sobreviver ao estresse mitótico. Thus, Scolnick and Halazonetis (2000) concluded that CHFR defines a checkpoint that delays entry into metafase in response to mitotic stress.

Toyota et al. (2003) analyzed the pattern of CHFR expression in a number of human cancer cell lines and primary tumors. Eles encontraram silenciamento dependente da metilação de CpG da expressão de CHFR em 45% das linhas celulares de câncer, 40% dos cancros colorectais primários, 53% dos adenomas colorectais, e 30% dos cancros primários de cabeça e pescoço. A expressão de CHFR estava precisamente correlacionada com a metilação de CpG e a desacetilação de histonas H3 e H4 na região regulatória rica em CpG. As células com metilação CHFR tinham um índice mitótico intrinsecamente elevado quando tratadas com inibidor de microtúbulos. Isto significa que as células em que a CHFR foi epigeneticamente inactivada constituíram alelos de perda de função para controlo mitótico do ponto de controlo. Em conjunto, estes resultados lançam luz sobre a via pela qual o ponto de controlo mitótico é contornado nas células cancerosas e sugerem que a inactivação dos genes do ponto de controlo é muito mais generalizada do que se suspeitava anteriormente.

Ahel et al. (2008) identificou um novo motivo de ligação do dedo de zinco (PBZ) em poli (ADP-ribose) numa série de proteínas eucarióticas envolvidas na resposta a lesões no ADN e na regulação dos pontos de controlo. O motivo PBZ também é necessário para a adição de poli(ADP-ribosil)pós-translacional. Ahel et al. (2008) demonstraram a interação de poli(ADP-ribose) com este motivo em 2 representante de proteínas humanas, APLF (611035) e CHFR, e mostrou que as ações de CHFR no antephase ponto de verificação são ab-rogadas por mutações no PBZ ou através da inibição da poli(ADP-ribose) síntese.

a expressão da proteína do ponto de controlo mitótico CHFR é perdida em 20 a 50% dos tumores primários e linhas celulares tumorais. Para explorar se a regulamentação da CHFR contribui diretamente para a tumorigénese, Yu et al. (2005) generated Chfr knockout mice. Verificou-se que os ratinhos com deficiência de Chfr são propensos ao cancro, desenvolvem tumores espontâneos e apresentam uma maior incidência de tumores cutâneos após o tratamento com dimetilbenz(Alfa)antraceno. A deficiência de Chfr levou à instabilidade cromossômica em fibroblastos embrionários e regulou a mitose-cinase aurora a (603072), que é frequentemente elevada em uma variedade de tumores. A Chfr interagiu fisicamente com aurora A e ubiquitou aurora A tanto in vitro como in vivo. Yu et al. (2005) concluíram que CHFR é um supressor de tumor e que garante estabilidade cromossômica, controlando os níveis de expressão de chave mitotic proteínas como a aurora A.