clonagem de cDNA

transcrição reversa de RNA para DNA complementar (cDNA) é o primeiro passo em muitos fluxos de trabalho de Biologia molecular, incluindo estudos de expressão genética usando PCR em tempo real, clonagem de genes e na criação de bibliotecas de cDNA.

uma biblioteca cDNA é uma coleção de sequências de DNA clonadas que são complementares ao ARNm que foi extraído de uma determinada célula ou tecido. A biblioteca representa apenas as sequências transcritas dentro de uma amostra específica e pode fornecer uma riqueza de informações sobre a identidade e funcionalidade de genes específicos. as bibliotecas do cDNA também fornecem insights sobre a abundância de RNA produzido em uma amostra porque quanto mais um mRNA é expresso, mais cDNA será produzido.ao construir bibliotecas cDNA, é essencial que os clones cDNA sejam representativos da população original de RNA, tanto em termos de seu comprimento total quanto de abundância relativa. Isto significa que a escolha da transcriptase reversa usada nesta etapa é de importância crítica. Ao clonar cDNAs e criar bibliotecas cDNA recomendamos a nossa gama de produtos UltraScript e UltraScript 2.0. Estas enzimas altamente ativas e termostáveis são capazes de sintetizar um produto cDNA de comprimento mais completo, mesmo com quantidades limitadas de RNA, RNA expresso em níveis baixos ou contendo um alto grau de estrutura secundária.