fator de Transcrição mediada por células de câncer de reprogramação: pioneira

Desde que o tratamento contra o câncer de recidiva, metástase, e a resistência continuam a ser um desafio na clínica, a implementação de câncer a terapia genética tem sido uma próspera e exigente opção que pode superar tais dificuldades . É bem reconhecido que as células benignas podem se tornar células cancerosas após uma transição maligna, mas se as células cancerosas podem ser geneticamente e epigeneticamente revertidas de volta para um fenótipo benigno permanece incerto . A reprogramação mediada pelo factor de transcrição surgiu recentemente como uma abordagem in vitro para permitir que as células cancerígenas recuperem funções benignas.

Como discutido anteriormente, a tecnologia iPSC, como uma abordagem sofisticada de reprogramação, não foi apenas explorada para induzir uma transição somática de células somáticas terminalmente diferenciadas para a pluripotência, mas também foi usada para gerar CSCs para caracterização oncogênica . Além disso, a tecnologia iPSC também tem sido frequentemente utilizada para induzir a reprogramação de células cancerígenas para células pluripotentes com um fenótipo benigno. Em 2009, Utikal et al. melanócitos humanos reprogramados e linha celular de melanoma de ratinho para iPSCs com um fenótipo benigno pela introdução de fatores de Yamanaka com eficiência variando de 0,05% a 0,1%. Os IPSC derivados de linhas celulares de melanoma r545 exibiram expressão endógena de Oct4, Klf4 e C-Myc, desmetilação dos promotores de Oct-4 e NANOG e perda de tumorigenicidade in vivo. Após interrupção de doxiciclina de inflamação induzida por lentivirus expressão de Yamanaka fatores retirando a doxiciclina, mouse quimeras derivada da reprogramou células de melanoma tinha mantido a benignidade e não formam o tumor visível em 5 meses de idade, indicando que as células reprogramadas sofreu normal de diferenciação, processo para produzir benigna de células in vivo.em 2010, Miyoshi et al. verificou-se que a expressão de genes associados à pluripotência, tais como o NANOG, antigénio embrionário-4 (SSEA-4), TRA-1-60 e TRA–1-81, foi elevada após a introdução de factores Yamanaka nas células cancerígenas pancreáticas, hepáticas e colorectais. Reprogramando ADN invertido e metilação histona em regiões Promotoras específicas para expressar novamente genes associados à pluripotência, de modo que as células cancerígenas reprogramadas foram capazes de desenvolver padrões semelhantes ao ectoderme, mesoderme e endoderme. Além disso, as células cancerígenas pluripotentes possuíam maior sensibilidade ao agente quimioterapêutico 5-fluorouracilo (5-Fu), levando a um potencial significado clínico para revogar a quimio-/radio-resistência adquirida através da reprogramação de células cancerígenas. Além disso, as células cancerígenas reprogramadas foram capazes de se diferenciar em várias linhagens, incluindo células epiteliais, mesenquimais e neuronais (coletivamente referidas como células cancerígenas pós-pluripotentes). As células cancerígenas pós-pluripotentes foram menos malignas em comparação com as células cancerígenas parentais in vitro e não apresentavam potencial tumorigénico com base no ensaio de formação de tumores em ratinhos NOD/Sid. No entanto, a eficiência de reprogramação das células cancerígenas para as células cancerígenas pluripotentes permanece baixa, sugerindo que apenas uma minoria das células tumorais poderia ser reprogramada com sucesso em células cancerosas pluripotentes. Estudos posteriores demonstraram que outros combinatória de fatores de transcrição, tais como Lin-28 homóloga (LIN28), Oct-4, SOX2, e NANOG, também foram capazes de reprogramar o adenocarcinoma de pulmão e câncer gastrointestinal em iPSCs com aliviado tumorigenicity e potencial metastático . A reprogramação mediada pelo fator de transcrição pode ser direcionada, por uma variedade de fatores associados à diferenciação, para formar células funcionais de diversas linhagens . Embora essa abordagem de reprogramação seja viável e eticamente-aceitável para reativar o estado pós-epigenético das células cancerígenas de volta a um estado pluripotente benigno, a eficiência e segurança da reprogramação de células cancerígenas mediada por fatores de transcrição continuam a ser uma tarefa desafiadora a ser resolvida antes que se torne uma terapia promissora para o câncer .

factores de transcrição associados à pluripotência Combinatória demonstraram capacidades comprovadas para reprogramar as células cancerígenas para uiPSCs com o potencial de se diferenciarem ainda mais em células normais. Além disso, os investigadores descobriram recentemente que fatores específicos da linhagem podem reprogramar diretamente as células cancerígenas em células somáticas funcionais, contornando o estágio pluripotente, o que poderia diminuir o risco de transformação maligna das células cancerosas pluripotentes induzidas .

Breakpoint cluster region(BCR)-Abelson murine leukemia viral oncogene homolog 1 (ABL1)+ precursor B-cell acute lymphoblastic leukemia (B-ALL) is characterized by blockade of B-cell differentiation. Assim, a reprogramação de BCR-ABL1+ B-ALL para as células não leucêmicas foi considerada uma excelente estratégia para superar o bloqueio de diferenciação . Um estudo anterior mostrou que a proteína alfa (C/EBPa) de ligação do CCAAT/potenciador, um fator de transcrição associado ao desenvolvimento de todos, pode induzir uma transição celular de células de linhagem murina B para macrófagos com aproximadamente 100% de eficiência . Este trabalho anterior levou à consideração de se c/EBPa também poderia ser usado para reprogramar o câncer com linhagens de células B para macrófagos funcionais. Em 2013, Rapino et al. reprogramou com sucesso linfoma humano e leucemia de células B para células tipo macrófago através da introdução de C/EBPa. De acordo com a análise de mais de 20 linhas celulares de linfoma humano e leucemia B, 80% das células podem ser parcial ou totalmente reprogramadas para células tipo macrófago. As células B da leucemia linfoblástica reprogramada mostraram menor tumorigenicidade in vitro, com a regulação superior dos marcadores associados aos macrófagos e a regulação inferior dos marcadores associados às células B. Experiências em modelos murinos também confirmaram que não se formou nenhum tumor após a injecção de células de leucemia linfóide infectadas com C/EBPa em ratinhos imunodeficientes. Embora a maioria das analisados de linfoma e leucemia de célula linhas foram submetidos a reprogramação, pelo menos parcialmente, ou transitoriamente, apenas duas linhas de células com maior expressão endógena de C/EBPa efetivamente sustentado o celular de transição para macrófagos, como as células, indicando que a taxa de sucesso de câncer de reprogramação celular altamente depende da endógenos expressão de C/EBPa .estudos anteriores centraram-se na introdução de um único factor de transcrição nuclear para aliviar a tumorigenicidade de não só doenças malignas associadas às células B, mas também carcinoma hepatocelular (HCC) . Para reprogramar com sucesso células cancerosas em células com funções normais, é necessário que vários fatores de transcrição nuclear funcionem de forma cooperativa . Se existe uma fórmula específica de fatores de transcrição que pode efetivamente induzir a transição do câncer de malignidade para benignidade com alta eficiência e segurança permanece esquivo. Os recentes avanços na sequenciação de RNA unicelular permitiram aos investigadores obter perfis mais abrangentes em diferentes células cancerígenas, e um número crescente de candidatos a fatores de transcrição foram identificados e caracterizados para melhorar a eficiência da reprogramação de células cancerígenas .em 2014, Huang et al. verificou-se que uma combinação de factores de transcrição, incluindo factor nuclear de hepatócitos 1 alfa (HNF1A), factor nuclear de hepatócitos 3 alfa (HNF3A) e proteína A3 da caixa de forkhead (FOXA3), desempenhou um papel significativo na reprogramação dos fibroblastos humanos em células tipo hepatócitos. Depois, em 2019, Cheng et al. demonstrou que a combinação de HNF1A, HNF4A e FOXA3 pode também induzir a reprogramação directa de HCC em células hepatocitárias com funções normais, incluindo secreção de albumina, síntese de glicogénio, captação de lipoproteína de baixa densidade, bem como controlo do metabolismo e desintoxicação. Neste estudo, o adenovírus foi usado para sinergisticamente introduzir hnf1a, HNF4A, e FOXA3 em linhas celulares HCCLM3 e Huh7. Com base no seu hepatotropismo intrínseco, em comparação com a reprogramação do iPSC, a infecção mediada pelo adenovírus induziu aproximadamente 100% das células HCC a expressarem os factores de transcrição seleccionados, o que melhorou significativamente a infecção e a eficiência de reprogramação. Os fatores de transcrição combinatória induziram a expressão de genes associados aos hepatócitos e alterações morfológicas em ambas as linhas celulares HCCLM3 e Huh7, indicando um efeito simultâneo de HNF1A, HNF4A e FOXA3 na reprogramação HCC. Hepatócitos reprogramados mostraram aumento gradual das funções hepatocitárias e perda de características tumorigénicas in vitro. Por exemplo, os hepatócitos reprogramados das linhas celulares HCCLM3 exibiram um aumento significativo da expressão da albumina (ALB) e diminuição da expressão alfa-fetoproteína (AFP). Os resultados do ensaio de formação de colónias, do ensaio de migração e do ensaio de formação de esferóides também indicaram que as capacidades de proliferação e migração, bem como o número de CSC do fígado, tinham diminuído. Os resultados do microarray cDNA confirmaram que as células reprogramadas do tipo hepatócito eram geneticamente semelhantes aos hepatócitos humanos primários. Os modelos Murine também mostraram que as células reprogramadas tipo hepatócito perderam substancialmente a tumorigenicidade in vivo e foram capazes de reconstruir a estrutura hepática durante a regeneração. Além disso, a molécula de adesão de células epiteliais (epcam)+ subpopulação nas células hepatocitárias reprogramadas diminuiu significativamente, sugerindo que a reprogramação de células cancerígenas via HNF1A, HNF4A e FOXA3 poderia efetivamente eliminar CSCs para prevenir recorrência de câncer, recaída e resistência em HCC.

a reprogramação mediada pelo factor de transcrição é baseada em modificações genéticas e epigenéticas através de administração específica de genes . Desde Yamanaka et al. explorou com sucesso os fatores de transcrição para reprogramar ratinhos e fibroblastos humanos em IPSS, a técnica de reprogramação foi ainda mais implantada no desenvolvimento de potenciais tratamentos contra o câncer . No entanto, a controvérsia sobre a reprogramação das células cancerígenas mediadas pelo factor de transcrição permaneceu . Vários estudos demonstraram que a reprogramação das células cancerígenas para as células pluripotentes nem sempre conduz a efeitos positivos. Por exemplo, devido à presença de oncogenes como C-Myc, KLF4 e SOX2, as células cancerígenas pluripotentes possuem preocupações de segurança na oncogénese devido a uma diferenciação aberrante . Além disso, a reprogramação de células cancerígenas mediada pelo fator de transcrição tem limitações adicionais em termos de custo, eficiência de introdução e entrega in vivo, O que tem impedido o seu potencial na tradução clínica . A iniciação e progressão do cancro estão principalmente relacionadas com mutações genéticas e alternações epigenéticas complicadas, incluindo regulação da microRNA, metilação do ADN, modificações da histona e remodelação cromossómica . A reprogramação de células cancerígenas mediada pelo factor de transcrição está altamente envolvida nestas redes moleculares complexas e o mecanismo subjacente permanece largamente inexplorado.reprogramação de células cancerígenas pequenas mediadas por moléculas: uma mudança de jogo

o advento da reprogramação de células cancerígenas mediada pelo factor de transcrição forneceu resultados inovadores para provar a viabilidade da reprogramação de destinos cancerígenos . Embora a reprogramação de células cancerígenas mediada pela transcrição seja amplamente reconhecida como uma estratégia potencialmente promissora contra doenças malignas, os problemas de segurança e eficácia causados por modificações transgénicas permanecem como um bloqueio não negligenciável . As anomalias genéticas, tais como a ativação de oncogenes ou silenciamento de genes supressores de tumores causados pela inserção de sequências de DNA exógenas podem comprometer a futura tradução clínica da terapia de reprogramação de células cancerosas. Tem havido uma abordagem alternativa para substituir a infecção viral por transmissão de genes transientes utilizando micro-partículas especialmente concebidas , mas a reprogramação de células cancerígenas mediada pelo factor de transcrição continua a ser arriscada e tecnicamente desafiadora . Por conseguinte, existe uma necessidade urgente de estabelecer estratégias alternativas para induzir uma reprogramação eficiente das células cancerígenas. Recentemente, a reprogramação de pequenas células cancerígenas mediadas por moléculas provou ser capaz de reprogramar células terminalmente diferenciadas em um estado pluripotente . Mais significativamente, existem também vários estudos que sugerem que o uso de pequenas moléculas para induzir a reprogramação de células cancerígenas da malignidade para a benignidade pode contornar algumas das limitações na reprogramação de células cancerígenas mediadas pelo factor de transcrição .

a reprogramação mediada por moléculas tem vantagens distintas, incluindo custo relativamente baixo, técnica simples, versatilidade, permeabilidade e reversibilidade facilmente sintonizáveis . As moléculas pequenas também podem servir como um excelente candidato para regular eficientemente os processos celulares através de vias de sinalização direcionadas diretamente, como as vias Wnt, Hedgehog e hipopótamo . É conveniente fabricar moléculas pequenas e escalar o seu rendimento para induzir a reprogramação com diferentes linhagens . Além disso, tais moléculas podem ser utilizadas como sondas moleculares para investigar as mudanças subjacentes na sinalização molecular durante a reprogramação de células cancerosas, o que pode levar a uma melhoria na eficiência de reprogramação e redução do efeito fora do alvo . Para que pequenas células cancerígenas mediadas por moléculas tenham sucesso, é necessário identificar e desenvolver pequenas moléculas bioquímicas que possam ajudar as células cancerígenas a superar as barreiras epigenéticas e bloquear várias vias de sinalização celular . Uma vez que o uso de pequenas células cancerígenas mediadas pela molécula reprogramando independentemente para converter a malignidade à benignidade continua a ser um desafio até agora, há um número limitado de estudos na fronteira que se estende .ao introduzir C / EBPa, Rapino et al. reprogramou com sucesso linfoma humano e leucemia de células B para células tipo macrófago. The finding leads to a theoretical insight on whether small molecules can also exercises on reprogramming of lymphoblastic leukemia. Em 2015, McClellan et al. verificou-se que as citoquinas indutoras da diferenciação mielóide, incluindo o ligando tirosina cinase tipo FMS (FLT3L), a interleucina 7 (IL-7), a interleucina 3 (IL-3), o factor estimulante de colónias de granulócitos-macrófagos (GM-CSF), o factor estimulador de colónias de macrófagos (MCSF) e os factores de transcrição mielóide tais como C/EBPa e PU.1 poderia reprogramar eficientemente as células primárias BCR-ABL1+ B-ALL em células semelhantes a macrófagos. Após 2 semanas de exposição às citoquinas indutoras da diferenciação mielóide, verificou-se que 53% dos blastos leucémicos CD19+/CD34+ aumentam significativamente a expressão do CD14 e diminuem a expressão do CD19. A subpopulação CD14+/CD19 foi Triada e purificada para produzir > 98% de células semelhantes a macrófagos com expressão estável CD14. As células reprogramadas possuíam morfologia tipo macrófago, imunofenotipos de superfície, perfil de expressão genética, geração de ruptura oxidativa, e habilidade fagocítica. Além disso, as células reprogramadas poderiam aliviar significativamente a leucemogenicidade, manifestada pela perda da capacidade de formar xenografts malignos em modelos animais. Os resultados podem levar a uma estratégia viável que explora a reprogramação de células cancerígenas para tratar BCR-ABL1+ B-all in vivo. No entanto, os resultados gerados pela reprogramação leucêmica sugerida na reprogramação in vivo estava em uma fase preliminar, uma vez que aberrações genéticas subjacentes causadas pela indução de citoquinas permanecem inexploradas. Além disso, 5 dos 12 casos clínicos mostraram resistência à reprogramação CD14+. Assim, não é claro como escolher prospectivamente os doentes que beneficiariam da Reprogramação leucémica. Mais pesquisas são envolvidas para superar essas limitações antes que possa se tornar uma estratégia terapêutica eficiente contra as malignidades associadas às células B.no ano de 2019, Ishay-Ronen et al. as células invasivas do cancro da mama convertidas com sucesso em adipócitos funcionais para prevenir metástases através de uma pequena indução molecular da transição epitelial–mesenquimal (EMT) e da re-diferenciação. O EMT é um processo de reprogramação bem reconhecido que pode melhorar a plasticidade celular . Como mostrado anteriormente, o processo de reprogramação para gerar células cancerígenas pluripotentes é geralmente associado com o potencial de se diferenciar em várias linhagens com funções celulares normais através do fator de transcrição ou indução de pequenas moléculas . Assim, Ishay-Ronen et al. EMT induzido pelo Tratamento in vitro do Factor de crescimento beta (TGF-β) das células Pi2t reprogramadas em adipócitos funcionais, utilizando insulina, dexametasona, rosiglitazona e proteína 2 morfogenética óssea (BMP2). Os resultados revelaram que as células Py2T reprogramadas podem ser induzidas a passar por adipogénese com um cocktail de pequenas moléculas. Depois de pelo menos 20 dias de tratamento com TGF-β e adipogênese de indução de fatores, o reprogramadas Py2T células mesenquimais características expressas significativamente superior C/EBPa e CCAAT/enhancer-proteína de ligação beta (C/EBPß), que foram reguladores de adipogênese, em comparação com os seus homólogos com epiteliais características. A pluripotência versátil das células reprogramadas do cancro da mama foi confirmada por outra diferenciação relacionada com o mesenchymal, incluindo a osteogénese e a condrogénese, com a detecção de marcadores osteo e condro específicos, tais como o factor de transcrição Sp7 (Osterix), o colagénio tipo II e a região de determinação do sexo Y-box 9 (SOX9). Além disso, eles usaram modelos MTflECad (epitelial) e MTΔCad (mesenchymal) murine para testar a eficiência e especificidade dos processos de reprogramação e re-diferenciação relacionados com EMT. A reprogramação in vitro induzida pelo TGF-β e a reprogramação in vivo mediada pela Cre recombinase mostraram que aproximadamente 60% das células do cancro da mama expressavam C/EBPa+. Os resultados confirmaram que o TGF-β desempenhou um papel vital na regulação do processo de reprogramação relacionado com o EMT e das características mesenquimais das células cancerígenas, tanto in vitro como in vivo. Além disso, o tratamento combinatório com trametinib e rosiglitazona no modelo de ratinho conduziu a uma adipogénese eficiente in vivo das células reprogramadas do cancro da mama. Uma vez que trametinib e rosiglitazona São Estados Unidos da América. Medicamentos aprovados pela Food and Drug Administration (FDA) para induzir EMT e adipogénese, utilizando-os como mediadores em terapia de reprogramação de células cancerosas é clinicamente mais viável em comparação com abordagens que utilizam outros mediadores . Os benefícios significativos deste estudo não são apenas para a identificação de moléculas pequenas em regulação de células de câncer de mama reprogramação e re-diferenciação, mas também para o estabelecimento de um modelo replicável, que podem ser exploradas na avaliação de células de câncer de reprogramação em muitos outros tipos de câncer com diferentes linhagens. A eliminação de células cancerígenas invasivas mesenchimais por uma pequena terapêutica de reprogramação de células cancerígenas mediada por moléculas pequenas pode tratar metástases de quimio/Radio-resistência adquirida e de cancro, mas a especificidade do trametinib e do tratamento com rosiglitazona e a prevenção de efeitos secundários devem ser investigadas em estudos posteriores .como se observou, durante a reprogramação das células cancerígenas, a apoptose celular parece não ser afectada pelas pequenas moléculas, assim como a proliferação celular. Por exemplo, o tempo para a fase G0/G1 é prolongado, e os genes promotores do ciclo celular são suprimidos, indicando que o aumento da benignidade ocorreu . A reprogramação de células cancerígenas mediadas por moléculas pequenas fornece uma abordagem não-viral e não-integrada para induzir a transição de células cancerígenas para células benignas. Como uma das estratégias potenciais, tal abordagem reprogramadora mantém grande promessa de suprimir eficazmente o desenvolvimento e recidiva de várias malignidades.até agora, os avanços na reprogramação de células cancerígenas estão enfrentando muitos desafios. Em primeiro lugar, alguns tipos de cancro (como o carcinoma nasofaríngeo) compreendem uma grande subpopulação de células cancerígenas indiferenciadas, tornando essas células cancerígenas difíceis de serem reprogramadas em células benignas devido à heterogeneidade do tumor in situ . A reprogramação directa pode ser uma abordagem potencialmente viável que pode ser aplicada a estes tipos de cancros, mas até agora não houve quaisquer provas promissoras . Em segundo lugar, existem muitas moléculas pequenas que podem servir como excelentes candidatos na reprogramação de células cancerosas in vitro, mas apenas algumas delas foram oficialmente aprovadas pelos EUA. FDA, uma vez que cada pequeno medicamento molecular tem de ser rigorosamente revisto com base nos seus benefícios e riscos potenciais para os pacientes pretendidos . Futuras investigações devem concentrar-se no desenvolvimento de agentes farmacológicos mediados por células cancerígenas reprogramando para minimizar as preocupações de segurança e eficiência. Além disso, as funções de pequenas moléculas bioquímicas não são suficientemente específicas, sugerindo potenciais efeitos fora do alvo podem por vezes acontecer durante a reprogramação . Adicionalmente, a posologia de pequenas moléculas para induzir reprogramação e diferenciação das células cancerígenas in vivo deve ser cuidadosamente examinada para evitar efeitos adversos potencialmente prejudiciais nos doentes. Portanto, é urgente decifrar com precisão os mecanismos moleculares de reprogramação de células cancerosas para aliviar os efeitos colaterais. Considera necessário empregar um método de entrega eficiente para reprogramar pequenas moléculas associadas, uma vez que muitas falhas de tratamento não resultaram da ineficiência das próprias drogas, mas da ineficiência do fornecimento de drogas .

MicroRNA e exosome mediada por células de câncer de reprogramação: emergentes alternativas

Ele tem sido relatado que os microRNAs, incluindo miRNA302s , miRNA200c , miRNA369 , miRNA34a , e miRNA30b , são cruciais para reforçar a expressão de pluripotency associadas a genes. A MicroRNA tem sido considerada como biomarcadores e sondas moleculares úteis para atingir tipos específicos de células e manipular a reprogramação celular. No entanto, regular de forma precisa e eficiente a transição celular para tratar doenças malignas através da exploração de microRNA continua a ser um desafio até agora.

Lin et al. primeiro mostrou que as células cancerosas da pele humana poderiam ser reprogramadas em IPSS usando microRNA-302s, que são abundantemente expressos em ESCs humanos, mas rapidamente desapareceram após a diferenciação. It has been reported that pluripotent cancer cells with microRNA-302s transfection exhibit decreased tumorigenicity, genomic demethylation, and elevated expressions of SSEA-3/4, SOX2, NANOG, and Oct-3/4. Uma vez que o tamanho da microRNA-302s era apenas de aproximadamente 1 kb, a eficiência de transfecção atingiu > 99% com base em análises de citometria de fluxo, sugerindo que o tamanho de um fator exógeno desempenhou um papel importante na eficiência de transfecção . No entanto, apenas 2% -5% das células cancerígenas foram reprogramadas com sucesso em células pluripotentes semelhantes a ES. A análise da expressão genética revelou que as células pluripotentes semelhantes ao ES mostraram mais de 86% de semelhança com as linhas celulares do ES humano H1 e H9. Sob a linhagem específica de meios indutores de diferenciação, células derivadas do câncer como ES diferenciaram-se ainda mais em células benignas, incluindo neurônios, condrócitos e fibroblastos. A família MicroRNA-200 também demonstrou melhorar a EMT através do eixo homeobox 1 (ZEB1), que é conhecido por inibir o gene e-cadherina supressor do tumor . Em células cancerosas do cólon humano, membros que pertencem à família microRNA34 foram provados como novos alvos de transcrição do gene supressor do tumor p53 .os exossomas têm a capacidade de abrigar componentes que imitam a constituição do microambiente embrionário . Os factores de reprogramação relacionados com o ESC estão envolvidos em exossomas derivados do ESC humano e podem ser entregues às células cancerígenas para induzir a transição da malignidade para a benignidade. Em 2017, Zhou et al. demonstrou que exossomas derivados do ESC humano podem inibir a proliferação do cancro in vitro e aliviar a tumorigenicidade in vivo. Quando as linhas celulares Colo-320 e MCF-7 foram cultivadas em meio condicionado ESC, elas exibiram re-expressão de marcadores associados à pluripotência, incluindo Oct-4, NANOG e SOX2 e redução da tumorigenicidade in vitro, indicando o sucesso da reprogramação de malignidade para benignidade. Aproximadamente 90% das células do cancro da mama perderam a expressão da vimentina após exposição ao meio condicionado ESC, enquanto a eficiência de reprogramação das células do cancro colorectal não foi determinada. Os resultados sugeriram que os exossomas poderiam suprimir a oncogênese promovendo os níveis de expressão de marcadores críticos associados à pluripotência. Depois disso, as células cancerígenas poderiam ser revertidas para um estado pluripotente e restaurar vias de diferenciação benignas. No entanto, as células do ES derivadas do câncer não estavam livres da formação do tumor in vivo, e redução de 60% do tamanho do tumor foi observada com células do câncer tratadas com exossomas derivados do ESCs. O meio condicional contendo exossomas inibiu a proliferação do cancro através do prolongamento do tempo na fase G1, enquanto a redução do tempo nas fases S e G2/M. Zhou et al. constatou-se igualmente que o nível de expressão do ciclin D1 foi reduzido para manter a hipofosforilação do retinoblastoma após o tratamento do meio condicionado, O que conduziu à inibição da transição de fase G1/S. Além disso, a fosforilação no resíduo de serina 10 no histone H3, como uma das modificações epigenéticas vitais durante a fase G2, foi significativamente reduzida . Consistente com os achados anteriores, várias substâncias do microambiente embrionário humano têm o potencial de inibir a progressão do câncer e aliviar a tumorigenicidade in vivo .