Durante a sua in vivo de envelhecimento, as células vermelhas do sangue (glóbulos vermelhos) aumento na densidade e tornam-se menores. As subpopulações RBC definidas pela idade são geralmente recolhidas por centrifugação. Um fraccionamento de acordo com o volume RBC foi proposto como uma alternativa melhorada a essa separação de idades. Porque alguns dados relatados na literatura indicam algumas discrepâncias entre os dois métodos, as amostras de sangue foram separados por centrifugação ou por contra-fluxo de centrifugação, e algumas características do RBC assim fracionado foram estudados. As actividades enzimáticas diminuem quer quando a densidade aumenta quer quando o volume (MCV) diminui. No entanto, a comparação de outras Características RBC sugere fortemente que estes dois procedimentos não levam à coleta das mesmas subpopulações RBC: por exemplo, o conteúdo de hemoglobina aumenta quando o MCV aumenta, enquanto ele permanece constante qualquer que seja a densidade RBC. Com radioisótopos células, ele é mostrado 1) que a mais densa de RBC são recuperados em todos os tamanho‐separados RBC subpopulações, mesmo que eles tendem a se concentrar nas frações com o maior MCV, e 2) que o menor de glóbulos vermelhos, são quase distribuídos de forma justa em todos os RBC subpopulações, qualquer que seja a sua densidade, enquanto que a maior RBC são, principalmente, mas não exclusivamente, presentes em alta densidade de frações. Assim, o fraccionamento de acordo com o tamanho não corresponde à separação de acordo com a densidade. Tomados em conjunto com os resultados de experiências in vivo realizadas em ratinhos e com o facto de os reticulócitos estarem presentes em todas as fracções separadas por tamanho, estes dados sugerem que a centrifugação de Contra‐fluxo pode ser um procedimento muito questionável para se conseguir um fraccionamento de RBC de acordo com a idade e, portanto, que o volume de RBC pode não ser um critério fiável da idade RBC.