Streszczenie

opisano rozwój ciągłego dwustopniowego procesu odwirowania w celu usunięcia komórek hybrydomy i resztek komórek z bulionu hodowlanego . Celem było wytworzenie supernatantu, który można bezpośrednio wykorzystać do ultrafiltracji lub chromatografii bez żadnych etapów filtracji.

pierwszy etap wirowania w celu usunięcia komórek hybrydomy z powtarzanej fermentacji wsadowej w skali 100 L przeprowadzono za pomocą ulepszonego separatora stosu dyskowego. Wirówka była wyposażona w hydrohermetyczny system podawania, który umożliwiał wolne od uszkodzeń oddzielanie ogniw za pomocą umiarkowanej siły odśrodkowej.

Wyjaśnienie dla komórek ssaków w tym etapie mieściło się w zakresie od 99 do 99,9 %. Ilość cząsteczek subkomórkowych w klarowanej fazie ciekłej została zmniejszona do 50 % zawartości cząstek w strumieniu paszowym.

w drugim etapie odwirowywania przeprowadzono usuwanie pozostałej ilości resztek komórek i innych małych cząstek. Przeprowadzono go z siłami odśrodkowymi do 18000 • g w wirówce o dużej prędkości wyposażonej w system ciągłego przepływu.

przeciwciała monoklonalne w powstałym supernatancie zostały bezpośrednio zatężone metodami ultrafiltracji i chromatografii. W procesie tym nie stwierdzono zanieczyszczenia błon UF ani błon chromatograficznych.

koszty wymiany membrany można drastycznie zmniejszyć poprzez zastosowanie dwustopniowego procesu odwirowywania.