InVivoMAb anti-mouse CSF1R (CD115) (Clone: AFS98)

Bauche, D., et al. (2018). „LAG3(+) Regulatory T Cells Restrain Interleukin-23-Producing CX3CR1(+) Gut-Resident Macrophages during Group 3 Innate Lymphoid Cell-Driven Colitis.” Immunity 49(2): 342-352 e345. PubMed

Interleukin-22 (IL-22)-producing group 3 innate lymphoid cells (ILC3) maintains gut homeostasis but can also promote inflammatory bowel disease (IBD). The regulation of ILC3-dependent colitis remains to be elucidated. Tutaj pokazujemy, że regulatorowe komórki T FOXP3 (+) (komórki Treg) zapobiegały zapaleniu jelita grubego za pośrednictwem ILC3 w sposób niezależny od IL-10. Komórki Treg hamowały wytwarzanie IL-23 i IL-1BETA z makrofagów rezydujących w jelitach cx3cr1 (+), ale nie z komórek dendrytycznych CD103 (+). Ponadto komórki Treg ograniczyły produkcję ILC3 IL-22 poprzez zahamowanie produkcji makrofagów CX3CR1(+) IL-23 i IL-1BETA. Supresja ta była zależna od kontaktu i była mediowana przez utajony Gen aktywacji-3 (LAG-3)-receptor punktu kontrolnego układu immunologicznego-wyrażony na komórkach Treg. Zaangażowanie LAG-3 na MHC klasy II prowadziło do głębokiej immunosupresji makrofagów rezydujących w tkankach cx3cr1 (+). Nasze badania ujawniają, że zdrowie błony śluzowej jelit jest utrzymywane przez oś napędzaną komunikacją komórek Treg z makrofagami rezydującymi, które wstrzymują bodźce zapalne wymagane do działania ILC3.

(2017). „Ekspresja PD – 1 przez makrofagi związane z guzem hamuje fagocytozę i odporność guza.”Przyroda 545(7655) PubMed

Programmed cell death protein 1 (PD-1) jest receptorem immunologicznego punktu kontrolnego, który jest regulowany na aktywowanych komórkach T w celu indukcji tolerancji immunologicznej. Komórki nowotworowe często nadekspresują ligand dla PD-1, programowanego ligandu śmierci komórki 1 (PD-L1), ułatwiając im ucieczkę z układu odpornościowego. Przeciwciała monoklonalne, które blokują interakcję między PD-1 i PD-L1, poprzez wiązanie z ligandem lub receptorem, wykazały znaczącą skuteczność kliniczną u pacjentów z różnymi nowotworami, w tym czerniakiem, rakiem jelita grubego, niedrobnokomórkowym rakiem płuc i chłoniakiem Hodgkina. Chociaż wiadomo, że blokada PD-1-PD-L1 aktywuje limfocyty T, niewiele wiadomo na temat roli, jaką ten szlak może odgrywać w makrofagach związanych z nowotworami (tam). Tutaj pokazujemy, że zarówno myszy, jak i ludzkie tam wyrażają PD-1. Ekspresja tam PD – 1 zwiększa się z czasem w mysich modelach raka i wraz ze wzrostem stadium choroby w pierwotnych nowotworach ludzkich. Ekspresja tam PD-1 koreluje ujemnie z działaniem fagocytarnym na komórki nowotworowe, a blokada PD-1-PD-L1 in vivo zwiększa fagocytozę makrofagów, zmniejsza wzrost guza i wydłuża przeżycie myszy w mysich modelach raka w sposób zależny od makrofagów. Sugeruje to, że terapie PD-1-PD-L1 mogą również działać poprzez bezpośredni wpływ na makrofagi, co ma istotne konsekwencje dla leczenia raka tymi środkami.

(2016). „Eradykacja dużych guzów u myszy przez immunoterapię skojarzoną, która angażuje wrodzone i adaptacyjne odpowiedzi immunologiczne.”Nat Med. doi: 10.1038 / nm.4200. PubMed

Blokada punktu kontrolnego z przeciwciałami specyficznymi dla cytotoksycznego białka związanego z limfocytami T (CTLA)-4 lub programowana śmierć komórki 1 (PDCD1; znany również jako PD-1) wywołuje trwałą regresję nowotworu w raku z przerzutami, ale te dramatyczne odpowiedzi są ograniczone do mniejszości pacjentów. Ten nieoptymalny wynik jest prawdopodobnie częściowo spowodowany złożoną siecią szlaków immunosupresyjnych obecnych w zaawansowanych guzach, które są mało prawdopodobne, aby zostać przezwyciężone przez interwencję w jednym punkcie kontrolnym sygnalizacji. Tutaj opisujemy kombinację immunoterapii, która rekrutuje różne wrodzone i adaptacyjne komórki odpornościowe w celu wyeliminowania dużych obciążeń nowotworowych w modelach nowotworów syngeneic i genetycznie zmodyfikowany mysi model czerniaka; według naszej wiedzy guzy tej wielkości nie były wcześniej uleczalne przez zabiegi opierające się na odporności endogennej. Maksymalna skuteczność przeciwnowotworowa wymagała czterech składników: przeciwciało ukierunkowane na antygen nowotworowy, rekombinowana interleukina-2 o wydłużonym okresie półtrwania, anty-PD-1 i potężna szczepionka przeciw komórkom T. Eksperymenty z uszczupleniem wykazały, że limfocyty T CD8+, krzyżujące się komórki dendrytyczne i kilka innych wrodzonych podzbiorów komórek odpornościowych były wymagane do regresji nowotworu. Skuteczne leczenie indukowało infiltrację komórek odpornościowych i produkcję cytokin zapalnych w guzie, zwiększony wychwyt antygenu nowotworowego zależny od przeciwciał i promowane rozprzestrzenianie się antygenu. Wyniki te demonstrują zdolność wywoływanej endogennej odpowiedzi immunologicznej do niszczenia dużych, ustalonych guzów i wyjaśniają podstawowe cechy immunoterapii skojarzonej, które są zdolne do leczenia większości guzów w warunkach eksperymentalnych Zwykle postrzeganych jako trudne.

(2015). „Monocyt CD11c / makrofagi promują przewlekłe zapalenie jelit wywołane przez Helicobacter hepaticus poprzez wytwarzanie IL-23 .”Mucosal Immunol. doi: 10.1038 / mi.2015.65. PubMed

w zapalnych chorobach jelit rozpad w interakcjach drobnoustrojów gospodarza towarzyszy trwałej aktywacji komórek odpornościowych w jelitach. Badania czynnościowe sugerują kluczową rolę interleukiny-23 (IL-23) w organizowaniu zapalenia jelit. IL-23 może być wytwarzana przez różne fagocyty jednojądrzaste (MNPs) po ostrej stymulacji mikrobiologicznej, ale niewiele wiadomo o kluczowych źródłach komórkowych IL-23, które napędzają przewlekłe zapalenie jelit. Tutaj zajęliśmy się tym pytaniem za pomocą fizjologicznego modelu bakteryjnego zapalenia jelita grubego. Łącząc warunkową ablację genów i profilowanie ekspresji genów, odkryliśmy, że produkcja IL-23 przez CD11c + MNPs była niezbędna do wywołania immunopatologii jelitowej i zidentyfikowaliśmy monocyty MHCII+ i makrofagi jako główne źródło IL-23. Ekspresja IL-23 przez monocyty została nabyta podczas różnicowania w jelicie i skorelowana z ekspresją głównego kompleksu zgodności histologicznej klasy II (MHCII) i CD64. W przeciwieństwie do tego, zależne od Batf3 CD103 + CD11b – dendrytyczne komórki były zbędne dla wywołanego przez bakterie zapalenia jelita grubego w tym modelu. Badania te wzmacniają patogenną rolę monocytów w rozregulowanych odpowiedziach na bakterie jelitowe i identyfikują produkcję IL-23 jako kluczowy składnik tej odpowiedzi. Dalsze zrozumienie funkcjonalnych źródeł IL – 23 w różnych postaciach zapalenia jelit może prowadzić do nowych strategii terapeutycznych mających na celu przerwanie patologii immunologicznej opartej na IL-23.Mucosal Immunology advance publikacja online 5 sierpnia 2015. doi: 10.1038 / mi.2015.65.

(2015). „Makrofagi ze znakiem DC (+) kontrolują indukcję tolerancji transplantacji.”Immunitet 42 (6): 1143-1158. PubMed

komórki efektorowe tkankowe linii monocytów mogą różnicować się na różne typy komórek o określonej funkcji komórkowej w zależności od ich środowiska. Fenotyp, wymagania rozwojowe i funkcjonalne mechanizmy odpornościowych makrofagów ochronnych, które pośredniczą w indukcji tolerancji Transplantacyjnej, pozostają nieuchwytne. W tym miejscu wykazujemy, że blokada kostymulacyjna sprzyjała akumulacji makrofagów wyrażających znak DC, które hamowały odporność limfocytów T CD8(+) i promowały ekspansję limfocytów Treg CD4(+)Foxp3(+) w liczbach. Mechanicznie, że jednoczesne zaangażowanie ze znakiem DC przez fukozylowane ligandy i sygnalizację TLR4 było wymagane do produkcji immunoregulującej IL-10 związanej z przedłużonym przeżyciem alogenicznym. Delecja makrofagów wyrażających znak DC in vivo, zakłócająca ich rozwój zależny od CSF1 lub uniemożliwiająca uchylenie tolerancji szlaku sygnałowego znak DC. Łącznie wyniki dostarczają nowego wglądu w tolerancyjne skutki blokady kostymulacyjnej i identyfikują makrofagi hamujące znak DC (+) jako kluczowe mediatory tolerancji immunologicznej z towarzyszącymi implikacjami terapeutycznymi w klinice.

Kaminsky, L. W., et al. (2015). „Aby przetrwać naturalną infekcję wirusową, konieczna jest nadmiarowa funkcja Plazmacytoidów i konwencjonalnych komórek dendrytycznych.”J Virol 89(19): 9974-9985. PubMed

wirusy, które rozprzestrzeniają się systemowo z obwodowego miejsca zakażenia, powodują zachorowalność i śmiertelność w populacji ludzkiej. Wrodzone komórki mieloidalne, w tym monocyty, makrofagi, komórki dendrytyczne pochodzące z monocytów (mo-DC) i komórki dendrytyczne (DC), reagują wcześnie podczas infekcji wirusowej w celu kontrolowania replikacji wirusa, zmniejszając rozprzestrzenianie się wirusa z miejsca peryferyjnego. Wirus Ectromelia (ECTV), ortopokswirus, który naturalnie infekuje myszy, rozprzestrzenia się systemowo z obwodowego miejsca zakażenia i powoduje śmierć podatnych myszy. Podczas gdy komórki fagocytarne odgrywają istotną rolę w odpowiedzi na ECTV, zapotrzebowanie na poszczególne populacje komórek mieloidalnych podczas ostrej odpowiedzi immunologicznej na obwodowe zakażenia wirusowe jest niejasne. W badaniu tym zastosowano różne metody zubożania swoistego dla mieloidów do analizy roli poszczególnych podgrup komórek mieloidalnych w przeżywalności zakażenia ECTV. Wykazaliśmy, że DC są głównymi producentami interferonów typu i (T1-IFN), niezbędnych cytokin do przeżycia po zakażeniu ECTV. DC, ale nie makrofagi, monocyty lub granulocyty, były wymagane do kontroli wirusa i przeżycia myszy po zakażeniu ECTV. Zmniejszenie stężenia plazmacytoidu DC (pDC) w monoterapii lub limfoidalnej podgrupy DC (CD8alpha ( + ) w monoterapii) nie powodowało śmiertelnej wrażliwości na ECTV. Jednak funkcja co najmniej jednego z podgrup pDC lub CD8alpha (+) DC jest wymagana do przeżycia zakażenia ECTV, ponieważ myszy zubożone w obu populacjach były podatne na wyzwanie ECTV. Obecność co najmniej jednego z tych podzbiorów DC jest wystarczająca do wytwarzania cytokin, które zmniejszają replikację ECTV i rozprzestrzenianie się wirusa, ułatwiając przeżycie po zakażeniu. Znaczenie: przed eradykacją wirusa variola, ortopoxvirus, który powoduje ospę, jedna trzecia zakażonych osób Uległa chorobie. Po udanym zwalczaniu ospy, wskaźniki szczepień szczepionką przeciw ospie znacznie spadły. Obecnie wzrasta częstość występowania odzwierzęcych zakażeń ortopokswirusami, dla których nie ma skutecznych metod leczenia. Co więcej, bezpieczeństwo szczepionki przeciw ospie jest bardzo niepokojące, ponieważ mogą pojawić się powikłania, prowadzące do zachorowalności. Podobnie jak wiele wirusów, które powodują znaczące choroby ludzkie, ortoporozy rozprzestrzeniają się z obwodowego miejsca zakażenia, aby stać się ogólnoustrojowe. Badanie to wyjaśnia wczesne zapotrzebowanie na wrodzone komórki odpornościowe w kontrolowaniu obwodowego zakażenia ECTV, czynnikiem sprawczym mousepox. Informujemy, że istnieje redundancja w funkcji dwóch wrodzonych podzbiorów komórek odpornościowych w kontrolowaniu rozprzestrzeniania się wirusa na początku infekcji. Kontrola wirusowa za pośrednictwem tych podzbiorów komórek stanowi potencjalny cel terapii i racjonalnego projektowania szczepionek.

(2015). „Interakcja komensalno-dendrytyczno-komórkowa określa unikalny ochronny podpis immunologiczny skóry.”Przyroda 520 (7545) PubMed

skórka stanowi główny interfejs pomiędzy hostem a środowiskiem. Narząd ten jest również domem dla bilionów mikroorganizmów, które odgrywają ważną rolę w homeostazie tkanek i odporności lokalnej. Społeczności drobnoustrojów skóry są bardzo zróżnicowane i mogą być przebudowywane w czasie lub w odpowiedzi na wyzwania środowiskowe. W jaki sposób, w kontekście tej złożoności, poszczególne mikroorganizmy komensalne mogą w różny sposób modulować odporność skóry, a konsekwencje tych reakcji dla fizjologii tkanek pozostają niejasne. Tutaj pokazujemy, że zdefiniowane komensale dominująco wpływają na odporność skóry i identyfikujemy mediatory komórkowe zaangażowane w tę specyfikację. W szczególności kolonizacja Staphylococcus epidermidis indukuje komórki T IL-17A ( + ) CD8 (+), które są domem dla naskórka, zwiększają wrodzoną odporność barierową i ograniczają inwazję patogenów. Odpowiedzi komensalne specyficzne dla komórek T wynikają ze skoordynowanego działania podgrup komórek dendrytycznych rezydujących w skórze i nie są związane z zapaleniem, ujawniając, że komórki rezydujące w tkankach są gotowe do wyczuwania i reagowania na zmiany w społecznościach mikrobiologicznych. Interakcja ta może reprezentować ewolucyjny sposób, za pomocą którego układ odpornościowy skóry wykorzystuje zmienne sygnały komensalne do kalibrowania odporności barierowej i zapewnienia heterologicznej ochrony przed inwazyjnymi patogenami. Odkrycia te ujawniają, że krajobraz odpornościowy skóry jest wysoce dynamicznym środowiskiem, które może być szybko i specjalnie przebudowane przez spotkania z określonymi komensalami, odkrycia, które mają głęboki wpływ na nasze zrozumienie odporności i patologii specyficznych dla tkanek.

(2014). „IL-3 i CSF-1 współdziałają w celu promowania wytwarzania makrofagów wytwarzających CD11C+ IL-10.”PLoS One 9 (4): e95208. PubMed

odkrycie mechanizmów hematopoezy regulowanej przez wiele cytokin pozostaje wyzwaniem w hematologii. IL-3 jest alergiczną cytokiną o potencjale wielowarstwowym, podczas gdy CSF-1 jest wytwarzany w stanie stacjonarnym z ograniczonym pokryciem linii. Tutaj odkryliśmy pouczającą rolę CSF-1 w hematopoezie za pośrednictwem IL-3. CSF-1 znacząco promował ekspansję komórek cd11c+ napędzaną IL-3 oraz hamował wytwarzanie bazofilów i komórek tucznych ze szpiku kostnego C57BL/6. Dalsze badania wykazały, że oś CSF-1/CSF-1R znacząco przyczyniła się do indukowanej IL-3 generacji komórek CD11c+ poprzez wzmocnienie monopoezy związanej z c-Fos. Komórki CD11c + indukowane IL-3 lub IL-3 / CSF-1 były kompetentne w dojrzewaniu komórkowym i endocytozie. Zarówno komórki IL-3, jak i IL-3/CSF-1 nie miały klasycznego wyglądu komórek dendrytycznych i w morfologii przypominały makrofagi. Obie populacje wytwarzały wysoki poziom IL-10, oprócz IL-1, IL-6 i TNFalpha, w odpowiedzi na LPS i były stosunkowo słabymi stymulatorami komórek T. Łącznie, odkrycia te ujawniają rolę CSF-1 w mediacji szlaku hematopoetycznego IL-3 poprzez monopoezę, która reguluje ekspansję makrofagów CD11c+.

Greter, M., et al. (2012). „GM-CSF kontroluje homeostazę komórek dendrytycznych tkanki niesymfoidalnej, ale jest zbędny do różnicowania zapalnych komórek dendrytycznych .”Immunitet 36 (6): 1031-1046. PubMed

GM-CSF (Csf-2) jest cytokiną krytyczną do wytwarzania in vitro komórek dendrytycznych (DCs) i uważa się, że kontroluje rozwój zapalnych DCs i rezydentnych DCs CD103(+) w niektórych tkankach. Tutaj pokazaliśmy, że w przeciwieństwie do obecnego zrozumienia, receptor Csf-2 działa w stanie stacjonarnym w celu promowania przeżycia i homeostazy NIESYMFOIDALNYCH rezydentów tkankowych CD103(+) i CD11b(+) DCs. Brak receptora Csf-2 w DCs płuc powodował zniesienie odporności limfocytów T CD8 (+) po immunizacji antygenami cząsteczkowymi. Natomiast receptor Csf-2 był zbędny do różnicowania i wrodzonej funkcji zapalnych DCs podczas ostrych urazów. Zamiast tego zapalne DCs wymagały receptora Csf-1 do ich rozwoju. W związku z tym Csf-2 jest ważny w indukowanej szczepionką odporności limfocytów T CD8(+) poprzez regulację homeostazy tkanek niesymfoidalnych DC, a nie kontrolę zapalnych DCs in vivo.

Li, W., et al. (2012). „Intravital 2-photon imaging of leukocyte trading in beating heart.”J Clin Invest 122(7): 2499-2508. PubMed

Dwufotonowa mikroskopia do ciała szklistego znacznie poszerzyła nasze zrozumienie specyficznych dla tkanek i narządów różnic w regulacji odpowiedzi zapalnych. Jednak niewiele wiadomo o dynamicznej regulacji rekrutacji leukocytów do zapalnej tkanki serca, głównie z powodu trudności technicznych związanych z obrazowaniem ruchomej tkanki. Tutaj przedstawiamy metodę obrazowania bicia serca myszy przy użyciu mikroskopu 2-fotonowego do ciała szklistego. Za pomocą tej metody wizualizowaliśmy handel neutrofilami na początku i podczas stanu zapalnego. Niedokrwienie reperfuzyjne uraz wywołany przez transplantację lub przemijające podwiązanie tętnic wieńcowych doprowadziło do rekrutacji neutrofili do serca, ich wynaczynienie z żył wieńcowych i naciek mięśnia sercowego, gdzie tworzyły duże skupiska. Szczepienie serca zawierające zmutowany ICAM-1, ligand ważny dla rekrutacji neutrofili, zmniejszał prędkości pełzania neutrofili w naczyniach i znacznie hamował ich wynaczynienie. Podobne zaburzenia obserwowano w przypadku hamowania Mac-1, receptora ICAM-1. Blokada LFA-1, innego receptora ICAM-1, zapobiegała przyleganiu neutrofili do śródbłonka i wynaczynieniu w przeszczepach serca. Ponieważ reakcje zapalne w sercu mają duże znaczenie dla zdrowia publicznego, to podejście obrazowania jest obiecujące dla badania specyficznych dla serca mechanizmów rekrutacji leukocytów i identyfikacji nowych celów terapeutycznych w leczeniu chorób serca.

Tagliani, E., et al. (2011). „Coordinate regulation of tissue macrophage and Dendritic cell population dynamics by CSF-1.”J Exp Med 208 (9): 1901-1916. PubMed

makrofagi tkankowe (Mphis) i komórki dendrytyczne (DCs) odgrywają istotną rolę w homeostazie i odporności tkanek. Nie wiadomo, w jaki sposób komórki te są utrzymywane w charakterystycznych gęstościach w różnych tkankach. Wspomagani nowatorską techniką cytometrii przepływowej do oceny względnych wskaźników rekrutacji prekursorów przenoszonych przez krew, zbadaliśmy dynamikę populacji MPHI i DC w ciężarnej macicy myszy, gdzie szybki wzrost tkanki ułatwił rozwarstwienie podstawowych mechanizmów regulacyjnych. Pokazujemy, w jaki sposób dynamika Mphi, a tym samym gęstość tkanki mphi, jest lokalnie kontrolowana przez CSF-1, plejotropowy czynnik wzrostu, którego poziom aktywności in situ różni się znacznie między warstwami tkanek macicy. CSF-1 działał częściowo indukując proliferację Mphi, a częściowo stymulując wynaczynienie monocytów Ly6C(hi), które służyły jako prekursory mphi. Rekrutacja Mo była zależna od wytwarzania przez macicę mphis ligandów receptora chemokin ccr2 w odpowiedzi na CSF-1. Nieoczekiwanie, równoległy szlak regulowany przez CSF-1, ale niezależny od CCR2, wpływał na gęstość tkanki macicy DC poprzez kontrolowanie lokalnych wskaźników wynaczynienia przed DC. Łącznie dane te dostarczają komórkowego i molekularnego wglądu w regulację gęstości tkanek Mphi w Warunkach niepalnych i ujawniają kluczową rolę CSF-1 w koordynacji homeostazy MPHI i DC.

Lim, A. K., et al. (2009). „Blokada przeciwciał C – FMS hamuje postęp stanu zapalnego i urazu we wczesnej nefropatii cukrzycowej u otyłych myszy db/db .”Diabetologia 52(8): 1669-1679. PubMed

cele/hipoteza: uszkodzenie nerek za pośrednictwem makrofagów odgrywa ważną rolę w rozwoju nefropatii cukrzycowej. Czynnik stymulujący kolonie (CSF) -1 jest cytokiną wytwarzaną w nerkach cukrzycowych i sprzyja akumulacji makrofagów, aktywacji i przeżywalności. CSF-1 działa wyłącznie przez receptor c-fms, który ulega ekspresji tylko na komórkach linii monocytowo-makrofagowej. W związku z tym zastosowaliśmy blokadę c-fms jako strategię selektywnego ukierunkowania na urazy spowodowane przez makrofagi podczas progresji nefropatii cukrzycowej. Metody: Otyłe myszy z cukrzycą typu 2 db/db BL/KS z ustalonym albuminurią były leczone neutralizującym przeciwciałem monoklonalnym anty-C-fms (AFS98) lub IgG kontrolnym dopasowanym izotypem w wieku od 12 do 18 tygodni i badane pod kątem uszkodzenia nerek. Wyniki: leczenie AFS98 nie miało wpływu na otyłość, hiperglikemię, stężenie monocytów we krwi lub stwierdzoną białkomocz u myszy db/db. Jednak AFS98 zapobiegał hiperfiltracji kłębuszków nerkowych i hamował zmienne stanu zapalnego w nerkach cukrzycowych, w tym makrofagi nerek (gromadzenie, aktywacja i proliferacja), poziomy ligandu motywu chemokiny CC (mRNA i białko w moczu), aktywację szlaków prozapalnych nerek (aminoaktywna kinaza C-Jun i aktywujący czynnik transkrypcyjny 2) i poziomy mRNA Tnf-alfa (znane również jako Tnf). Ponadto AFS98 zmniejszał uszkodzenia tkanek spowodowane przez makrofagi, w tym uszkodzenia kanalików (apoptoza i przerost), uszkodzenia śródmiąższowe (proliferacja komórek i narastanie miofibroblastów) i zwłóknienie nerek (TGF-beta1 i mRNA Col4a1). Wnioski / interpretacja: Blokada c-fms może hamować postęp stwierdzonej nefropatii cukrzycowej u myszy db / db poprzez ukierunkowanie urazu mediowanego przez makrofagi.