Streszczenie
zapalenie szyjki macicy jest częstą chorobą przenoszoną drogą płciową. W ostatnich latach nadużywanie antybiotyku w leczeniu zapalenia szyjki macicy powoduje pojawienie się bakterii odpornych na antybiotyki; potrzebne są alternatywne strategie. W tych badaniach zbadaliśmy wpływ Feilin Vagin Gel (FVG), Chińskiej formuły ziołowej, na leczenie zapalenia szyjki macicy. Dwa modele zapalenia szyjki macicy zostały zoptymalizowane przy użyciu myszy BALB / c; jeden model in vitro został ustanowiony w komórkach HeLa. W modelu Chlamydia trachomatis wywołanym zapaleniem szyjki macicy można zaobserwować wysoki poziom obciążeń bakteryjnych, stan zapalny w tkance i cytokiny w surowicy. Po podaniu FVG, obciążenia bakteryjne w śluzie szyjki macicy i tkance szyjki macicy mogą być znacząco hamowane w sposób zależny od dawki. Patologiczne uszkodzenie szyjki macicy i pochwy, a także poziomy IL-2, IL-17 i MCP-1 w surowicy, mogą być złagodzone przez FVG. FVG zmniejszało liczbę inkluzji wywołanej przez C. trachomatis w komórkach HeLa. Ponadto uszkodzenia histologiczne w modelu Escherichia coli i wywołanym przez Staphylococcus aureus zapaleniem szyjki macicy można zmniejszyć za pomocą FVG. Wyniki te sugerują, że FVG jest zdolny do leczenia zapalenia szyjki macicy poprzez hamowanie patogenów i regulację odpowiedzi immunologicznej gospodarza. FVG może przyczynić się jako alternatywny środek w leczeniu zapalenia szyjki macicy.
1. Wprowadzenie
zapalenie szyjki macicy jest częstą chorobą przenoszoną drogą płciową ze stanem zapalnym szyjki macicy . Zakażenie szyjki macicy rozpoczyna się od dolnych dróg rodnych (pochwy), a następnie rozwija się w chorobę zapalną narządów miednicy mniejszej z rosnącym zakażeniem górnych dróg rodnych (macicy i jajowodów) i jamy otrzewnej . Zapalenie szyjki macicy występowało często jako bezobjawowe zakażenie. Nieprawidłowe wydzieliny śluzowo-śluzowe szyjki macicy lub pochwy i ektopia szyjki macicy mogą być objawami zapalenia szyjki macicy u niektórych pacjentów . Jednak poważne zapalenie szyjki macicy może prowadzić do dalszej niepłodności i ciąży pozamacicznej. Uważa się, że zapalenie szyjki macicy jest związane z przenoszeniem zakażenia HIV i rozwojem raka szyjki macicy .
zapalenie szyjki macicy może być wywołane przez różne patogeny, takie jak Chlamydia trachomatis, Neisseria rzeżączka, Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum, Trichomonas, wirus opryszczki pospolitej, cytomegalowirus i adenowirus . Zakażenie C. trachomatis uważa się za najczęstszą przyczynę zapalenia szyjki macicy. U ponad 10% kobiet z zapaleniem szyjki macicy zdiagnozowano zakażenie wirusem C. trachomatis i liczba tych zakażeń nadal rośnie w ciągu ostatnich dziesięcioleci . C. trachomatis jest Gram-ujemną bakterią wewnątrzkomórkową. W jego cyklu rozwojowym można znaleźć dwie formy C. trachomatis. Przyłączenie ciał elementarnych (EBs) do komórek gospodarza pośredniczy w inwazji C. trachomatis. Wewnątrz komórek gospodarza, C. trachomatis tworzy siateczkowate ciała (RBs), a następnie RBS replikują się w cytoplazmatycznej wakuoli i ostatecznie tworzą inkluzję .
Chlamydia może utrzymywać się przez długi czas w szyjce macicy bez objawów. Zakażenie może ustąpić samoistnie bez leczenia lub może spowodować zapalenie szyjki macicy. Klirens C. trachomatis wymaga odpowiedzi odporności Th1 . Jednak reakcje odporności adaptacyjnej mogą mieć charakter obosieczny i powodować uszkodzenie tkanek. Leczenie zakażenia C. trachomatis opiera się na leczeniu pacjentów i ich partnerów seksualnych makrolidami. Nadużywanie antybiotyków i fałszywie dodatnie diagnozowanie może przyczynić się do pojawienia się organizmów odpornych na antybiotyki. Z drugiej strony bakterie odporne na antybiotyki prowadzą do niepowodzenia leczenia . Po leczeniu antybiotykiem 10% -20% pacjentów cierpi na reinfekcję w ciągu jednego roku, co może być spowodowane brakiem odporności ochronnej przed chlamydią . Biorąc pod uwagę te warunki, konieczne jest opracowanie alternatywnych strategii.
tradycyjna medycyna chińska (TCM) ma długą historię w leczeniu chorób ginekologicznych . Żel dopochwowy Feilin (FVG) został opracowany na podstawie klinicznie stosowanej formuły medycyny chińskiej, która jest stosowana w leczeniu mukoopurulentnego zapalenia szyjki macicy. W skład FVG wchodzą następujące leki ziołowe: Gentianae radix et rhizoma, Stemonae radix, Fraxini cortex, Paeoniae radix rubra, Dictamni cortex i Glycyrrhizae radix et rhizome. Zgodnie z teorią TCM: FVG może być stosowany w leczeniu nagromadzenia wilgoci i toksycznych materiałów wywołanych nieprawidłową wydzieliną z pochwy, taką jak obfite, cuchnące i żółtawe białaczki, swędzenie i ból wokół zewnętrznych narządów płciowych . Badano ekstrakcję, przygotowanie i kontrolę jakości FVG. Stężenia gentiopikrozydu i paeonifloryny w FVG analizowano odpowiednio w przybliżeniu 5,90 mg/g i 8,96 mg / g .
w niniejszym badaniu przetestowaliśmy hipotezę, że FVG może skutecznie leczyć zapalenie szyjki macicy. W celu oceny leczenia FVG opracowano modele mysich zapalenia szyjki macicy. W modelu myszy zakażonej C. trachomatis oceniano obciążenia bakteryjne, uraz patologiczny oraz poziomy MCP-1, IL-2 i IL-17 w surowicy. Inkluzje w komórkach HeLa indukowane przez C. trachomatis wyliczono in vitro. Ponadto, po zakażeniu mieszaniną Escherichia coli i Staphylococcus aureus, leczenie FVG oceniano poprzez badanie histologiczne szyjki macicy.
2. Materiały i metody
2.1. Przygotowanie FVG
sześć leków ziołowych ekstrahowano trzykrotnie wrzącą wodą i wytrącano alkoholem do 70% (v/v) etanolu. Supernatant zatężono za pomocą wyparki rotacyjnej do gęstości względnej 1,30-1,35 (50°C), aby uzyskać ekstrakcję Feiliny (FE, 5,62 g/g). Bazą żelową była mieszanina carbopol 941 i gumy ksantanowej. Ekstrakcję zmieszano z żelową bazą, aby uzyskać FVG. Obciążenie lekiem FVG wynosiło 2,5 g/g, 1,25 G/g i 0,625 G/g.
2,2. Szczepy bakterii i komórki gospodarza
Chlamydia trachomatis mysi szczep pneumonitis Nigg II (ATCC® VR-123™), Escherichia coli (ATCC® 25922™) i Staphylococcus aureus (ATCC® 25923™) uzyskano z kolekcji hodowli typu amerykańskiego. E. coli i S. aureus hodowano w bulionie odżywczym. Ludzka linia nabłonka szyjki macicy hela (ATCC ® CCL-2™) została zakupiona z kolekcji Kultury Chińskiej Akademii Nauk Medycznych i hodowana w pożywce rpmi 1640 zawierającej 10% FBS w 37°C w obecności 5% CO2. C. trachomatis N rozmnażano w komórkach HeLa. Przed zakażeniem zakażone komórki HeLa (105 komórek/mL) zostały przerwane i odwirowane. Supernatant zebrano w celu uzyskania oczyszczonych ciał elementarnych (EBs), które można wykorzystać do bezpośredniego zarażania myszy i komórek HeLa.
2.3. Infekcje i leczenie zwierząt
120 samic myszy BALB / c (18-20 g) zakupiono od Charles River Laboratories China (Pekin, Chiny). Zwierzęta były przetrzymywane w zakładzie dla zwierząt zaporowych BSL2. Wszystkie opisane tutaj eksperymentalne procedury na zwierzętach były za zgodą Instytutu Chińskiej Akademii chińskich nauk medycznych, Chińskiej Materia Medica, komitetu etyki. Numer referencyjny zatwierdzenia ethic to 20162019.
tkanka szyjki macicy myszy BALB/c została zraniona igłą pod kątem w znieczuleniu. Następnie myszy zaszczepiono 50 µL C. trachomatis N lub mieszaniną E. coli i S. aureus (109 CFU/mL). Myszy zarażano raz dziennie i powtarzano przez trzy dni. 24 godziny po ostatnim zakażeniu FVG podawano do pochwy myszy za pomocą pipety (objętość FVG była dokładnie kontrolowana) w dawce 2,2 g/kg, 1,1 g/kg i 0,55 g/kg przez 12 dni. Czopki Policresulen (PS), jako pozytywną kontrolę, mieszano z żelową bazą i podawano w dawce 16,5 mg / kg przez 12 dni. Grupie kontrolnej i grupie modelowej podano jednakową objętość żelowej bazy. W dniu , , i leczenia pobrano wymaz z szyjki macicy. W dniu 15 myszy znieczulono, pobrano próbki krwi z aorty brzusznej i oddzielono surowicę. Myszy zabijano następnie przez zwichnięcie szyjki macicy w znieczuleniu, a szyjkę macicy i pochwę usuwano. Schemat czasu eksperymentalnego pokazano na fig. 1.
2.4. Analiza ELISA C. trachomatis N, IL-2, IL-17 i MCP-1
wymazy ze śluzem szyjki macicy były rozproszone z równą objętością PBS, czyli poziomem C. trachomatis N w PBS analizowano za pomocą zestawu enzymatycznego testu immunosorbentu (ELISA) (Meilian, Szanghaj, Chiny) zgodnie z instrukcją producenta (dodać 50 µL próbki i 50 µL przeciwciała wykrywającego do każdej studzienki i inkubować w temperaturze 37°C przez 1 godzinę; przemyć studzienki, dodać 100 µL koniugatu HRP do każdej studzienki i inkubować w temperaturze 37°C przez 0,5 godziny; umyć studzienki, dodać 50 µL substratów chromogennych do każdej studzienki i inkubować w temperaturze 37°C przez 1 godzinę; 0,5 godziny; dodać 50 µl roztworu stop do każdej studzienki; odczytać absorbancję każdej studzienki przy 450 nm). Poziomy IL-2, IL-17 i MCP-1in w surowicy oznaczano za pomocą zestawu ELISA (Meilian, Szanghaj, Chiny) zgodnie z instrukcjami producenta, jak opisano powyżej.
2.5. Analiza RT-PCR C. trachomatis n
całkowitego RNA wyekstrahowano z szyjki macicy za pomocą Trizolu (Invitrogen, Kalifornia, USA); ekspresję genów docelowych analizowano za pomocą one Step SYBR Prime Script RT-PCR Kit II (TaKaRa, Pekin, Chiny) za pomocą Piko Real 96 (Thermo Fisher Scientific, Massachusetts, USA). Podkłady zastosowano w następujący sposób: 16S rRNA forward primer, 5 ’- ACC CGT TGG ATT TGA GCG TA-3′; 16S rRNA reverse primer, 5′-GTT GAG CCC CGA GAT TTG AC-3′; GAPDH forward primer, 5′-GCT GAG TAT GTC GTG GAG T-3′; GAPDH reverse primer, 5′-GTT CAC ACC CAT CAC AAA C-3′. Obliczono względną ekspresję genu N C. trachomatis i genu myszy zgodnie z tą metodą.
2.6. Badanie histologiczne
tkanki myszy utrwalono 10% formaldehydem, następnie osadzono w parafinie i pokrojono na plastry w celu barwienia hematoksyliny i eozyny. Sekcje zostały poddane ocenie wizualnej przez DMLB (Leica Camera AG, Wetzlar, Niemcy); z każdej próbki przygotowano dwie sekcje. Do klasyfikacji zmian patologicznych zastosowano następujące kryteria.
„-” szyjka macicy i nabłonek pochwy nie wykazują rozrostu i stanu zapalnego, a tkanki są w normie.
„+” szyjka macicy i nabłonek pochwy mają łagodny rozrost; tkanka łączna ma łagodny segmentarny stan zapalny.
„++” nabłonek szyjki macicy i pochwy ma rozrost; tkanka łączna została naciekana przez komórki zapalne.
„+++” szyjka macicy i nabłonek pochwy mają znaczny rozrost i są naciekami komórek zapalnych; tkankę łączną otaczały rozlane stany zapalne i zatory naczyniowe.
2.7.
komórki hela zaszczepiono w 6-studzienkowej płytce o gęstości 2×105 komórek / studzienkę i hodowano przez 48 godzin. następnie komórki inkubowano z pożywką C. trachomatis N EBS. Płytkę odwirowywano w temperaturze 32°C przez 1 godzinę i stale hodowano w temperaturze 37 ° C w obecności 5% CO2 przez 2 godziny. podłoże zakażonych komórek zastąpiono Fe (500, 250 i 125 µg/mL) zawierało podłoże i inkubowano przez kolejne 48 godzin. Następnie komórki przemyto PBS, utrwalono metanolem i zabarwiono Giemsą. Inkluzje w komórkach HeLa zostały przechwycone przez IX71 (Olympus, Tokio, Japonia) i wyliczone.
2.8. Analiza statystyczna
analizy statystyczne przeprowadzono przy użyciu programu GraphPad Prism V.6 (GraphPad Software, Kalifornia, USA). Wszystkie dane były normalnie dystrybuowane (test Kołmogorowa-Smirnowa). Liczbę inkluzji i wyniki histologiczne analizowano za pomocą testu U Manna-Whitneya; inne analizowano za pomocą niesparowanego testu T. Za znaczącą uznano wartość p< 0.05.
3. Wyniki
3.1. FVG hamuje poziom C. trachomatis N w śluzie szyjki macicy
EBs C. trachomatis kiełkuje i tworzy RBs po inwazji komórek gospodarza. RBs zaczynają się mnożyć po 7-21 dniach. Enzymatyczny test immunologiczny jest powszechnie stosowaną metodą niekontrolowaną do diagnozowania zakażenia chlamydialnego . Przeanalizowaliśmy poziom C. trachomatis N w śluzie szyjki macicy, aby ocenić nasilenie infekcji myszy.
we wczesnym stadium zakażenia C. trachomatis N nie zaobserwowano znaczącej zmiany obciążenia bakteryjnego. 10 dni po pierwszym zakażeniu wzrost C. trachomatis N u myszy może być badany. W dniu,poziom obciążenia bakteryjnego był znacznie wyższy niż w grupie kontrolnej(ryc. 2 (A)). Przy kolejnym leczeniu FVG (2,2, 1,1, 0,55 g/kg) poziom C. trachomatis n u myszy w śluzie szyjki macicy może być silnie hamowany w sposób zależny od dawki(fig.2(C) i 2 (d)).
(a)
(b)
(c)
(d)
(a)
(b)
(c)
(d)
3.2. FVG hamuje obciążenie C. trachomatis N w szyjce macicy
w diagnostyce zakażenia chlamydialnego technika amplifikacji kwasu nukleinowego, w tym reakcja łańcuchowa polimerazy (PCR), jest bardziej wrażliwa i swoista niż test immunologiczny enzymu . W związku z tym dodatkowo testowaliśmy obciążenie C. trachomatis N w szyjce macicy myszy metodą RT-PCR. W dniu 15 ekspresja 16S rRNA C. trachomatis n u myszy była znacząco wyższa niż w grupie kontrolnej (Fig.3). Leczenie FVG (2,2; 1,1 g/kg mc.) przez 12 dni może silnie hamować obciążenie C. trachomatis N w szyjce macicy (ryc. 3).
3.3. FVG zmniejsza C. trachomatis N-indukowane zapalenie szyjki macicy i pochwy
zakażenie C. trachomatis u myszy jest odpowiednim modelem do badania zakażeń dróg rodnych. Infekcja nie wywołuje ciężkiej patologii narządów płciowych górnych dróg moczowych . Analizowano patologię szyjki macicy i pochwy w celu scharakteryzowania nasilenia zakażenia C. trachomatis N.
Jak pokazano na fig.4, w grupie kontrolnej komórki nabłonka i tkanki łącznej szyjki macicy były prawidłowe, nie obserwowano przerostu ani stanu zapalnego. W grupie modelowej warstwy nabłonka szyjki macicy mają rozrost, a komórki zapalne przenikają do nabłonka i tkanki łącznej. Po leczeniu FVG (1,1 g/kg) patologiczne uszkodzenie szyjki macicy może być znacznie zmniejszone (ryc. 4).
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
jak pokazano na fig.5, w grupie kontrolnej nabłonek pochwy był prawidłowy, nie zaobserwowano rozrostu ani stanu zapalnego. W grupie modelowej warstwy nabłonka pochwy mają rozrost, a komórki zapalne przenikają do tkanki nabłonka. Po leczeniu FVG (2,2, 1,1 g/kg) uszkodzenie pochwy może być znacznie zmniejszone (ryc. 5).
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
3.4. FVG zmniejsza odpowiedź cytokin w surowicy w zakażeniu C. trachomatis N
cytokiny mogą być uwalniane przez komórki nabłonkowe i komórki odpornościowe po zakażeniu C. trachomatis, z których większość pochodzi z komórek Th1. Cytokiny te przyczyniają się do odpowiedzi immunologicznej, ale wywołują patologiczne uszkodzenia . Poziomy cytokin w surowicy testowano na poparcie wyników badań histologicznych. W tym dniu poziomy IL-2, IL-17 i MCP-1 zostały znacznie podwyższone (ryc. 6). Trzy dawki FVG mogą skutecznie hamować uwalnianie IL – 17 i MCP-1. Wytwarzanie IL-2 może być zmniejszone przez FVG w małych dawkach (1,1 i 0,55 g/kg).
(a)
(b)
(c)
(a)
(b)
(C)
3.5. FVG zmniejsza liczbę inkluzji wywołanej przez C. trachomatis in Vitro
proliferacja C. trachomatis występuje w komórkach gospodarza z tworzeniem RBs. Inkluzja może powstać około 12 h po zakażeniu, które zawiera liczbę RBs . Hamowanie in vitro FVG w zakażeniu C. trachomatis N oceniano z uwzględnieniem liczby włączonych. Po inkubacji komórek HeLa z C. trachomatis N przez 48h można było zaobserwować inkluzje z plamą Giemsa. Po leczeniu FVG (FE) Liczba włączania została znacząco zmniejszona w sposób zależny od dawki (rycina 7).
3.6. FVG zmniejsza patologiczne uszkodzenie szyjki macicy wywołane przez E. coli i S. aureus
, mimo że C. trachomatis jest uważany za najczęstszy patogen zapalenia szyjki macicy, beztlenowce, takie jak E. coli, S. aureus i Klebsiella pneumoniae, mogą być izolowane u pacjentów z zapaleniem szyjki macicy . Model szczurzego zapalenia szyjki macicy zakażony mieszaniną E. coli, S. aureus i N. rzeżączki został ustalony w naszej poprzedniej pracy . W obecnych badaniach zoptymalizowano model myszy zakażonych mieszaniną E. coli i S. aureus. 14 dni po pierwszym zakażeniu okazało się, że szyjka macicy jest poważnie zakażona.
w grupie kontrolnej nabłonek szyjki macicy był prawidłowy i nie obserwowano przerostu ani stanu zapalnego. W grupie modelowej wewnętrzne warstwy nabłonka szyjki macicy mają rozrost, a komórki zapalne (neutrofile i eozynofile) zostały poważnie naciekane do tkanki nabłonka. Po leczeniu FVG (2,2 i 1,1 g/kg) zapalenie szyjki macicy może być znacząco zahamowane (ryc. 8).
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
4. Dyskusja
rozpoznanie zapalenia szyjki macicy jest trudne ze względu na brak oczywistego objawu. U niektórych pacjentów można zaobserwować nieprawidłową wydzielinę mukoopurulentną i ektopię szyjki macicy . W ostatnich dziesięcioleciach powstało wiele modeli zapalenia szyjki macicy ssaków. Makaki, szczury i myszy mogą być wykorzystane do ustalenia modelu zapalenia szyjki macicy. Do wywołania zapalenia szyjki macicy można wykorzystać zarówno bakterie (C. trachomatis), jak i związki chemiczne (fenol, kwas octowy). W badaniach tych zoptymalizowano dwa modele myszy. Po zakażeniu C. trachomatis N, obciążenie bakteryjne C. trachomatis N w śluzie szyjki macicy stale wzrastało w czasie. Zakażenie C. trachomatis N może prowadzić do zwiększenia stężenia cytokin w surowicy i zapalenia w tkankach pochwy i szyjki macicy. Po zakażeniu mieszaniną E. coli i S. aureus, uszkodzenie szyjki macicy może być wykryte w diagnostyce patologicznej.
klinicznie antybiotyki były pierwszym wyborem w leczeniu zapalenia szyjki macicy według różnych patogenów. Ale pojawienie się opornych na antybiotyki, takich jak oporne na chinolony C. trachomatis i N. rzeżączka, oporna na metycylinę S. aureus i oporna na wankomycynę E. coli stają się poważnym problemem na całym świecie z powodu nadużywania antybiotyków . TCM może przyczynić się do alternatywnych strategii leczenia zapalenia szyjki macicy. W tym badaniu badano wpływ FVG na zapalenie szyjki macicy.
FVG to żel dopochwowy, którego żelową bazą jest mieszanina carbopol 941 i gumy ksantanowej . W ostatnich latach w leczeniu zapalenia szyjki macicy stosowano wiele komercyjnych preparatów żelowych dopochwowych Chińskiej formuły ziołowej . Dostarczanie leku dopochwowego jest tradycyjną drogą dostarczania leku na błonę śluzową, która może być stosowana w leczeniu zarówno chorób lokalnych, jak i ogólnoustrojowych . Tradycyjne preparaty, takie jak czopki, żele, tabletki, filmy dopochwowe, irygacje i pessaries mogą być stosowane jako preparaty dopochwowe . Jako jeden z najczęściej stosowanych systemów dostarczania leków, żele dopochwowe zostały wykorzystane do przygotowania mikrobicydów, środków antykoncepcyjnych, induktorów pracy i hormonów płciowych. W porównaniu z innymi systemami dostarczania leków, żel dopochwowy jest bezpieczniejszy i ma wyższą biodostępność .
wszystkie sześć leków ziołowych w FVG można stosować w leczeniu chorób ginekologicznych w TCM . Zgodnie z teorią TCM, w tej formule, Gentianae radix et rhizome jest „lekiem monarch” lub „głównym lekiem”, stemonae radix i fraxini cortex są” lekiem ministerialnym „lub” lekiem pomocniczym”, paeoniae radix rubra i dictamni cortex są” lekiem adiuwantowym”, a glycyrrhizae radix et rhizome jest”lekiem prowadzącym”. Gentianae radix et rhizome mogą w największym stopniu wpływać na działanie FVG. Irydoidy i ogółem glukozydy piwonii są izolowane głównie odpowiednio z Gentianae radix et rhizoma i Paeoniae radix rubra. Związki te wykazują znaczące działanie przeciwzapalne . Alkaloidy i limonoidy przyczyniają się do antybakteryjnego działania kory Dictamni . Kumaryny w korze Fraxini i flawony w Glycyrrhizae radix et rhizome wykazują działanie przeciwbakteryjne i przeciwzapalne . Alkaloidy przyczyniają się do działania owadobójczego Stemonae radix . Te bioaktywne związki tych leków ziołowych mogą wspierać leczenie FVG w zapaleniu szyjki macicy.
IL-17 jest wytwarzana przez komórki Th17. Klinicznie stężenie IL-17 w wydzielinie narządów płciowych u pacjentów zakażonych C. trachomatis jest znacznie wyższe niż u niezakażonych kobiet . Wysoki poziom IL – 17 w modelu zapalenia szyjki macicy myszy był zgodny z wynikiem klinicznym. Poziomy IL – 2 i MCP-1 są związane z odpowiedziami Th1. IL-2 jest wydzielana z komórek Th1 i stymuluje produkcję cytokin. Istnieje odwrotna korelacja między poziomem MCP-1 A odpowiedziami Th1. Hamowanie MCP-1 może zwiększyć produkcję IFN-γ . FVG może obniżyć stężenie IL-2, IL-17 i MCP-1. Wyniki te sugerowały, że FVG może hamować zapalenie szyjki macicy poprzez regulację odpowiedzi immunologicznej gospodarza.
na początku cyklu infekcji C. trachomatis system wydzielania typu III umożliwia EBS inwazję na komórki gospodarza . Po internalizacji C. trachomatis następuje rozwój RBs i inkluzji. Inhibitor układu wydzielania typu III może blokować powstawanie inkluzji . Badanie in vitro wykazało, że FVG może hamować liczbę inkluzji do komórek HeLa.
podsumowując, z powodzeniem stworzyliśmy dwa modele zapalenia szyjki macicy u myszy z zakażeniem C. trachomatis N, S. aureus i E. coli. Udowodniliśmy, że FVG może znacząco hamować zapalenie szyjki macicy. FVG może zmniejszyć obciążenie bakteryjne, złagodzić patologiczne obrażenia i zmniejszyć liczbę inkluzji. Działanie FVG wiązało się z hamowaniem patogenów i regulacją odpowiedzi immunologicznej gospodarza. Badania te dostarczają dowodów na to, że FVG może być stosowany jako nowy środek alternatywny, który łagodzi problem oporności na antybiotyki podczas leczenia zapalenia szyjki macicy.
dostępność danych
dane użyte do potwierdzenia wyników tego badania są zawarte w artykule.
konflikty interesów
autorzy nie mają żadnych konfliktów interesów związanych z tą pracą.
wkład autorów
Xin Mao i Ronghua Zhao w równym stopniu przyczynili się do tej pracy.
podziękowania
to badanie zostało wsparte przez National Natural Science Foundation Of China (nr 81773977 i 81774204).
