tekst

Chlamydia trachomatis i Neisseria gonorrhoeae są najbardziej rozpowszechnionymi bakteryjnymi zakażeniami przenoszonymi drogą płciową (STI) na świecie (1). Przebieg tych infekcji jest nieprzewidywalny i zróżnicowany (2-7). Większość zakażeń u kobiet przebiega bezobjawowo i często pozostaje nierozpoznana, co zwiększa ryzyko powikłań układu rozrodczego (6, 8-10). Wgląd w mechanizmy, które napędzają obciążenie tymi infekcjami, jest niezbędny do zwalczania chorób. Oprócz wieku, zakażenia HIV i czynników behawioralnych, cechy mikrobiologiczne, w tym obciążenie bakteryjne, mogą odgrywać ważną rolę w ryzyku przeniesienia, prezentacji klinicznej i przebiegu zakażenia (6, 11-14). W modelach zwierzęcych i u pacjentów z zakażeniem C. trachomatis w obrębie oka (15-17) obciążenie chlamydialne było związane z występowaniem objawów klinicznych, ciężkością zakażenia i przenoszalnością. Wykazano, że rzeżączka różni się w zależności od lokalizacji anatomicznej i związanych z nią objawów klinicznych u mężczyzn (18). Chociaż w czasie rzeczywistym PCR i ilościowa ocena obciążenia DNA mogą ujawnić nowe informacje na temat cech zakażenia, istnieje tylko ograniczona literatura na temat znaczenia obciążenia bakteryjnego i częstotliwości jednoczesnego występowania STI u kobiet(19, 20). Wiedza na temat mikrobiologicznych cech zakażenia mogłaby przyczynić się do lepszego zrozumienia różnic w występowaniu STI na poziomie populacji. Badanie to miało na celu ocenę współbieżności i obciążenia bakteryjnego zakażeń narządów płciowych i odbytnicy C. trachomatis i N. gonorrhoeae u kobiet z Afryki Południowej z wysokim wskaźnikiem rozpowszechnienia wirusa HIV.

to badanie było subanalizą wcześniej opisanego badania przekrojowego z udziałem 604 kobiet w wiejskiej dzielnicy Mopani w Republice Południowej Afryki (21). Krótko mówiąc, kwalifikowały się kobiety w wieku od 18 do 49 lat, które zgłosiły aktywność seksualną w ciągu ostatnich 6 miesięcy. Wypełniono kwestionariusze, a pracownicy służby zdrowia pobrali wymazy z pochwy, odbytu i gardła (Copan Diagnostics, Brescia, Włochy) i przechowywali je w temperaturze -20°C. miesiączki w dniu rekrutacji i odmowy badania wszystkich trzech anatomicznych miejsc były kryteriami wykluczenia. Kobiety z objawami były leczone tego samego dnia zgodnie z lokalnymi protokołami leczenia, w tym listem zgłoszeniowym dla partnera. Bezobjawowe kobiety z STI udowodnionym wykrywaniem molekularnym zostały wezwane do powrotu do kliniki w celu specyficznego leczenia. Do oceny przedstawionej w niniejszym artykule wybraliśmy wszystkie kobiety (n = 263) zakażone dopochwowo i/lub odbytniczo co najmniej jednym z następujących patogenów: C. trachomatis (n = 107), N. gonorrhoeae (N = 66), Mycoplasma genitalium (N = 66) i Trichomonas vaginalis (n = 116). Ponieważ zaobserwowaliśmy tylko jedną kobietę z infekcją jamy ustnej i gardła, wykluczyliśmy tę anatomiczną lokalizację z dalszych analiz. Human Ethics Research Committee Uniwersytetu w Witwatersrand, RPA, zatwierdził badanie(Nr referencyjny M110726), w tym badania M. genitalium i T. vaginalis.

suche wymazy zostały przetransportowane na suchym lodzie w celu wykonania analizy laboratoryjnej w laboratorium Immunogenetyki, VU University Medical Center, Amsterdam, Holandia. DNA bakterii wyekstrahowano za pomocą zestawu do przygotowania szablonu PCR o wysokiej czystości (Roche Diagnostics, Indianapolis, IN), a następnie w czasie rzeczywistym wykrywano PCR C. trachomatis, N. gonorrhoeae i T. vaginalis przy użyciu testu PrestoPluS ct-NG-TV (Microbiome Ltd. 21, 22) (D. J. De Waaij, J. H. Dubbink, R. P. H. Peters, S. Ouburg, and S. A. Morré, niepublikowane dane). Obciążenie DNA bakterii C. trachomatis i N. gonorrhoeae obliczono w następujący sposób. Wartość CP (crossing-point), czyli liczba cykli amplifikacji przed osiągnięciem znormalizowanego progu, była związana z krzywą kalibracji znanej ilości DNA C. trachomatis i N. ilość DNA gonorrhoeae w celu określenia ilości DNA bakterii. W naszej analizie, ładunek bakterii jest podany jako logarytm liczby jednostek inkluzji tworzących (IFU) na nanoliter dla C. trachomatis i jako logarytm liczby kopii na mikrolitr dla N. gonorrhoeae. Analizy statystyczne przeprowadzono przy użyciu testu chi-kwadrat lub dokładnego testu Fishera i testu U Manna-Whitneya w celu porównania zmiennych dychotomicznych i ciągłych między grupami. Wartość P poniżej 0,05 została uznana za statystycznie istotną dla wszystkich badań.

spośród 263 kobiet z chorobami przenoszonymi drogą płciową i / lub anorektalną, 247 (94%) miało chorobę przenoszoną drogą płciową, a 73 (27%) anorektalną. Mediana wieku wszystkich kobiet (N = 263) wynosiła 29 (zakres, od 18 do 49) lat, a zakażenie HIV zgłosiło 33%, podczas gdy 44% zgłosiło wynik ujemny na HIV w ciągu ostatnich 6 miesięcy, a 24% nie znało swojego statusu. Fellatio odnotowano u 13% kobiet, a stosunek odbytu (Rai) u 5,5%.

rozkład mikroorganizmów płciowych przedstawiono na Fig. 1. Zakażenie odbytnicy zostało wywołane U 64 (88%)/73 kobiet przez pojedynczy mikroorganizm: C. trachomatis w 34/43, N. gonorrhoeae w 9/15, M. genitalium w 16/17, A T. vaginalis w 5/7. Pojedyncze zakażenia występowały znacznie częściej w miejscu odbytu niż w miejscu narządów płciowych (88% w porównaniu do 74%, P = 0,013). Spośród 107 kobiet z zakażeniem C. trachomatis, 32 (30%) kobiet miało podwójne zakażenie (połączone zakażenie narządów płciowych i odbytnicy). Wśród 66 kobiet z zakażeniem N. gonorrhoeae, 9 (14%) kobiet miało podwójne zakażenie. Wśród 66 i 116 kobiet z zakażeniem M. genitalium i T. vaginalis, 3 (4,5%) i 4 (3,4%) kobiety miały podwójne zakażenie, odpowiednio.

mediana obciążenia narządów płciowych C. trachomatis wynosiła 2, 7 log10 IFU/nl (zakres, 0, 36 do 4, 5), a odbytnicy C. trachomatis wynosiła 2, 5 log10 IFU/nl (zakres, 0, 58 do 3, 6). Dla N. gonorrhoeae, mediana obciążenia narządów płciowych wynosiła 2,7 log10 kopii / µl (zakres od 1,6 do 8,0), a zakażenia odbytnicy 4,4 log10 kopii/µl (zakres od 2,2 do 6,3). Cechy i skojarzenia obciążenia bakteryjnego narządów płciowych i odbytnicy przedstawiono w tabeli 1. W analizach wielowymiarowych, Wiek ≤24 lata (P = 0, 009) i ciąża (P=0, 023) były niezależnie związane z większym obciążeniem C. trachomatis i tą samą grupą wiekową (P < 0, 0001) i miały więcej niż 1 partnera seksualnego w ciągu ostatnich 6 miesięcy (P = 0, 029) z większym obciążeniem N. gonorrhoeae. Skojarzenie równoczesnego związku w ostatnim roku z obciążeniem N. gonorrhoeae nie było już widoczne w analizie wielowymiarowej (P = 0,32).

niniejszy raport opisuje zgodność STI i obciążenia DNA bakteryjnego u kobiet w RPA z chlamydią narządów płciowych i odbytnicy zakażenie trachomatis i Neisseria gonorrhoeae. Opublikowano tylko kilka doniesień z badań nad tymi mikrobiologicznymi cechami zakażenia i według naszej wiedzy jest to pierwszy raport z badania przeprowadzonego na obszarach wiejskich o wysokiej częstości występowania HIV. Zaobserwowaliśmy, że prawie połowa kobiet z zakażeniem narządów płciowych C. trachomatis (47%) i N. gonorrhoeae (48%) miała współistniejące zakażenie narządów płciowych. Chociaż wiedza na temat znaczenia zakażeń mieszanych jest ograniczona, mogą one teoretycznie zwiększać podatność na długotrwałe powikłania i zdolność do przenoszenia poszczególnych chorób przenoszonych drogą płciową. Mieszane zakażenia odbytnicy były znacznie mniej powszechne wśród kobiet niż STI narządów płciowych, ponieważ 88% tych zakażeń było spowodowanych przez pojedynczy mikroorganizm. Potencjalnym wyjaśnieniem byłoby rzadsze narażenie na infekcje, ponieważ RAI nie było powszechne w naszej kohorcie oraz różne podatności błony śluzowej odbytu na niektóre mikroorganizmy.

kobiety z podwójnym zakażeniem miały znacznie większe obciążenie narządów płciowych C. trachomatis i N. gonorrhoeae niż kobiety tylko z zakażeniem narządów płciowych. Według naszej wiedzy, nie było to wcześniej zgłaszane i może wspierać hipotezę o autoinokulacji przez płyny szyjkowo-pochwowe z pochwy do odbytnicy. Ta możliwa rola spillover może tłumaczyć wysoką częstość występowania zakażenia odbytnicy pomimo niskiej częstości występowania RAI w naszym badaniu (23, 24).

nie zaobserwowaliśmy znaczącej różnicy między obciążeniami bakteryjnymi pojedynczych i mieszanych zakażeń dla któregokolwiek z chorób przenoszonych drogą płciową. Podobnie jak w przypadku dwóch innych badań opartych na teście amplifikacji kwasów nukleinowych (NAAT), nie zaobserwowaliśmy związku między obciążeniem bakteryjnym a objawami narządów płciowych (25, 26). Vodstrcil i współpracownicy zaobserwowali w niedawnym przeglądzie, że badania oparte na kulturze są bardziej prawdopodobne, aby znaleźć związek z objawami niż badania oparte na NAAT (89% w porównaniu z 38%) (27). Może to odzwierciedlać skłonność żywych organizmów do ściślejszego wiązania się z objawami klinicznymi. Młodszy wiek i ciąża były niezależnie związane z większym obciążeniem bakteryjnym C. trachomatis i młodszy wiek oraz posiadanie więcej niż jednego partnera seksualnego w ciągu ostatnich 6 miesięcy z większym obciążeniem N. gonorrhoeae. Ten sam związek z wiekiem (dla C. trachomatis) w kilku badaniach NAAT został opisany wcześniej i może być spowodowany zmianami w nabłonku szyjki macicy lub młodszymi kobietami, które są bardziej aktywne seksualnie i wykazują bardziej ryzykowne zachowanie lub może odzwierciedlać nabytą odporność u dorosłych (28-30). Było kilka ograniczeń w naszych badaniach. Po pierwsze, nie uwzględniliśmy zmienności próbkowania, zgłaszając obciążenia odpowiadające liczbie komórek eukariotycznych. Jednakże, ponieważ komórki zapalne, które są przyciągane do miejsca zakażenia, zostałyby włączone do komórek objętych próbą, obciążenie przypadające na komórkę eukariotyczną zmniejszyłoby się (25). Drugim ograniczeniem może być wykorzystanie przechowywanych próbek, ale literatura nie wykazuje klinicznie istotnego wpływu na degradację (31). Ostatnie ograniczenie może być reprezentowane przez kobiety stosujące środki przeciwdrobnoustrojowe, czynnik, który mógł spowodować, że do pewnego stopnia nie doceniamy naszych wyników, ponieważ nie było to kryterium wykluczające.

podsumowując, badanie to wykazało częste równoczesne zakażenia C. trachomatis i N. gonorrhoeae i różnice w obciążeniach bakteryjnych w warunkach wysokiej częstości występowania HIV. Te nowe spostrzeżenia mogą pomóc w wyjaśnieniu różnic w częstości występowania chorób przenoszonych drogą płciową na poziomie populacji, gdzie konieczne jest zwiększenie wysiłków w celu kontrolowania ciężaru zakażeń C. trachomatis i N. gonorrhoeae.