tijdens hun in vivo ageing, red blood cells (RBC) increase in density and become smaller. Age-defined RBC subpopulaties worden meestal verzameld door middel van centrifugeren. Een fractionering volgens RBC volume is voorgesteld als een beter alternatief voor een dergelijke leeftijd scheiding. Omdat enkele in de literatuur gerapporteerde gegevens enige discrepanties tussen de twee methoden aangeven, werden bloedmonsters gescheiden door middel van centrifugeren of door middel van tegenstroom centrifugeren, en werden enkele kenmerken van de aldus gefractioneerde RBC bestudeerd. De enzymactiviteit neemt af wanneer de dichtheid toeneemt of wanneer het volume (MCV) afneemt. De vergelijking van andere RBC-kenmerken suggereert echter sterk dat deze twee procedures niet leiden tot het verzamelen van dezelfde RBC-subpopulaties: bijvoorbeeld, het hemoglobinegehalte stijgt wanneer de MCV stijgt, terwijl het constant blijft ongeacht de RBC-dichtheid. Bij radioactief gelabelde cellen wordt 1) de meest dichte RBC teruggevonden in alle RBC‐subpopulaties die van grootte zijn gescheiden, ook al concentreren ze zich meestal in de fracties met de grootste MCV, en 2) de kleinste RBC wordt vrijwel eerlijk verdeeld in alle RBC‐subpopulaties, ongeacht hun dichtheid, terwijl de grootste RBC voornamelijk, maar niet uitsluitend, aanwezig is in de fracties met een hoge dichtheid. Zo komt fractionering volgens grootte niet overeen met scheiding volgens dichtheid. In combinatie met de resultaten van in vivo experimenten bij muizen en met het feit dat reticulocyten aanwezig zijn in alle groottescheidende fracties, suggereren deze gegevens dat tegenstroomcentrifugatie een zeer twijfelachtige procedure kan zijn om een RBC‐fractionering te bereiken volgens leeftijd en daarom dat RBC-volume mogelijk geen betrouwbaar criterium is voor de leeftijd van RBC.