InVivoMAb anti-mouse CSF1R (CD115) (Clone: AFS98)

Bauche, D., et al. (2018). “LAG3(+) Regulatory T Cells Restrain Interleukin-23-Producing CX3CR1(+) Gut-Resident Macrophages during Group 3 Innate Lymphoid Cell-Driven Colitis.” Immunity 49(2): 342-352 e345. PubMed

Interleukin-22 (IL-22)-producing group 3 innate lymphoid cells (ILC3) maintains gut homeostasis but can also promote inflammatory bowel disease (IBD). The regulation of ILC3-dependent colitis remains to be elucidated. Hier tonen we aan dat Foxp3 (+) regulerende T-cellen (Treg-cellen) ILC3-gemedieerde colitis op een IL-10-onafhankelijke manier voorkwamen. Treg-cellen remde de productie van IL-23 en IL-1beta uit intestinale cx3cr1(+) macrofagen maar niet CD103(+) dendritische cellen. Bovendien hielden Treg-cellen de ILC3-productie van IL-22 tegen door onderdrukking van de cx3cr1 (+) macrofaagproductie van IL-23 en IL-1beta. Deze onderdrukking was contactafhankelijk en werd gemedieerd door latent activeringsgen-3 (LAG-3)-een immune checkpointreceptor-uitgedrukt op Treg-cellen. Betrokkenheid van LAG-3 op MHC klasse II leidde tot een diepgaande immunosuppressie van cx3cr1 (+) Weefsel-residente macrofagen. Onze studie toont aan dat de gezondheid van het darmslijmvlies wordt gehandhaafd door een as gedreven door Treg cellen communicatie met resident macrofagen die inflammatoire stimuli nodig voor ILC3 functie achter te houden.

Gordon, S. R., et al. (2017). “PD-1 expressie door tumor-geassocieerde macrofagen remt fagocytose en tumorimmuniteit.”Nature 545 (7655): 495-499. PubMed

geprogrammeerde celdoodproteïne 1 (PD-1) is een immuuncheckpointreceptor die wordt opgereguleerd op geactiveerde T-cellen voor de inductie van immuuntolerantie. Tumorcellen overexpressie het ligand vaak voor PD-1, geprogrammeerde celdood ligand 1 (PD-L1), waardoor hun ontsnapping uit het immuunsysteem. Monoklonale antilichamen die de interactie tussen PD-1 en PD-L1 blokkeren, door binding aan de ligand of receptor, hebben opmerkelijke klinische werkzaamheid aangetoond bij patiënten met een verscheidenheid aan kanker, waaronder melanoom, colorectale kanker, niet-kleincellige longkanker en Hodgkinlymfoom. Hoewel bekend is dat PD-1-PD-L1 blokkade T-cellen activeert, is er weinig bekend over de rol die deze route kan hebben in tumorgeassocieerde macrofagen (Tams). Hier laten we zien dat zowel muis als mens Tams express PD-1. Tam PD-1-expressie neemt in de loop van de tijd toe in muismodellen van kanker en met het verhogen van het ziektestadium in primaire menselijke kanker. Tam PD-1 expressie correleert negatief met fagocytaire potentie tegen tumorcellen, en blokkade van PD-1-PD-L1 in vivo verhoogt macrofaagfagocytose, vermindert tumorgroei en verlengt de overleving van muizen in muismodellen van kanker op een macrofaagafhankelijke manier. Dit stelt voor dat de therapie van PD-1-PD-L1 ook door een direct effect op macrophages kan functioneren, met wezenlijke implicaties voor de behandeling van kanker met deze agenten.

Moynihan, K. D., et al. (2016). “Uitroeiing van grote gevestigde tumoren in muizen door combinatie-immunotherapie die aangeboren en adaptieve immuunreacties engageert.”Nat Med. doi: 10.1038 / nm.4200. PubMed

Controlepuntblokkade met antilichamen specifiek voor cytotoxisch T-lymfocyt-geassocieerd eiwit (CTLA)-4 of geprogrammeerde celdood 1 (PDCD1; ook bekend als PD-1) veroorzaakt duurzame tumorregressie bij gemetastaseerde kanker, maar deze dramatische reacties zijn beperkt tot een minderheid van de patiënten. Deze suboptimale uitkomst is waarschijnlijk gedeeltelijk te wijten aan het complexe netwerk van immunosuppressieve Routes aanwezig in gevorderde tumoren, die waarschijnlijk niet worden overwonnen door interventie bij een enkel signaalcontrolepunt. Hier beschrijven we een combinatie immunotherapie die een verscheidenheid van aangeboren en adaptieve immuuncellen rekruteert om grote tumorlasten in syngenetische tumormodellen en een genetisch gemanipuleerde muis model van melanoom te elimineren; voor onze kennis tumoren van deze omvang zijn niet eerder genezen door behandelingen die vertrouwen op endogene immuniteit. Maximale antitumor werkzaamheid vereist vier componenten: een tumor-antigeen-targeting antilichaam, een recombinant interleukine-2 met een verlengde halfwaardetijd, anti-PD-1 en een krachtig T-cel vaccin. De uitputtingsexperimenten toonden aan dat CD8 + T-cellen, kruis-presenterend dendritische cellen en verscheidene andere aangeboren immune cel subsets voor tumorregressie werden vereist. Effectieve behandeling geïnduceerde infiltratie van immuuncellen en productie van ontstekingscytokines in de tumor, verbeterde antilichaam-gemedieerde tumorantigeen opname en bevorderd antigeen verspreiden. Deze resultaten tonen de capaciteit aan van een opgewekte endogene immune reactie om grote, gevestigde tumors te vernietigen en essentiële kenmerken van combinatieimmunotherapieën te verduidelijken die in staat zijn om een meerderheid van tumors in experimentele die settings typisch als hardnekkig worden beschouwd te genezen.

Arnold, I. C., et al. (2015). “CD11c monocyte / macrofagen bevorderen chronische Helicobacter hepaticus-geïnduceerde intestinale ontsteking door de productie van IL-23.”Mucosal Immunol. doi: 10.1038 / mi.2015.65. PubMed

bij inflammatoire darmaandoeningen gaat een afbraak van microbiële gastheer-interacties gepaard met aanhoudende activering van immuuncellen in de darm. Functionele studies suggereren een belangrijke rol voor interleukine-23 (IL-23) in het orkestreren van intestinale ontsteking. IL-23 kan worden geproduceerd door verschillende mononucleaire fagocyten (MNP ‘ s) na acute microbiële stimulatie, maar er is weinig bekend over de belangrijkste cellulaire bronnen van IL-23 die chronische darmontsteking veroorzaken. Hier hebben we deze vraag behandeld met behulp van een fysiologisch model van bacteriën-gedreven colitis. Door het combineren van voorwaardelijke gen ablatie en genexpressie profilering, vonden we dat IL-23 productie door CD11c+ MNPs essentieel was om intestinale immunopathologie te activeren en identificeerden MHCII+ monocyten en macrofagen als de belangrijkste bron van IL-23. Expressie van IL-23 door monocyten werd verkregen tijdens hun differentiatie in de darm en gecorreleerd met de expressie van belangrijke histocompatibiliteit complexe klasse II (MHCII) en CD64. In tegenstelling, Batf3-afhankelijke CD103+ CD11b – dendritische cellen waren vervangbaar voor bacteriën-geïnduceerde colitis in dit model. Deze studies versterken de pathogene rol van monocyten in ontregelde reacties op darmbacteriën en identificeren de productie van IL-23 als een belangrijke component van deze reactie. Verder begrip van de functionele bronnen van IL-23 in diverse vormen van intestinale ontsteking kan leiden tot nieuwe therapeutische strategieën gericht op het onderbreken van IL-23-gedreven immuunpathologie.Mucosal Immunology advance online publicatie 5 augustus 2015. doi: 10.1038 / mi.2015.65.

Conde, P., et al. (2015). “DC-SIGN (+) macrofagen regelen de inductie van Transplantatietolerantie.”Immunity 42 (6): 1143-1158. PubMed

Weefseleffectorcellen van de monocytenlijn kunnen differentiëren in verschillende celtypen met specifieke celfunctie, afhankelijk van hun omgeving. Het fenotype, de ontwikkelingseisen en de functionele mechanismen van immuunbeschermende macrofagen die de inductie van transplantatietolerantie bemiddelen, blijven ongrijpbaar. Hier, tonen wij aan dat de costimulatory blokkade accumulatie van DC-teken-uitdrukkende macrofagen bevorderde die CD8(+) T celimmuniteit inhibeerde en CD4(+)Foxp3(+) Treg celuitbreiding in aantallen bevorderde. Mechanistisch was die gelijktijdige betrokkenheid van het DC-teken door fucosylated liganden en TLR4-signalering vereist voor de productie van immunoregulerende IL-10 geassocieerd met verlengde overleving van allograft. Deletie van DC-teken-uitdrukkende macrofagen in vivo, interfererend met hun CSF1-afhankelijke ontwikkeling, of het verhinderen van de DC-teken signalerende weg opgeheven tolerantie. Samen geven de resultaten nieuwe inzichten in de tolerogene effecten van costimulerende blokkade en identificeren DC-SIGN(+) suppressieve macrofagen als cruciale mediatoren van immunologische tolerantie met de bijbehorende therapeutische implicaties in de kliniek.

Kaminsky, L. W., et al. (2015). “Redundante functie van Plasmacytoïde en conventionele dendritische cellen is nodig om een natuurlijke virusinfectie te overleven.”J Virol 89 (19): 9974-9985. PubMed

virussen die zich systemisch verspreiden vanuit een perifere infectieplaats veroorzaken morbiditeit en mortaliteit in de menselijke populatie. Aangeboren myeloïde cellen, waaronder monocyten, macrofagen, van monocyten afgeleide dendritische cellen (mo-DC) en dendritische cellen (DC), reageren vroeg tijdens virale infectie om de virale replicatie onder controle te houden, waardoor de verspreiding van het virus vanuit de perifere plaats wordt verminderd. Ectromeliavirus (ECTV), een orthopoxvirus dat de muis op natuurlijke wijze infecteert, verspreidt zich systemisch vanaf de perifere plaats van infectie en resulteert in de dood van gevoelige muizen. Terwijl fagocytic cellen een vereiste rol in de reactie op ECTV hebben, is de vereiste voor individuele myeloid celpopulaties tijdens scherpe immune reacties op perifere virale besmetting onduidelijk. In deze studie, werden een verscheidenheid van myeloid-specifieke uitputtings methodes gebruikt om de rollen van individuele myeloid cel subsets in de overleving van ECTV besmetting te ontleden. We toonden aan dat DC de primaire producenten zijn van type I interferonen (T1-IFN), noodzakelijke cytokines voor overleving, na ECTV infectie. DC, maar geen macrofagen, monocyten of granulocyten, waren nodig voor de controle van het virus en de overleving van muizen na ECTV-infectie. Depletie van plasmacytoïde DC (PDC) alleen of de lymfoïde-residente DC subset (CD8alpha(+) DC) alleen gaf geen letale gevoeligheid voor ECTV. De functie van ten minste één van de PDC-of CD8alpha(+) DC-subgroepen is echter vereist voor de overleving van ECTV-infectie, aangezien muizen die van beide populaties uitgeput zijn, gevoelig waren voor ECTV-challenge. De aanwezigheid van ten minste één van deze DC-subgroepen is voldoende voor cytokineproductie die ECTV-replicatie en virusverspreiding vermindert, waardoor overleving na infectie wordt vergemakkelijkt. Belang: voorafgaand aan de uitroeiing van het variolavirus, het orthopoxvirus dat pokken veroorzaakt, bezweek een derde van de geïnfecteerde mensen aan de ziekte. Na succesvolle uitroeiing van pokken zijn de vaccinatiepercentages met het pokkenvaccin aanzienlijk gedaald. Er is nu een toenemende incidentie van zoönotische orthopoxvirusinfecties waarvoor geen effectieve behandeling bestaat. Bovendien is de veiligheid van het pokkenvaccin van groot belang, aangezien er complicaties kunnen optreden die leiden tot morbiditeit. Zoals veel virussen die significante menselijke ziekten veroorzaken, verspreiden orthopoxvirussen zich van een perifere plaats van besmetting om systemisch te worden. Deze studie verheldert de vroege behoefte aan aangeboren immuuncellen bij het beheersen van een perifere infectie met ECTV, de veroorzaker van mousepox. We melden dat er redundantie is in de functie van twee aangeboren immuuncel subsets in het beheersen van virus verspreiding vroeg tijdens infectie. De virale controle gemedieerd door deze cel subsets presenteert een potentieel doel voor therapieën en rationeel vaccinontwerp.

Naik, S., et al. (2015). “Commensale-dendritische-cel interactie specificeert een unieke beschermende huid immuun handtekening.”Nature 520 (7545): 104-108. PubMed

de huid vertegenwoordigt de primaire interface tussen de gastheer en de omgeving. Dit orgaan is ook de thuisbasis van biljoenen micro-organismen die een belangrijke rol spelen in weefselhomeostase en lokale immuniteit. De microbiële gemeenschappen van de huid zijn hoogst divers en kunnen na verloop van tijd of in antwoord op milieuuitdagingen worden gehermodelleerd. Hoe, in de context van deze complexiteit, individuele commensale micro-organismen de immuniteit van de huid differentieel kunnen moduleren en de gevolgen van deze reacties voor de weefselfysiologie blijven onduidelijk. Hier tonen wij aan dat de gedefinieerde commensalen huidimmuniteit dominant beà nvloeden en de cellulaire bemiddelaars identificeren betrokken bij deze specificatie. In het bijzonder induceert kolonisatie met Staphylococcus epidermidis IL-17A(+) CD8(+) T-cellen die de epidermis huisvesten, de aangeboren barrièreimmuniteit versterken en de invasie van pathogenen beperken. Commensaal-specifieke T-cel reacties zijn het resultaat van de gecoördineerde actie van huid-residente dendritische cel subsets en worden niet geassocieerd met ontsteking, waaruit blijkt dat weefsel-residente cellen klaar zijn om te voelen en te reageren op veranderingen in microbiële gemeenschappen. Deze interactie kan een evolutionair middel vertegenwoordigen waardoor het huidimmuunsysteem fluctuerende commensale signalen gebruikt om barrièreimmuniteit te kalibreren en heterologe bescherming tegen invasieve ziekteverwekkers te bieden. Deze bevindingen onthullen dat het immune landschap van de huid een hoogst dynamisch milieu is dat snel en specifiek door ontmoetingen met gedefinieerde commensals kan worden hermodelleerd, bevindingen die diepgaande implicaties voor ons begrip van weefsel-specifieke immuniteit en pathologieën hebben.

Sheng, K. C., et al. (2014). “IL-3 en CSF-1 interageren om het genereren van CD11c+ IL-10-producerende macrofagen te bevorderen.”PLoS One 9 (4): e95208. PubMed

het ontrafelen van de mechanismen van hematopoëse gereguleerd door meerdere cytokines blijft een uitdaging in de hematologie. IL-3 is een allergisch cytokine met het multilineage potentieel, terwijl CSF-1 wordt geproduceerd in de steady state met beperkte lineage dekking. Hier ontdekten we een leerzame rol van CSF-1 in IL-3-gemedieerde hematopoiese. CSF-1 bevorderde significant de Il-3-gestuurde CD11c+ – celuitzetting en vocht de basofiel-en mastcelgeneratie uit c57bl/6-beenmerg. Verdere studies toonden aan dat de CSF-1/CSF-1R-as significant bijdroeg tot de IL-3-geïnduceerde CD11c+-celgeneratie door het versterken van C-Fos-geassocieerde monopoiese. CD11c + – cellen geïnduceerd door IL-3 of IL-3/CSF-1 waren competent in cellulaire rijping en endocytose. Zowel IL-3 als IL-3/CSF-1 cellen ontbraken het klassieke uiterlijk van dendritische cellen en leken op macrofagen in de morfologie. Beide populaties produceerden een hoog niveau van IL-10, naast IL-1, IL-6 en TNFalpha, als reactie op LPS, en waren relatief slechte t-celstimulatoren. Collectief, onthullen deze bevindingen een rol voor CSF-1 in het bemiddelen van de hematopoietic weg IL-3 door monopoiese, die expansie van cd11c+ macrofagen regelt.

Greter, M., et al. (2012). “GM-CSF controleert niet-lymfoïde weefsel dendritische cel homeostase maar is overbodig voor de differentiatie van inflammatoire dendritische cellen.”Immunity 36 (6): 1031-1046. PubMed

GM-CSF (Csf-2) is een kritisch cytokine voor de in vitro generatie van dendritische cellen (DCs) en wordt verondersteld de ontwikkeling van inflammatoire DCs en residente CD103(+) DCs in sommige weefsels te controleren. Hier toonden we aan dat in tegenstelling tot de huidige inzichten, Csf-2 receptor werkt in de steady state om de overleving en homeostase van nonlymphoid Weefsel-resident CD103(+) en CD11b(+) DCs te bevorderen. Afwezigheid van Csf-2-receptor op Long-DCs heeft de inductie van CD8(+) T-celimmuniteit na immunisatie met deeltjesantigenen opgeheven. In tegenstelling, Csf-2 receptor was overbodig voor de differentiatie en aangeboren functie van inflammatoire DCs tijdens scherpe verwondingen. In plaats daarvan, vereiste ontstekingsdcs CSF-1 receptor voor hun ontwikkeling. Csf-2 is dus belangrijk bij de door het vaccin geïnduceerde CD8(+) T-celimmuniteit door regulatie van DC-homeostase in niet-lymfoïde weefsels in plaats van controle van inflammatoire DCs in vivo.

Li, W., et al. (2012). “Intravital 2-foton beeldvorming van leukocyten handel in kloppend hart.”J Clin Invest 122 (7): 2499-2508. PubMed

twee-foton intravital microscopie heeft ons begrip van weefsel – en orgaanspecifieke verschillen in de regulatie van inflammatoire reacties aanzienlijk verbreed. Nochtans, is weinig bekend over de dynamische regelgeving van leukocytenwerving in ontstoken hartweefsel, grotendeels toe te schrijven aan technische moeilijkheden inherent aan weergave bewegend Weefsel. Hier melden we een methode voor beeldvorming kloppen muriene harten met behulp van intravital 2-foton microscopie. Met behulp van deze methode, visualiseerden we neutrofiel handel bij baseline en tijdens ontsteking. Ischemie reperfusie letsel veroorzaakt door transplantatie of voorbijgaande coronaire ligatie leidde tot rekrutering van neutrofielen aan het hart, hun extravasatie van coronaire aders, en infiltratie van het myocardium waar ze vormden grote clusters. Enten harten met mutant ICAM-1, een ligand belangrijk voor neutrofiel rekrutering, verminderde de kruipende snelheden van neutrofielen binnen schepen, en sterk geremd hun extravasatie. Een soortgelijke stoornis werd waargenomen bij de remming van Mac-1, een receptor voor ICAM-1. Blokkade van LFA-1, een andere ICAM-1 receptor, verhinderde neutrofielaanhechting aan endotheel en extravasatie in harttransplantaten. Aangezien de ontstekingsreacties in het hart voor Volksgezondheid van groot belang zijn, houdt deze weergavebenadering belofte voor het bestuderen van hart-specifieke mechanismen van leukocytenwerving en het identificeren van nieuwe therapeutische doelstellingen voor het behandelen van hartkwaal in.

Tagliani, E., et al. (2011). “Coordinate regulation of tissue macrofage and dendritic cell population dynamics by CSF-1.”J Exp Med 208 (9): 1901-1916. PubMed

weefselmacrofagen (Mphis) en dendritische cellen (DCs) spelen een essentiële rol in weefselhomeostase en immuniteit. Hoe deze cellen op hun karakteristieke dichtheden in verschillende weefsels worden gehandhaafd is onduidelijk gebleven. Geholpen door een nieuwe flow cytometrische techniek voor het beoordelen van de relatieve snelheid van bloed-borne precursor rekrutering, hebben we onderzocht mphi en DC populatiedynamiek in de zwangere muis baarmoeder, waar snelle weefselgroei vergemakkelijkt een ontleding van de onderliggende regulerende mechanismen. We laten zien hoe mphi dynamica, en dus mphi weefseldichtheid, lokaal worden gecontroleerd door CSF-1, een pleiotrope groeifactor waarvan het activiteitsniveau in situ sterk varieerde tussen baarmoederweefsellagen. CSF-1 werkte gedeeltelijk door mphi-proliferatie te induceren en gedeeltelijk door de extravasatie van Ly6C(hi) monocyten (Mos) te stimuleren die als mphi-precursoren dienden. De rekrutering van Mo was afhankelijk van de productie van CCR2 chemokine receptor liganden door uteriene Mphis als reactie op CSF-1. Onverwacht beïnvloedde een parallelle CSF-1-gereguleerde, maar CCR2-onafhankelijke Route de uteriene DC-weefseldichtheid door lokale pre-DC-extravasatiepercentages te regelen. Samen, bieden deze gegevens cellulair en moleculair inzicht in de regulatie van mphi weefseldichtheid onder niet-inflammatoire voorwaarden en onthullen een centrale rol voor CSF-1 in de coördinatie van mphi en DC homeostase.

Lim, A. K., et al. (2009). “Antilichaam blokkade van c-fms onderdrukt de progressie van ontsteking en letsel in vroege diabetische nefropathie bij obese db/db muizen.”Diabetologia 52 (8): 1669-1679. PubMed

doelstellingen / hypothese: macrofaaggemedieerde nierschade speelt een belangrijke rol bij de ontwikkeling van diabetische nefropathie. Koloniestimulerende factor (CSF)-1 is een cytokine dat wordt geproduceerd in diabetische nieren en macrofaag accumulatie, activering en overleving bevordert. CSF-1 werkt uitsluitend via de C-fms-receptor, die alleen wordt uitgedrukt op cellen van de monocyt-macrofaag lijn. Daarom gebruikten we c-fms blokkade als een strategie om selectief te richten op macrofaag-gemedieerde schade tijdens de progressie van diabetische nefropathie. METHODE: Obese, type 2 diabetische db / db BL/KS muizen met vastgestelde albuminurie werden behandeld met een neutraliserende anti-C-fms monoklonaal antilichaam (AFS98) of isotype-overeenkomende controle-IgG van 12 tot 18 weken oud en onderzocht op nierschade. Resultaten: de behandeling met AFS98 had geen effect op obesitas, hyperglykemie, circulerende monocytenspiegels of vastgestelde albuminurie bij db/db muizen. AFS98 voorkwam echter wel glomerulaire hyperfiltratie en onderdrukte ontstekingsvariabelen in de diabetische nier, waaronder niermacrofagen (accumulatie, activering en proliferatie), chemokine CC-motief ligand 2-spiegels (mRNA en urine-eiwit), nieractivering van pro-inflammatoire routes (C-Jun amino-terminale kinase en activerende transcriptiefactor 2) en Tnf-alfa (ook bekend als Tnf) mRNA-spiegels. Bovendien verminderde AFS98 de weefselschade veroorzaakt door macrofagen, waaronder tubulaire schade (apoptose en hypertrofie), interstitiële schade (celproliferatie en myofibroblastopbouw) en renale fibrose (TGF-beta1 en Col4a1 mRNA). Conclusies / interpretatie: blokkade van c-fms kan de progressie van vastgestelde diabetische nefropathie bij db/db muizen onderdrukken door zich te richten op macrofaag-gemedieerde schade.